毛细管电泳技术快速检测p53基因点突变

目的：探讨利用毛细管电泳技术快速检测p53基因点突变的临床应用价值。方法：采用毛细管电泳作SSCP分析，检测20例结肠癌肿瘤标本p53基因第7外显子PCR扩增产物，并与传统的聚丙烯酰胺凝胶电泳结果进行比较，最后用DNA序列测定判断其准确性。结果：20例结肠癌标本中，毛细管电泳技术检测出5例标本(Ca4，Ca6，Ca7，Ca8，Ca14)有突变，而凝胶电泳结合银染技术仅检出4例标本(Ca4，Ca6，Ca7，Cal4)有突变，测序证实经毛细管电泳所检出的5例标本均存在点突变。结论：对于PCR产物的单链构象多态性分析，毛细管电泳技术是一种更加快速、简便、敏感的方法，可应用于临床筛查基因点突变。     

基质辅助激光解吸离子化飞行时间质谱法测定重组人促红细胞生成素

采用基质辅助激光解吸离子化飞行时间质谱法（ＭＡＬＤＩ／ＴＯＦＭＳ）准确测定了基因工程人促红细胞生成素（ｒｈＥＰＯ）的分子量、纯度、糖基化程度和胰酶消解肽图；提出了以ＭＡＬＤＩ／ＴＯＦ质谱峰半峰宽作为判断不均一程度的指标。初步研究了ＭＡＬＤＩ－ＴＯＦ／ＭＳ基质种类和浓度对测定的影响。     

纳米载体药物应用的研究进展纳米载体药物应用的研究进展

载体药物是随着药物学研究、生物材料科学和临床医学的发展而新兴的给药技术。药物通过载体进入人体 ,载体对药物吸附、包裹和键合 ,使药物释放部位、速度和方式等具有选择性和可控性 ,实现药物的缓释和靶向传输 ,从而更好地发挥药物治疗效率。载体药物技术的关键是载体材料的选择 ,目前已有各种高分子材料和无机材料被用于载体药物的研究 ,但对材料的选择必须满足组织、血液、免疫等生物兼容性的要求[1] 。此外 ,载体药物的制备也很重要 ,因为这将影响到载体药物的给药效率。最近已有很多方法应用于这一领域 ,纳米技术的应用已引起关注。纳…     

LC/MS鉴定中药三七及其复方制剂

目的建立中药三七及其在复方丹参制剂中的特征图谱。方法用LC/MS分析方法,采集三七、人参和西洋参的LC/MS总离子流色谱,从总离子流色谱中提取三七主要化学组分的提取离子流色谱,选择相对稳定、3种药材间差异显著的提取离子流色谱作为三七药材的特征图谱。在相同条件下对比复方丹参的提取离子流色谱与三七的特征图谱;同时用LC/MS/MS对三七中的主要组分进行定性分析。结果与人参皂苷Rg1(m/z 800)和Re(m/z 946)具有相同m/z的提取离子流色谱在3种药材间差异显著,稳定可靠,在复方中有较好的重现性,复方丹参中其他共有成分对其无显著影响。结论三七的LC/MS特征图谱可作为鉴定复方丹参中三七的特征,也可作为鉴别三七和同属其他药材的特征。     

中药二维信息指纹图谱模式识别中药二维信息指纹图谱模式识别

目的用二维信息数据表征中药指纹图谱样本,并对其进行模式识别。方法对一维信息数据和二维信息数据表征的中药指纹图谱进行聚类分析,并对分析结果进行比较。结果与一维信息数据相比,采用二维信息数据表征指纹图谱,各种聚类方法所得总体类别差异小,样本归属比较稳定。对未知样本的类别判定聚类分析和神经网络预测结果一致。结论二维信息数据较一维信息数据更能全面、特异地表征中药指纹图谱。     

