注射用鼠神经生长因子研制

神经生长因子(NGF)是一类能促进神经生长的多肽类生物活性特质。国内外许多研究证实NGF具有维持交感神经和感觉神经的生存、影响中枢神经元生长、促进神经细胞的分化、判定轴突生长等方面的生物学功能。我们把鼠神经生长因子作为一种非常有希望的临床药物进行开发,作为国家一类新药进行申报,其完成研究资料40余项,分为生产工艺和检定方法、稳定性试验、临床前药理、临床研究等四个方面。     

载脂蛋白A-I模拟肽D-4F对巨噬细胞源性泡沫细胞清道夫受体A1的抑制作用

 目的:研究载脂蛋白A-I模拟肽D-4F对氧化低密度脂蛋白（oxidized low-density lipoprotein,ox-LDL）所诱导的巨噬细胞源性泡沫细胞清道夫受体A1（scavenger receptor A1,SR-A1）的抑制作用及其机制。方法:体外培养RAW264.7巨噬细胞,给予不同浓度的D-4F（12.5、25和50 mg/L）、紊乱模拟肽sD-4F（50 mmol/L）处理1 h或者5 mmol/L内质网应激（endoplasmic reticulum stress,ERS）抑制剂 4-苯丁酸处理30 min后,再加入ox-LDL （100 mg/L）继续培养12 h。另外培养巨噬细胞给予50 mg/L D-4F 或sD-4F 处理1 h,再加入2 mg/L ERS诱导剂衣霉素（tunicamycin,TM）处理4 h。MTT法检测细胞活力;试剂盒检测细胞内总胆固醇含量;分别采用免疫印迹法和实时荧光定量聚合酶链反应（real-time PCR）技术检测SR-A1和ERS标志分子葡萄糖调节蛋白78 （glucose-regulated protein 78,GRP78）蛋白和mRNA表达变化;采用多功能酶标仪检测DiI-ox-LDL摄取情况。结果:D-4F明显减轻ox-LDL所诱导的巨噬细胞损伤和细胞内的胆固醇蓄积。ox-LDL可显著上调SR-A1和GRP78表达,而D-4F对上述变化具有明显抑制作用,且呈浓度依赖性。D-4F显著抑制TM所诱导的SR-A1和GRP78蛋白水平以及巨噬细胞对ox-LDL的摄取。结论: D-4F可通过抑制SR-A1 表达减轻ox-LDL所诱导的巨噬细胞内胆固醇蓄积和细胞损伤,其机制可能与抑制GRP78介导的ERS信号途径有关。     

鼠疫噬菌体国家参考品的研制

目的采用鼠疫噬菌体国家参考品研制鼠疫鉴别及鼠疫活疫苗纯菌检查。方法制备鼠疫噬菌体参考品,建立噬菌体效价质量标准,对参考品进行协作验证,并对参考品进行稳定性分析。结果研制的鼠疫噬菌体国家参考品,其效价质量标准应不低于10^-7,该参考品在-20℃条件下具有较好的稳定性,在37℃条件下稳定性较差。结论研制的鼠疫噬菌体国家参考品已被国家有关部门正式批准,可用于鼠疫鉴别诊断及鼠疫活疫苗纯菌检验。     

鼠疫、布氏菌、炭疽活疫苗浓度测定通用参考品的研制

目的将现用鼠疫、布氏菌、炭疽活疫苗3套浓度测定参考品整合成一套通用参考品。方法确定通用参考品吸光度值,从3套鼠疫、布氏菌及炭疽疫苗浓度测定用参考品共9个浓度中选取代表性3个浓度参考品;利用现用3种活疫苗浓度测定用参考品的线性方程,计算通用参考品所代表各种疫苗的浓度;制备参考品并进行质量控制;观察参考品的长期稳定性;组织3个实验室进行协作验证。结果确定通用参考品吸光度值为0.350、0.494、0.665;确定通用参考品所代表各种疫苗浓度;完成通用参考品的制备,各项检定符合规定;对4℃冷藏保存参考品进行稳定性研究,变异系数小于2.0%;经3个实验室协作验证,各实验室使用2种参考品的测定结果误差均小于2.0%。结论在现有参考品的基础上整合成一套鼠疫、布氏菌、炭疽活疫苗分光光度法浓度测定通用参考品,并为以后建立分光光度法细菌浓度测定通用参考品奠定基础。     

滋养素研究的新进展

绵羊和牛的胚泡能够分泌一种被称为滋养素(Trophoblastin,简写TPI)的蛋白质。作为一种胚胎信号,它在妊娠的关键时刻(羊为12～22天,牛为16～24天),在母体对妊娠的识别中具有非常重要的作用。TPI分泌量的不足将导致胚胎早期死亡。本文将介绍近年来对滋养素的研究进展。