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目的 探讨DNA甲基化对肝细胞核因子4α(HNF4α)表达的影响,及其在转化生长因子-β1 (TGF-β1)调节HNF4α表达过程中所起的作用.方法 用实时RT-PCR方法检测6种人肝癌细胞株(HepG2、Huh-7、Hep3B、SMMC-7721、BEL-7405、FOCUS)、20份人肝癌和相应癌旁组织中HNF4αP1 mRNA的表达.用亚硫酸盐测序法(BSP法)检测6种人肝癌细胞株中HNF4αP1启动子区甲基化程度.用5-脱氧杂氮胞苷(5-AZA-CdR)处理FOCUS细胞株,用BSP法检测HNF4αP1启动子区甲基化程度,用实时RT-PCR法检测HNF4αP1 mRNA的表达.用TGF-β1处理6种人肝癌细胞株,用实时RT-PCR法检测HNF4αP1 mRNA的表达.分别用5-AZA-CdR、TGF-β1、5-AZA-CdR联合TGF-β1处理FOCUS细胞株,用实时RT-PCR法检测HNF4αP1 mRNA的表达.采用f检验进行统计学分析.结果 在20份人肝癌和癌旁组织中,13份肝癌组织的HNF4αP1 mRNA相对表达量低于癌旁组织(f=2.350,P<0.05).HepG2、Huh-7、Hep3B中的HNF4αP1 mRNA相对表达量较高,SMMC-7721、BEL-7405、FOCUS中则相对较低.HepG2、Huh-7、Hep3B中HNF4αP1启动子区甲基化程度较低,SMMC-7721、BEL-7405、FOCUS中则较高.随着5-AZA-CdR浓度上升(分别为0、0.1、1.0、2.5 μmol/L),FOCUS的HNF4αP1启动子甲基化程度逐渐降低(分别为61%、46%、32%、27%),而HNF4αP1 mRNA相对表达量则逐渐增加(分别为[(9.661±0.336)×10-7、(2.001±0.432)×10-6、(3.689±0.714)×10-6、(4.732±2.451)×10-6].经TGF-β1刺激后,启动子区甲基化程度较低的HepG2、Huh-7、Hep3B的HNF4αP1 mRNA相对表达量下调(t=12.994、8.441、9.032,P均<0.01),启动子区甲基化程度较高的SMMC-7721、BEL-7405、FOCUS的HNF4αP1 mRNA相对表达量变化差异均无统计学意义(P均>0.05).经5-AZA-CdR处理的FOCUS细胞株的HNF4αP1 mRNA相对表达量[(4.972±0.035)×10-6]高于空白对照组[(1.411±0.104)×10-6],差异有统计学意义(t=13.212,P<0.01).经5-AZA-CdR联合TGF-β1处理的FOCUS细胞株的HNF4αP1 mRNA相对表达量[(1.181±0.132)×10-6]低于单用5-AZA-CdR处理组[(4.972±0.035)×10-6],差异有统计学意义(t=13.873,P<0.01).结论 肝癌组织中HNF4αP1表达水平下调.DNA甲基化可调控HNF4αP1在人肝癌细胞株中的表达.HNF4αP1启动子区甲基化可抑制TGF-β1对HNF4αP1表达的调节作用. 相似文献
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目的:对文本交互办公场景下的蔑视及其影响进行探索,为企业管理与个人职业生涯决策提供依据。方法:通过Tower软件平台,设计基于文本交互办公场景的多轮商业产品决策任务,对蔑视/失败反馈的影响进行研究。结果:实验一中蔑视组与失败组的攻击(t=3.806,P0.001)与绩效(t=5.989,P0.001)都存在显著差异。实验二中蔑视与攻击(F=55.588,P0.001,η~2=0.042)和绩效(F=12.776,P=0.001,η~2=0.061)的关系再次证实了实验一的结果,同时反刍在蔑视对攻击(F=14.094,P0.001,η~2=0.011)与绩效(F=25.286,P0.001,η~2=0.121)的影响中交互效应显著;绩效(t=6.421,P0.001)与攻击(t=2.763,P=0.007)的简单斜率分析差异显著。结论:在文本工作场景中蔑视将同时导致接受者绩效和攻击的提高;但相对于低反刍特质的个体而言,高反刍特质的个体接受到蔑视会使他们产生更强的攻击,且并不会提高其绩效。 相似文献
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目的:以商标法为视角探析保护我国中医药知识产权的方法。方法:分析中医药商标保护的意义、存在的问题,提出中医药商标保护对策。结果与结论:商标是商品质量信誉的保证,企业的无形资产,市场竞争的利器。但我国中医药企业在商标保护方面存在缺乏品牌意识,将中药药品名与商品名混淆,商标设计质量低,道地中药材保护欠缺等问题。今后应从加强商标竞争力,重视商标宣传,建立完善的联合商标及防御商标体系,申请国际注册塑造品牌文化,引用地理标志对道地药材进行保护等方面加强中医药商标保护。 相似文献
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新生儿蛛网膜下腔出血97例临床分析抚顺市矿务局总医院儿科(113008)李永昕,胡静娴,郎会利,郎秀荣随着头颅CT检查的普遍应用,蛛网膜下腔出血的诊断率有了很大的提高。我院于1992年2月至1994年11月收治新生儿蛛网膜下腔出血97例,其中28例进... 相似文献
