不同方法检测血清HBV DNA水平的比较

目前,检测慢性乙型病毒性肝炎血清或血浆病毒的几种分子生物学技术均建立在靶序列或者信号扩增的基础之上,如Quantiplex HBV DNA（bDNA）技术即是基于分支链DNA技术的信号扩增,而COBAS Amplicor则是基于引物特异的靶序列扩增。其他尚有基于核苷酸交联技术的定量检测方法也为实验室所常用。然而以上方法对于开展临床大规模检测来说成本昂贵,不适用于经济不发达地区。     

核苷类似物干预下慢性乙型病毒性肝炎患者HBV多聚酶区基因突变检测分析

目的 研究重庆地区慢性乙型病毒性肝炎(慢乙肝)患者核苷类似物治疗过程中HBV多聚酶区(P)基因变异情况.方法 选取350例接受核苷类似物治疗后出现病毒学突破的慢乙肝患者作为研究对象,采用PCR产物直接测序法,分析HBV P区基因变异发生情况.结果 350例患者中有124例检测出基因型耐药,C基因型在基因型耐药患者中所占...     

初治多发性骨髓瘤患者的基因突变及表达异常

目的:分析初治多发性骨髓瘤(NDMM)患者常见基因的突变及表达异常。方法:取208例NDMM患者的骨髓细胞,用DNA测序法检测6种基因的表达水平及28种基因的突变状态。应用FISH法检测多发性骨髓瘤常见的细胞遗传学异常。结果:61例(29.33%)NDMM患者检测到基因突变,≥5例患者发生突变的基因包括NRAS、PRDM1、FAM46C、MYC、CCND1、LTB、DIS3、KRAS和CRBN。83例(39.90%)患者检测到6种基因的过表达,以细胞周期调节基因的过表达为主,分别是CCND1、CCND3、BCL-2、CCND2 FGFR3和MYC。169例(81.25%)患者检测到基因单核苷酸多态性改变,主要为TP53基因P72R多态性(70.17%)。染色体结构异常与基因表达异常有一定相关性,与染色体结构正常者相比较,14q32缺失患者中CCND1基因过表达比例更高,13q14缺失患者中FGFR3过表达比例更高,而1q21扩增患者中CCND2、BCL-2、FGFR3基因过表达比例更高。结论:NDMM患者存在多种基因突变和表达异常,但是缺乏主要的单个基因突变或表达异常。累及RAS/MA...     

ELISA法检测乙肝患者抗-HBs假阳性1例

病例男,30岁,患乙肝大三阳3年;以往在其他医院（具体不详）检查HBsAg均阳性。2009年12月8日早晨,空腹以真空采血管按要求定量采血检查病毒性肝炎血清标志物,按常规操作分离血清,无溶血、无凝块、无乳糜及黄疸。ELISA实验采用上海科华生物技术有限公司的试剂,批号20090909,有效期为20100909;ELISA法操作和质控均按操作规范进行。金标试剂为北京万泰生物药业有限公司产品,     

抗丙型肝炎病毒治疗中的病毒学应答对持续应答的预测价值

慢性HCV感染极易发展成肝硬化和肝癌,抗病毒治疗是惟一有可能延缓或阻止其进程的有效方法.目前最理想的抗病毒治疗方案为聚乙二醇干扰素(PEG-IFN)联介利巴韦林.获得持续病毒学应答(SVR)是评价其疗效的主婴指标,但多种宿主因索和病毒因素都可能影响其疗效.近年来有研究者认为治疗过程中病毒的应答情况能够综合反应这些因素的影响,可更好地预测其治疗效果~([1-2]).为了解不同基因型HCV感染者在抗病毒治疗过程中的病毒学应答情况对SVR的预测价值,为对不同基因型HCV感染者制定更加合理的个体化治疗方案提供参考,本研究对近年来在本院接受PEG-IFN联合利巴韦林治疗的慢性HCV感染者的相关资料做了回顾性分析.     

聚醚砜绒毛膜培养L02细胞的初步研究

目的初步观察一种聚醚砜(polyethersulfone,PES)绒毛膜对人肝细胞系L02细胞培养的支持作用,以探讨该种PES膜材料用于生物人工肝的可行性。方法 PES绒毛膜材料利用非对称性冷却成型技术制备而成。将L02细胞以7.0×104的密度接种于该膜上,分别用悬浮细胞计数法、MTT法、激光共聚焦显微镜、扫描电镜和RT-PCR法来观察L02细胞在该材料上的贴壁率、细胞活性、生长特性及AFP和CYP1A1的基因表达,并以无绒毛型平板膜材料和普通培养板做为对照。结果①PES绒毛膜上L02细胞生长良好,在10h内贴壁率由57.7%增高到91.7%,优于平板膜,与培养板相似;细胞活性8d内增长4至5倍,优于平板膜和培养板。②激光共聚焦显微镜下观察L02细胞在绒毛膜上粘附呈多细胞聚集生长,保持活性;扫描电镜证实了该结果,且逐渐融合形成紧密连接,并见部分细胞呈三维立体生长。③培养于PES绒毛膜上的L02细胞AFP和CYP1A1的表达优于平板膜,与培养板一致。结论 PES绒毛膜能够有效的支持L02细胞在其表面粘附、生长、增殖和AFP及CYP1A1基因的表达,可成为生物人工肝支持系统的膜材料。     

血清胆红素与甲状腺激素在糖尿病患者中的变化及意义

目的探讨2型糖尿病（T2DM）患者血清胆红素和甲状腺激素水平的变化及临床意义。方法检测87例T2DM患者和45例健康人血清胆红素和血清甲状腺激素。结果 T2DM患者FT3和IBIL水平分别为2.6±1.1pmol/L和5.0±2.8μmol/L,显著低于正常对照组的4.8±1.0pmol/L和8.8±2.6μmol/L（P〈0.05）;血糖控制差的患者FT3和IBIL水平较低（P〈0.05）;轻症糖尿病组FT3和IBIL水平分别为3.03±1.21pmol/L和7.51±3.17μmol/L,而重症组治疗前分别为1.91±0.86pmol/L和6.25±2.85μmol/L,治疗后为3.55±1.29pmol/L和8.11±3.06μmol/L。结论 FT3和IBIL水平变化与T2DM病情密切相关,可为临床诊治提供参考依据。     

TLR9受体介导枯否细胞对转染HepG2细胞HBx信号转导的抑制作用

目的探讨胞嘧啶鸟嘌呤二核苷酸-脱氧寡核苷酸激活类铎受体9信号通路抑制肝脏肿瘤细胞增殖的免疫机制。方法首先将乙型肝炎病毒X基因真核表达质粒转染入HepG2细胞,以空质粒转染HepG2细胞为对照组,24h后以β-actin为内参照对HBx蛋白表达进行Westernblotting鉴定;然后分别将CpG或CpG对照和枯否细胞加入转染HepG2细胞培养体系中进行共培养,12h后收集上清液,采用ELISA法检测干扰素(IFN)-α和IFN-γ,同时收集贴壁的HepG2细胞进行双荧光素酶活性检测。结果Westernblotting鉴定显示转染的HepG2细胞表达特异性HBx蛋白;双荧光素酶活性检测显示KC细胞与CpG加入转染HepG2细胞培养体系后HBx信号转导活性下降35%;CpG激活的KC细胞产生大量的IFN-α和IFN-γ,与对照组相比分别上升了8.7倍和6.5倍。结论CpG激活KC细胞产生多种干扰素,抑制HBx信号转导,这为通过阻断HBx信号转导治疗肝癌提供了理论依据。