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摘要: 目的 制作肝脏特异性高表达人胆固醇酯转移蛋白(CETP)转基因家兔并对其生物学特性分析进行分析。方法 利用显微注射方法制作CETP转基因家兔,利用Western Blot、Real-time PCR和CETP活性鉴定试剂盒鉴定模型家兔中人CETP转基因的表达和活性。结果 PCR检验结果显示我们成功获得CETP转基因家兔,转基因主要在肝脏特异性表达,其血浆CETP活性相对于非转基因家兔明显升高。结论 本研究首次成功建立了高表达人CETP的转基因家兔,为研究CETP功能和其参与心血管疾病的机制提供了良好模型。 相似文献
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目的:研究载脂蛋白(a)[apo(a)]对表达人apo(a)基因的WHHL转基因家免动脉粥样硬化的影响。方法:制备表达人apo(a)的WHHL转基因家兔,比较WHHL转基因家兔与WHHL非转基因家兔的动脉粥样硬化病变程度及病变特点。结果:WHHL转基因家兔血浆中apo(a)浓度大约为150 mg·L-1,血浆脂质水平与WHHL非转基因兔相近。WHHL转基因家兔的病变以纤维斑块和粥样变即复合病变为主,而非转基因家兔的病变则大多为脂肪条纹。兔疫组化研究结果表明转基因WHHL家兔的病变中的纤维帽主要由平滑肌细胞构成,病变的坏死灶内含有大量的有巨噬细胞衍变而来的泡沫细胞。apo(a)主要沉积在平滑肌比较丰富的区域,另一个比较明显的特征是转基因家兔的病变内有大量钙化形成,而在非转基因家兔体内则几乎没有。结论:apo(a)促进表达人apo(a)基因的WHHL转基因家兔产生复合动脉粥样硬化。 相似文献
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心肌梗死是发达国家的主要致死因素之一,在我国随着生活习惯的改变及胆固醇摄取量的增加而增加.但对心肌梗死的研究及治疗因为没有合适的动物模型一直受到很大的限制.心肌梗死动物模型的研制及开发不但可以研究心肌梗死的发病机制以预防心肌梗死的发生,也将为制定新的治疗方案用于治疗心肌梗死提供理论依据.本文将回顾这一方面的国际进展情况,特别是将我们最近研制成功的自发型心肌梗死家兔模型作一重点介绍.此种家兔血中胆固醇水平明显升高,心电图发现心肌梗死的典型征象.病理组织学分析表明,此种家兔心肌梗死病变为陈旧性心肌梗死病变伴急性梗死病变,与人类心肌梗死相似.导致心肌梗死病变部位的冠状动脉呈严重的粥样硬化,狭窄程度达90%以上,且有些斑块为不稳定性斑块.这些结果表明此种家兔可以作为人类心肌梗死的一种合适动物模型. 相似文献
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目的:在构建巨噬细胞特异表达且带有染色质隔离子的人基质金属蛋白酶-12(hMMP-12)转基因表达载体的基础上构建hMMP-12转基因兔动物模型。方法:首先通过RT-PCR方法扩增hMMP-12基因.产物亚克隆到pGEM—T载体,测序后获得pGEM—T-hMMP-12,然后利用pJC13构建带有染色质隔离子和清道夫受体A增强子、启动子和人生长激素尾的亚克隆pJC13-SR,再利用pGEM-T-hMMP-12和pJC13-SR重组质粒,构建巨噬细胞特异性的转基因表达载体pJCl3-SR.hMMP-12,最后pJCl3-SR—hMMP-12表达载体线性化,显微注射家兔受精卵制备转基因兔,并进行PCR扩增及Southern Blot转基因效果分析鉴定。结果:(1)通过DNA测序和限制性核酸内切酶酶切鉴定证实,hMMP-12成功克隆到所需表达载体中;(2)转基因后获得仔兔36只,以PCR检测结果计算,转基因总效率为1.4%-3.4%,整合率为20%-50%;以Southern Blot检测结果计算,转基因总效率为0.5%.2.2%,整合率为13%~17%。结论:转基图表达载体的成功构建,为hMMP-12转基因兔动物模型的构建和研究MMP-12在动脉粥样硬化的形成和发展中的作用机制奠定了基础。 相似文献