清开灵注射液多环节阻抑脑缺血级联反应药效物质与作用机理研究

围绕表征方剂复杂物质、多层次评价生物活性成分、分析方剂与机体环境的相互作用三个相互衔接的关键环节,以清开灵解毒通络、开窍醒神功效与中风病"毒损脑络"病机相关,病症结合,方证对应,化学和药理研究密切结合,开展多环节阻抑脑缺血级联反应的药效物质及配伍原理研究.研究表明,清开灵药效物质包括8类45种主要有机成分和12种无机元素,胆酸、黄芩苷、栀子和珍珠母为主要有效部分.进而优化了有效组分阻抑脑缺血级联反应的配比关系;建立了方剂配伍过程多层次指纹图谱特征信息变化和多波长多指标成分指纹图谱的测定与评价方法;发现清开灵阻抑脑缺血级联反应的作用,以缺血启动的炎症病理过程为核心,涉及脑微灌流恶性循环损害及神经细胞损害的多个环节,胆酸、黄芩苷、栀子有效组分和珍珠母有各自相对集中的作用靶点,配伍的整合调节包括多靶点效应、组分相互作用及作用环节关联的时序效应三个作用方式;指纹图谱的特征信息结合药理结果得到的新型组方的物质成分较原方更加清楚,保留并加强了原有主要特征信息;脑脊液、血浆、血清有效组分体内过程分析,以及多环节指标的组分药理学解释,可为方剂中君臣佐使配伍的中医理论内涵提供佐证.表明从多环节病理过程设计靶点进行有效组分筛选与组成新方方法可行,由此建立的多层次指纹图谱与病理多环节药效分析相结合的方法,可成为现代复方中药创制和二次开发的理论模式和技术支持,并为中风病及严重炎症损伤类疾病的新药创制提供理论基础.     

HPLC法测定盐酸麻黄碱和盐酸伪麻黄碱中杂质

目的建立盐酸麻黄碱(E)和盐酸伪麻黄碱(PE)中杂质的高效液相色谱HPLC测定方法。方法用RPC18色谱柱,以20mmol/LKH2PO4水溶液-甲醇(96∶4)为流动相,检测波长为210nm,分析时间为20min。结果6种麻黄生物碱均达到基线分离;混合对照品连续进样6次,色谱峰面积RSD均小于1.0%;对照品质量浓度在选定范围内呈现良好的线性关系(R2>0.999);各成分最低检出限分别为:去甲基麻黄碱(NE)为0.05μg/mL,去甲基伪麻黄碱(NPE)为0.04μg/mL,E和PE为0.1μg/mL,甲基麻黄碱(ME)和甲基伪麻黄碱(MPE)为0.2μg/mL;各成分的加样回收率均大于97.1%;6个待测样品均被检测出不同程度的杂质。结论本方法分离度好、精密度高、专属性强、灵敏度高,可用于麻黄生物碱类药物中杂质成分的定性和定量测定。     

应用均匀设计法对灯盏花素纳米脂质体的处方优化

目的:对灯盏花素纳米脂质体的制备处方进行优化.方法:采用薄膜挤压法制备灯盏花素纳米脂质体,按均匀设计法,以包封率和载药量为考察指标,对实验结果进行最优子集法的二次回归优选处方配比.结果:用胆固醇和卵磷脂来包封的灯盏花素脂质体包封率为69.60%,载药量为29.06%,平均粒径为105.6 nm.结论:用均匀设计优化后的制备处方制得的灯盏花素脂质体,有较高的包封率和载药量.     

RP-HPLC法测定beagle犬血浆中芦丁的含量

目的:建立复方芦丁片中芦丁在beagle犬血浆中含量测定的RP-HPLC法。方法:色谱柱为Merck C18(4.6 mm×250mm,5μm),流动相为乙腈-0.2%冰醋酸溶液(20∶80);流速1.0 mL.min-1;检测波长为360 nm;柱温25℃;进样量20μL。结果:芦丁峰形对称,血浆中内源性杂质不干扰芦丁的测定,保留时间在10分钟左右。血浆中平均回收率为98.92%~112.33%,芦丁最低检出量为0.18 ng。结论:RP-HPLC可用于犬血浆中芦丁的含量测定。     

中药材定量分析中测量不确定度的评定方法及其影响因素的研究

目的：探讨中药材定量分析中测量不确定度的评定方法及其影响因素，为中药材分析方法的研究及中药质量标准的制定提供理论依据。方法：利用中药材多指标成分定量测定的方法验证数据和样品代表性实验数据，通过不确定度来源分析，运用现代误差理论，探讨了中药材多指标成分高效液相色谱定量方法的测量不确定度的评定方法。结果：将该方法应用于人参、三七和丹参3种中药材指标成分定量分析的测量不确定度的评定，并分析了影响测量不确定度的因素。中药材的样品均匀性是影响中药材多指标成分分析的测量不确定度的主要因素。结论：以方法验证数据和样品代表性实验数据来评定中药定量分析中的测量不确定度，方法简便，其评定结果对于中药材分析方法的建立及中药质量标准的制定具有重要意义。