盐酸贝那普利对TGF-β1诱导的子宫内膜上皮及间质细胞纤维化的保护作用研究

目的探索盐酸贝那普利对转化生长因子β1(TGF-β1)诱导人子宫内膜上皮及间质细胞纤维化的保护作用及其可能机制。方法将人子宫内膜上皮细胞(AN3CA)及人子宫内膜间质细胞(hESC)用TGF-β1诱导纤维化。分为对照组、实验组(TGF-β15 ng/ml处理)、BNPL5组(TGF-β15 ng/ml+盐酸贝那普利5μmol/L处理)和BNPL8组(TGF-β15 ng/ml+盐酸贝那普利8μmol/L处理),AN3CA细胞共培养48 h,hESC细胞共培养72 h,镜下观察细胞形态,CellTiter-Glo检测细胞活力,流式细胞仪检测细胞凋亡情况,蛋白质印迹法检测相应纤维化蛋白。结果盐酸贝那普利可部分逆转TGF-β1对AN3CA细胞的形态学改变,hESC细胞经过TGF-β1处理后形态无明显变化;促进TGF-β1诱导后的AN3CA细胞的增殖活力,降低AN3CA细胞凋亡水平(实验组:12.11±0.465,BNPL8组:7.68±0.818,P<0.001);抑制TGF-β1诱导后的hESC细胞的增殖活力,促进其细胞凋亡(实验组:7.553±0.688,BNPL8组:11.047±0.118,P=0.016);盐酸贝那普利诱导后AN3CA及hESC细胞相关纤维化因子Fibronectin、TGF-β1、smad3的表达均有下降。结论盐酸贝那普利可以改善TGF-β1诱导的子宫内膜上皮及间质细胞的纤维化改变。     

人卵巢癌荷瘤裸鼠肿瘤微环境局部F4 / 80 阳性巨噬细胞表达Foxp3

目的:探讨人卵巢癌裸鼠腹腔荷瘤模型体内F4/80阳性巨噬细胞是否表达Foxp3,初步探索卵巢癌改造免疫微环境促进自身发展的新机制。方法:应用人卵巢癌细胞系SKOV3构建人卵巢癌裸鼠腹腔荷瘤模型为实验组,以未处理裸鼠为对照组,流式细胞术检测两组外周血和腹水中F4/80阳性巨噬细胞Foxp3的表达情况。应用流式细胞分选两组腹水中F4/80阳性巨噬细胞,分别应用Western blot和PCR检测该细胞中Foxp3在蛋白和mRNA水平的表达情况。免疫荧光双染法鉴定腹腔内卵巢癌组织局部浸润F4/80阳性巨噬细胞Foxp3的表达情况。结果:流式细胞术检测两组外周血中F4/80阳性细胞均不表达Foxp3,差异无统计学意义(P0.05)。流式细胞术和Western blot显示实验组腹水F4/80阳性巨噬细胞在蛋白水平明显表达Foxp3,实时荧光定量PCR显示实验组在mRNA水平明显表达Foxp3,与对照组比较差异均有统计学意义(P0.05)。免疫荧光双染法显示卵巢癌组织可见F4/80和Foxp3双阳性细胞。结论:卵巢癌肿瘤微环境中F4/80阳性巨噬细胞表达Foxp3,为寻找卵巢癌免疫疗法新靶点奠定基础。     

氯化锂对卵巢癌细胞增殖凋亡影响及其机制探讨

目的：观察氯化锂（1ithiumchloride,LiCl）对卵巢癌sKOV3细胞增殖活性及凋亡的影响,并探讨其作用机制。方法：使用20（A组）、40（B组）和60（C组）mmol／LLiCl处理sKOV3细胞,正常对照组用等体积的细胞培养基培养。采用CCK8法观察LiCl对卵巢癌SKOV3细胞增殖活性的影响;流式细胞仪检测LiCl作用后细胞周期变化及凋亡情况。蛋白质印迹法检测细胞糖原合成酶激酶-3β（glycogensynthasekinase317,GSK-3β）、磷酸化糖原合成酶激酶-317（phos—phorglation—glycogensynthasekinase3β,p-GSK-3β）及有丝分裂阻滞缺陷蛋白2（mitoticarrestdeficient2,MAD2）蛋白表达的变化。结果：不同浓度LiCl分别作用于SKOV3细胞48h后,A组细胞增殖活性为（80．64±1．06）％,与B组（57．18±1．56）％比较,差异有统计学意义,P=0．001;与C组（43．18±6．12）％比较,差异有统计学意义,P〈0．001。B组作用24h细胞增殖活性为（75．12±9．35）％,48h为（57．18±1．56）％,72h为（35．36±1．00）％,与24h组相比,48h组（P=0．158）和72h组（P=0．036）细胞增殖活性降低。LiCl能有效抑制SKOV3细胞增殖,呈时间与剂量依赖性。不同浓度LiCl作用96h后SKOV3细胞的凋亡率相对于对照组升高,A组为（7．82±0．87）％,P=0．037;B组为（21．09±1．57）％,P〈O．001;C组为（27．83士0．47）%,P〈O．001,差异均有统计学意义。不同浓度LiCl作用48h后,细胞出现了明显的G2／M期阻滞,G2／M期的比例由对照组的（10．23±1．50）％依次升高,A组为（19．9±4．16）％,P=0．352;B组为（30．29±0．51）％,P=0．045;C组为（39．32±1．11）％,P=0．009,差异有统计学意义。蛋白质印迹法检测结果显示,LiCl浓度升高,p-GSK-3β蛋白相对表达量升高,A组为（54．39±2．75）％,P=0．019;B组为（72．39土2．89）％,P=0．009;C组为（86．57±2．52）％,P=0．005,差并有统计学意义。LiCl浓度升高,MAD2蛋白相对表达量升高,A组为（52．29土1．34）％,P=0．041;B组为（58．35±1．36）％,P=0．030;C组为（72．07±2．93）%,4,P=0．006,差异有统计学意义。结论：LiCl能有效抑制卵巢癌SKOV3细胞的增殖,并诱导其凋亡;上调MAD2增强有丝分裂检测点功能,最终导致细胞G2／M期阻滞可能是LiCl抑制增殖促进凋亡的机制。     