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转基因兔在动脉粥样硬化研究中的应用及其进展 总被引:10,自引:1,他引:9
家兔脂蛋白组成和脂代谢特点适合研究人的动脉粥样硬化疾病,携带与动脉粥样硬化相关人基因的转基因兔又成为研究人脂蛋白代谢和动脉粥样硬化一个独特工具。到目前为止,携带人载脂蛋白(a)、载脂蛋白AI、载脂蛋白B、载脂蛋白E2、载脂蛋白、肝脂酶、卵磷脂-胆固醇酰基转移酶、脂蛋白脂酶、15-脂质氧化酶、基质金属蛋白酶12,以及家兔的载脂蛋白BmRNA编码蛋白催化多肽1基因等已经在家兔身上表达。另外,人的栽脂蛋白(a)、栽脂蛋白AI、卵磷脂-胆固醇酰基转移酶和脂蛋白脂酶基因也已经被导入到低密度脂蛋白受体缺陷的WHHL家兔体内。本文对利用转基因兔在研究脂质代谢和动脉粥样硬化方面取得的进展进行了回顾总结。 相似文献
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动脉内膜浅表损伤方法的研究 总被引:1,自引:0,他引:1
为研究动脉内膜损伤后内皮细胞的再生修复过程,从而探讨动脉粥样硬化的发病机理,作者设计了在大鼠颈动脉限定段内注射蒸馏水制造内膜浅表损伤的方法。通过用Evans blue活体染色和电镜观察结果,认为这种方法操作简便、效果确实,造成内皮细胞完全脱落,而无内弹力板和中膜的损伤,是研究浅表性内膜损伤后内皮细胞愈合过程的良好方法。 相似文献
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兔动脉壁损伤后脂蛋白脂酶的高表达与动脉粥样硬化早期病变形成的关系 总被引:1,自引:0,他引:1
目的 :探讨动脉壁脂蛋白脂酶 (LPL)的高表达在动脉粥样硬化发生中的作用。方法 :新西兰兔 16只 ,随机分为 2组。经球囊导管损伤颈总动脉后 ,以腺病毒为载体转移人LPL称实验组及人碱性磷酸酶 (AP)基因为对照组。 7天后通过油红O染色及免疫组化对血管壁的形态进行分析。结果 :应用腺病毒载体有效介导了外源性LPL和AP基因分别在家兔球囊损伤的血管内膜下的高表达。实验组血管壁内膜下有明显的脂质沉积 ,定量分析显示比对照组增高近 3 7倍。同时发现载脂蛋白B在表达LPL的动脉壁内膜下沉积也增加 ,并伴有局部巨噬细胞浸润增多。而两组实验动物的血浆总胆固醇、甘油三酯及高密度脂蛋白胆固醇水平均没有显著差异。结论 :LPL在兔动脉内膜损伤的血管壁局部高表达能够促进动脉粥样硬化早期病变的形成。 相似文献
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为探讨非清髓造血干细胞移植小鼠模型的制备,以10-12周龄C57BL/6(H-2b)雌性小鼠为受体,以10-12周龄BALB/c(H-2d)雄性小鼠为供体,移植前采用环磷酰胺200 mg/kg)加5 Gy Y射线全身照射的非清髓预处理方案,移植后36 d检测雌性受体小鼠体内Y染色体特异性基因表达作为移植植活指标。结果发现,非清髓的预处理方案下可以实现异基因造血细胞的植活,同时发现移植回输的造血细胞数量对于造模成功率有着关键作用,在回输异基因骨髓细胞数量为2×107个时移植植活率为80%(8/10)。 相似文献
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C反应蛋白在心血管疾病发病中的研究进展 总被引:1,自引:0,他引:1
C反应蛋白(C-reactive protein,CRP)作为炎症标记物在临床检查上被广泛应用,近年来有许多报道提示,CRP与心肌梗死等动脉粥样硬化性疾病的发病密切相关[1-4]。CRP升高只是一个反映炎症状态的标记物,还是直接与动脉粥样硬化的进展和诱发心肌梗死有关,目前尚不完全清楚。有关CRP广泛存在于动脉粥样硬化病变中[5]、产生CRP的脏器、CRP对动脉粥样硬 相似文献