健康人骨髓CD34~+造血干/祖细胞衰老与年龄的相关性研究

目的探讨增龄过程中健康人CD34~+造血干/祖细胞(CD34~+HSC/HPCs)衰老的变化过程。方法由重庆医科大学附属第一医院血液科骨穿室提供正常人骨髓9例,将其分为青年组3例(女性31岁、男性26岁、男性28岁)、中年组3例(男性59岁、男性57岁、女性52岁)和老年组3例(男性70岁、男性70岁、女性62岁)。提取骨髓单个核细胞(BMNCs)后,免疫磁性细胞分选法分离纯化CD34~+细胞群,流式细胞术检测细胞纯度,台盼蓝染色检测细胞活性,衰老相关β-半乳糖苷酶(SA-β-gal)染色观察各年龄组阳性细胞百分比;造血干/祖细胞混合集落培养比较各年龄组CD34~+造血干/祖细胞形成混合集落能力。结果分选前每106个BMNCs中CD34~+细胞群比例为(1. 31±0. 54)%;免疫磁性分选后每106个细胞中CD34~+细胞群比例为(92. 5±0. 39)%。各年龄组人骨髓CD34~+造血干/祖细胞存活率可达99. 1%以上。人骨髓CD34~+造血干/祖细胞的SA-β-gal染色阳性率出现明显的随增龄变化趋势,老年组明显高于中年组及青年组。CD34~+造血干/祖细胞形成的干细胞混合集落能力随年龄增加降低。结论随年龄增加人骨髓CD34~+造血干/祖细胞出现明显衰老,表现为造血增殖能力下降,可能是造成一些老年人血液学疾病的原因。     

过氧化损伤及抗氧化能力时间动态变化与造血干/祖细胞衰老的相关性

目的 探讨增龄过程中小鼠Sca-1+造血干/祖细胞(Sca-1+ HSC/HPC)过氧化损伤及抗氧化能力的动态变化与其衰老的关系.方法 C57BL/6J雄性小鼠分为幼年组(3～4周龄),青年组(2月龄),中年组(6月龄),中老年组(12月龄),老年组(18月龄).提取各组小鼠骨髓单个核细胞,免疫磁性吸附细胞分选法(MACS)分离纯化Sca-1+细胞群,WST法检测细胞超氧化物歧化酶(SOD)含量,TNB显色法检测细胞总谷胱甘肽(GSSG+ GSH)含量,WST-1法检测超氧化物含量,硫代巴比妥酸法检测丙二醛(MDA)含量,衰老相关β-半乳糖苷酶(SA-β-gal)染色观察各年龄组阳性细胞百分比,造血祖细胞混合集落培养比较各年龄组Sca-i+细胞形成集落能力.结果 总SOD活力值、GSSG+ GSH含量、超氧化物含量吸光度、MDA含量、SA-β-Gal阳性细胞百分比及混合集落形成率分别在幼年组为(27.51±1.11)U/g、(28.78±0.77)μmol/L、(0.114±0.005)、(2.06±0.54)nmol/mg、(2.26±0.65)％、(8.79±0.56);青年组为(38.23±3.50) U/g、(31.48±2.03) μmol/L、(0.109±0.005)、(0.81±0.35) nmol/mg、(9.08±2.74)％、(9.48±0.74);中年组为(28.85±0.65) U/g、(47.62±4.93) μmol/L、(0.133±0.002)、(2.69±0.62) nmol/mg、(11.58±0.89)％、(5.14±0.89);中老年组(12.67±0.89) U/g、(25.63±1.23) μmol/L、(0.151±0.009)、(11.44±1.19) nmol/mg、(35.34±2.50)％、(1.56±0.23);老年组为(17.52±1.27)U/g、(39.10±2.19) μmol/L、(0.141±0.005)、(7.06±0.95) nmol/mg、(15.76±1.23]％、(0.98±0.50).结论 随年龄增加Sca-1+ HSC/HPC的SA-β-Gal阳性细胞百分比逐渐增高,混合集落形成能力下降,SOD活性、GSSG+ GSH含量逐步降低,而超氧化物、MDA含量逐渐增加,提示在增龄过程Sca-1+ HSC/HPC过氧化损伤,抗氧化能力逐渐降低是造血干细胞衰老的可能机制之一.     