淋巴细胞相关免疫微环境在子宫内膜异位症中的研究进展

子宫内膜异位症(EMs)是育龄期女性常见的激素依赖性、炎症性、慢性疾病,表现为有功能活性的子宫内膜细胞出现在子宫腔以外的位置,其典型临床症状如慢性盆腔痛、痛经和不孕等严重影响着患者的生活质量。尽管其发病机制尚未完全清楚,但目前发现全身和局部免疫相关细胞的功能异常在其病因、病理生理学和临床表现中起着重要作用。近年来,许多研究证实子宫内膜微环境中多种免疫细胞和细胞因子的变化可能与EMs的发生有关。本文总结并分析EMs免疫微环境中淋巴细胞的分布及功能作用,进而能更好地认识EMs的发生、发展。     

孕激素抵抗在不孕症发生发展中作用的研究进展

子宫内膜容受性对成功受孕至关重要,而孕激素抵抗可降低子宫内膜容受性,影响胚胎种植,引起不孕、胚胎反复种植失败、自然流产等不良生殖结局,其已成为部分育龄期女性孕激素治疗失败导致不孕的主要原因之一.孕激素抵抗常与子宫内膜异位症(EMT)、多囊卵巢综合征(PCOS)、子宫内膜异常增生共存.在EMT中孕激素抵抗可能与炎症因子过...     

刀豆蛋白A联合淋巴细胞对卵巢癌细胞SKOV3影响观察

目的：体外研究刀豆蛋白A（Concanavalin A,Con A）联合淋巴细胞对人卵巢癌细胞株SKOV3细胞形态、活力、凋亡以及顺铂敏感性的影响。方法：应用密度梯度离心法分离健康成人新鲜血中的单个核细胞,培养3～5d待单核细胞完全贴壁后分离出悬浮的淋巴细胞,与SKOV3细胞混合培养,并设对照组（未处理的SKOV3）、实验组1（SKOV3培养体系中仅加入5μg/mL Con A）、实验组2（SKOV3和淋巴细胞混合培养）和实验组3（SKOV3和淋巴细胞混合培养体系中加入5μg/mL Con A）。培养7d后将SKOV3分离出继续培养,并进行以下实验,在光学显微镜下观察细胞形态变化;CCK8检测24和48h细胞活性;流式细胞术检测24和48h细胞凋亡情况;用浓度0和60μmol/L顺铂处理SKOV3细胞24和48h后,流式细胞术检测细胞凋亡率以判断细胞对顺铂的敏感性。结果：与对照组比较,实验组1和实验组2中细胞无明显改变,而实验组3中SKOV3与淋巴细胞混合培养后发生明显改变,如细胞突起减少,细胞变圆。与对照组比较,实验组1中24和48h细胞存活率分别为（105.68±7.12）%（z=-1.256,P=0.30）和（111.90±8.28）%（z=-1.766,P=0.13）,实验组2分别为（101.05±5.92）%（z=-0.215,P=0.79）和（109.72±6.54）%（z=-1.766,P=0.13）,差异均无统计学意义;而实验组3分别为（25.08±7.71）%（z=-2.087,P=0.004）和（14.6±4.41）%（z=-3.431,P=0.001）,差异有统计学意义。与对照组比较,实验组1中24和48h细胞凋亡率分别为（4.43±1.49）%（z=-2.78,P=0.61）和（10.95±1.09）%（z=-1.982,P=0.08）,实验组2分别为（4.79±0.83）%（z=-1.349,P=0.28）和（10.59±1.03）%（z=-1.349,P=0.28）,差异均无统计学意义;实验组3分别为（13.88±1.00）%（z=-2.247,P=0.003）和（21.37±2.35）%（z=-2.137,P=0.006）,差异有统计学意义。顺铂处理各组SKOV3细胞后,与对照组比较,实验组1中24和48h细胞凋亡率分别为（11.25±1.86）%（z=-0.361,P=0.59）和（33.