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原发性肝细胞癌(肝癌)是最常见的恶性肿瘤之一,其发生是一个多阶段的过程,包括遗传学和表观遗传学改变引起的原癌基因激活和抑癌基因失活。既往研究普遍认为,遗传学改变是肝癌发生的核心环节,近年来随着对肝癌认识的深入,发现表观遗传学改变对其发生发展亦起着重要作用,其中DNA甲基化的研究较为广泛和深入。此文就DNA甲基化与肝癌发生发展的关系,以及甲基化在肝癌临床诊治和预后评估中的意义进行综述。 相似文献
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目的探讨siRNA抑制饥饿素-O-乙酰基转移酶(GOAT)对肝脂肪变性影响及作用机制。方法游离脂肪酸(FFA)作用于人肝细胞系LO2细胞以诱导肝细胞脂肪变性。FFA与siRNA-GOAT单独或联合处理LO2细胞,分为4组,即空白对照(NC)组:仅用PBS处理;siRNA-GOAT组:仅以终浓度为10 nmol/L的siRNA-GOAT处理;FFA组:仅以终浓度为1 mmol/L的FFA处理;FFA+siRNA-GOAT组:采用上述浓度FFA和siRNA-GOAT混合处理。肝细胞油红O染色检测脂肪滴形成情况;TG检测试剂盒检测LO2细胞脂质水平;免疫印迹法(Western Blot)、实时定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)、免疫荧光染色、电子显微镜检测自噬活性;酶联免疫吸附测定法、RT-PCR检测TNFα、IL-6水平。Western Blot检测雷帕霉素(m TOR)、磷酸化m TOR(pm TOR)、AMP-活化蛋白激酶(AMPK)以及磷酸化AMPK(p-AMPK)的蛋白水平变化。计量资料多组间比较采用单因素方差分析,进一步两两比较采用LSD-t检验。结果 FFA+siRNA-GOAT组脂肪滴形成较FFA组明显减轻,TG水平明显低于FFA组,差异有统计学意义(P0.001)。FFA+siRNA-GOAT组TNFα和IL-6蛋白、mRNA表达水平较FFA组均明显下降,差异均有统计学意义(P值均0.005)。siRNA-GOTA组LC3-Ⅱ、Beclin-1 mRNA表达水平明显高于NC组,差异均有统计学意义(P值均0.001)。FFA+siRNA-GOAT组LC3-Ⅱ、Beclin-1 mRNA表达水平明显高于FFA组,差异均有统计学意义(P值均0.001)。siRNA-GOAT组LC3-Ⅱ、Beclin-1蛋白水平明显高于NC组,差异均有统计学意义(P值均0.05)。FFA+siRNA-GOAT组LC3-Ⅱ、Beclin-1蛋白水平明显高于FFA组,差异均有统计学意义(P值均0.05)。免疫荧光染色示FFA+siRNA-GOAT组LO2细胞中内源性LC3-Ⅱ表达水平较FFA组、siRNA-GOAT组升高。电子显微镜观察结果示FFA+siRNA-GOAT组自噬体表达较FFA组增加。自噬抑制剂siRNA-ATG5、3-MA或刺激剂雷帕霉素处理LO2细胞后,FFA+siRNA-ATG5组、FFA+3-MA组TG水平分别与FFA+siRNA-GOAT组、FFA+雷帕霉素组比较,差异均有统计学意义(P值均0.001)。FFA+siRNA-GOAT组、FFA+雷帕霉素组LC3-Ⅰ/Ⅱ水平明显高于FFA+siRNA-ATG5组、FFA+3-MA组,差异均有统计学意义(P值均0.05)。FFA+siRNA-GOAT组p-AMPK蛋白表达水平明显高于于FFA组、p-m TOR蛋白表达水平明显低于FFA组,差异均有统计学意义(P值均0.05)。结论 siRNA抑制GOAT可通过调节AMPK/m TOR通路,上调自噬活性,进而减轻肝细胞内脂肪变性。 相似文献
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颈部椎管内占位性病变致痛性痉挛1例报告中国医科大学第二临床学院儿科(1003)周晓薇衣曼抚顺矿务局总医院郎会利胡静娴患儿男,14岁。左侧肢体痉挛伴疼痛及尿失禁36天于1996年3月入院。患儿于入院前36天无明显诱因出现左侧肢体痉挛。发作前左足第2、3... 相似文献
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目的对比无机三氧化物聚合体(MTA)和CH糊剂在根尖诱导成形术中的临床疗效。方法将120颗牙根未完全发育完成的年轻恒牙随机平分为两组,用无机三氧化物聚合体(MTA)和CH糊剂,分别进行根尖诱导成形术,术后3个月复诊一次,随访2年,对比观察临床疗效。结果MTA组平均就诊次数3.1次,平均治疗周期14.1d,根尖诱导成功率96.7%;CH组平均就诊次数7.2次,平均治疗周期363.2d,根尖诱导成功率71.7%,两组根尖诱导成功率比较有统计学差异(P〈0.01)。结论MTA进行根尖诱导成形术,周期短,疗效确切,成功率高,有望替代传统氢氧化钙诱导制剂。 相似文献
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