当归多糖联合阿糖胞苷诱导人白血病KG1α细胞株衰老的实验研究

作者实验室最新研究发现,当归多糖（Angelica sinensis polysaccharides,ASP）对延缓造血干细胞衰老有明确的调控作用。白血病是一种造血干细胞水平的恶性血液肿瘤,ASP对白血病细胞有无调控衰老的作用却未见相关报道。该研究以对数生长期人急性髓系白血病（acute myeloid leukemia,AML）细胞株KG1α为研究对象,将其分为当归多糖组（ASP组）,阿糖胞苷组（Ara-C组）,当归多糖与阿糖胞苷联合组（ASP+Ara-C组）和对照组,分别加入不同浓度的ASP,Ara-C和ASP+Ara-C,作用不同时间,旨在研究当归多糖联合阿糖胞苷诱导人白血病细胞株KG1α衰老的作用及其相关机制。结果显示,ASP,Ara-C,ASP+Ara-C在体外能明显抑制KG1α细胞增殖,使细胞阻滞于G₀/G₁期;细胞呈现衰老形态学特点;衰老染色阳性细胞率显著增高;并能显著上调衰老相关蛋白P16与RB的表达,ASP+Ara-C组的上述指标更加显著。综上所述,ASP与Ara-C诱导KG1α细胞衰老的机制可能与调控衰老相关蛋白的表达有关,提示ASP与抗肿瘤药物联合用药在白血病治疗中可起到更好作用。     

狼疮清颗粒对脾淋巴细胞分泌白细胞介素6与干扰素γ及凋亡基因 p53、C－myc的影响

目的：观察狼疮清颗粒对脾淋巴细胞分泌白细胞介素－6（IL－6）、干扰素－γ（ IFN－γ）和凋亡基因p53、C－myc的作用。方法灌胃给予大鼠狼疮清颗粒22．8 g? kg－1,给药3 d,制备狼疮清颗粒含药血清,同时分离ICR小鼠脾细胞备用。狼疮清颗粒含药血清体积分数90％,50％,20％高、中、低剂量组3组,阳性组：脾细胞悬液加入地塞米松,对照组：脾细胞悬液加空白血清,培养24 h,用放射免疫法检测脾淋巴细胞上清液IL－6,IFN－γ含量;免疫组化法检测脾细胞凋亡基因p53和C－myc的表达。结果狼疮清颗粒含药血清高剂量、中剂量组和地塞米松组与对照组比较,能显著降低脾淋巴细胞分泌的 IL －6、IFN－γ。狼疮清颗粒含药血清各剂量组和地塞米松组显著降低凋亡基因p53的表达,狼疮清颗粒含药血清高剂量组对C－myc基因的表达有明显的抑制作用（P＜0．05）。结论狼疮清颗粒抑制IL－6、IFN－γ细胞因子的分泌和p53和C－myc凋亡基因的表达。     

辐射损伤导致造血干/祖细胞衰老的机理研究

目的 探讨辐射损伤导致骨髓造血干/祖细胞(HSC/HPC)衰老的可能机制.方法 雄性C57BL/6J小鼠随机分为辐照组和假辐照组,辐照组小鼠经6.5 Gy的X射线全身一次性辐照,假辐照组小鼠处理同辐照组,但不辐照.辐照后24 h免疫磁珠分选法分离并计数两组小鼠的Sca-1+造血干/祖细胞细胞(Sca-1+ HSC/HPC),流式细胞术检测细胞周期,β-半乳糖苷酶(SA-β-Gal)染色检测衰老细胞百分率;混合造血祖细胞集落(CFU-Mix)培养观察分选细胞增殖分化能力,单细胞凝胶电泳(SCGE)检测辐照导致细胞的DNA损伤,RT-PCR检测细胞衰老相关基因p16INK4a、p19Arf、p53、p21 Cipl/wafl mRNA的表达;Western blot法检测p16INK4a、p21Cipl/Wafl蛋白表达.结果 免疫磁性分析法分离纯度的Sca-1+ HSC/HPC可达94％,辐照后小鼠每支股骨的Sca-1+ HSC/HPC数量急剧下降,细胞出现G1期阻滞;形成CFU-Mix集落数量和形成集落的细胞数明显降低;SA-β-Gal染色阳性率显著增高,彗星实验显示细胞拖尾明显延长;p16INK4a、p19Arf、p53、p21cipl/wafl mRNA表达明显增强,p16INK4a、p21Cipl/Wafl蛋白的表达水平上调.结论 辐射导致HSC/HPC DNA的损伤和衰老相关生物学改变,p16INK4a-Rb和p19Arf-p53-p21 Cipl/Wafl信号通路可能起一定作用.     

人参皂苷Rg1延缓脑衰老机制研究

神经系统退行性疾病是老年患者的常见病和多发病。前期研究发现人参皂苷Rg1有明显延缓脑衰老作用,但作用机制并不完全清楚。为研究人参皂苷Rg1抗脑衰老的可能机制,40只雄性SD大鼠随机分为正常组、Rg1正常组、脑衰老模型组、Rg1脑衰老模型组,每组10只(脑衰老模型组:大鼠皮下连续42 d注射D-半乳糖(120 mg·kg-1),qd。Rg1脑衰老模型组:在脑衰老模型复制同时,16 d起开始腹腔注射人参皂苷Rg1(20 mg·kg-1)27 d,qd。Rg1正常组:大鼠皮下注射等量生理盐水,16 d起开始腹腔注射人参皂苷Rg1(20 mg·kg-1)27 d,qd。正常组:注射等时与等量生理盐水。模型复制结束或药物注射完成第2天进行相关实验。通过水迷宫实验、β-半乳糖苷酶(SA-β-Gal)染色实验、ELISA实验、酶标比色法实验、Southern blotting和PCR-ELISA实验检测各组大鼠的空间记忆能力、脑衰老情况、海马区IL-1和IL-6炎症因子变化、海马区抗氧化指标SOD和GSH变化以及海马区端粒长度和端粒酶活性变化。结果脑衰老模型组大鼠空间记忆能力减退,脑组织切片显示SA-β-Gal染色阳性颗粒增多,海马区SOD活性降低,GSH含量减少,IL-1,IL-6含量增多,端粒长度缩短,端粒酶活性降低。Rg1脑衰老模型组大鼠空间记忆能力有明显改善,SA-β-Gal染色蓝色颗粒减少,海马区SOD活性增高,GSH含量增多,IL-1,IL-6含量减少,端粒长度缩短受到阻止,端粒酶活性增高。Rg1正常组大鼠与正常组大鼠相比空间记忆能力增强,SA-β-Gal染色蓝色颗粒减少,海马区IL-1,IL-6含量减少。结果表明人参皂苷Rg1可能通过调节端粒系统、炎症因子水平和抗氧化作用发挥延缓脑衰老作用。     

经皮冠状动脉介入治疗对老年缺血性心肌病心功能和预后的影响

目的评价经皮冠状动脉介入治疗（PCI）对老年缺血性心肌病心功能不全的近期疗效及远期预后的影响。方法患者分为两组。一组行PCI加适当药物治疗;另一组单纯药物保守治疗。对比观察近期临床效果及长期随访以了解远期预后的不同。结果PCI组近期症状体征改善、左室射血分数提高,1年、2年因心功能不全及严重心肌缺血再次入院治疗人次及4年、8年随访心源性死亡率各方面与单纯药物治疗组有较显著差异。结论PCI在老年缺血性心肌病所致心功能不全的治疗方面具有积极意义,尤其对改善远期预后有一定价值。     

《2016-2020年全国食品药品监管人员教育培训大纲》制订的探讨

摘 要食品药品监管系统岗位职责专业性强。目前,由于人员来自不同部门,其监管理念、专业背景、知识结构和工作经历各不相同,与岗位的要求存在较大差距,迫切需要通过分级分类培训加强队伍素质建设,提高专业化程度。本文提供了针对全系统监管人员教育培训的课程体系、教学说明以及分级分类培训实施思路,希望能够起到助力食品药品监管人员培训的作用。     

宁波市食品药品监管系统干部素质提升的新途径

食品药品监管系统机构改革之后,普遍存在监管人员的知识结构与专业要求不相匹配的问题,妨碍了监管职责的履行和行政效能的发挥,各地都在积极探索队伍建设的有效方法。本文通过对浙江省宁波市食品药品监管人员成人函授学历教育专项工作情况的介绍,为各地培训工作提供良好先例,为监管队伍素质提升提出有益建议。     

实现食品安全社会共治的多种途径——云南省社会共治调研报告

摘 要“十三五”规划建议明确指出：要实施食品安全战略,形成严密高效,社会共治的食品安全治理体系。本文介绍了云南省食品安全社会共治工作的做法与成效,并进行思考,提出建议。以期为各地食品安全社会共治工作提供有益的借鉴和参考。