纳布啡用于儿童气管异物取出术的麻醉效果

目的 探讨纳布啡应用于儿童气管异物取出手术中的效果,为临床合理麻醉提供参考依据。方法 回顾性分析2019年1月—2020年1月于浙江大学医学院附属儿童医院行气管异物取出术的110例患者的临床资料,本次入选对象年龄均在3岁以内,且美国麻醉医师协会(ASA)分级在Ⅰ～Ⅱ级间,其中55例采用丙泊酚静脉麻醉者为对照组;另55例采用纳布啡+丙泊酚静脉麻醉者为观察组。记录两组麻醉效果(麻醉起效时间、术后清醒时间、术后1 d疼痛状况),记录两组患儿不同时刻时生命体征及医生对麻醉的满意度;统计两组麻醉期间不良反应。结果 观察组麻醉起效时间平均为(8.76±1.24) min,与对照组(9.01±1.19) min比较,差异无统计学意义(P>0.05);两组患儿术后清醒时间、麻醉总有效率相比,差异无统计学意义(P>0.05);观察组术后1 d视觉模拟评分法(VAS)评分平均为(3.11±0.41)分,明显低于对照组的(5.74±0.78)分(P<0.05)。观察组患儿医生对麻醉的满意度评分明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。与入室内时相比,两组患儿各时点平均动脉压(...     

大鼠骨髓基质细胞表面抗原CD71、CD44和CD45的检测

目的研究表面抗原CD71、CD44和CD45在体外培养的大鼠骨髓基质细胞的表达,了解骨髓基质细胞的生物学特性。方法采用全骨髓法分离培养大鼠骨髓基质细胞,待原代培养的细胞达70%以上汇合时,用含胰酶和EDTA的消化液消化细胞,进行传代培养。传至第3代(P3)的骨髓基质细胞采用流式细胞术检测表面抗原CD71、CD44和CD45的表达,专用配套软件计算细胞表面抗原阳性%率。结果骨髓基质细胞呈纺锤形、成纤维细胞样生长,漩涡状分布。传至第3代的细胞形态趋于一致。流式细胞仪检测结果显示,CD71、CD44和CD45阳性细胞百分比分别为99.07±7.6%、52.81±7.3%和10.85±5.0%。结论P3的骨髓基质细胞具有较强的增殖特性。     

大鼠脊髓T11段全横断损伤模型的建立及护理

目的 制备大鼠脊髓T11全横断动物模型，模拟脊髓损伤，为后期的干细胞移植治疗研究提供实验依据。方法 16只健康Wistar大鼠随机分为两组：对照组（n=8）及脊髓损伤组（SCI组，n=8）。SCI组咬除T9-T10棘突及相应椎板，横切断暴露的脊髓T11，夹除约0.3-0.5cm脊髓，对照组仅行椎板切除术。术后1，3，7，14，21d分别进行BBB运动功能评分。对模型进行人工排尿、排便、悬吊鼠尾等护理措施。结果 SCI组所有动物在术后均表现出典型的脊髓截瘫症状，BBB运动功能评分很低，与对照组相比具有非常显著性差异（P〈0.01）。护理措施降低了截瘫大鼠并发症的发生。结论 建立了大鼠脊髓T11段全横断损伤模型，并摸索出了一套有效的截瘫模型的护理方法。     

人脐血间充质干/祖细胞诱导为神经样细胞的实验研究

目的探讨人脐血间充质干细胞用于神经细胞再生的可行性与人脐血间充质干/祖细胞最佳的诱导培养条件。寻找一种合适的细胞来源进行移植以代替受损的神经元、星形胶质细胞和少突胶质细胞来修复神经损伤。方法将脐血单个核细胞置于低血清(2%)达氏修正依氏培养基中培养,生成贴壁细胞层,依传代方法,用相同培养条件进行扩增,扩增后的贴壁细胞置入细胞培养液(加入新生大鼠神经细胞分离培养上清液)中,并添加表皮生长因子(EGF)和碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)进行诱导分化。采用流式细胞术、免疫组织化学法分别检测被诱导的神经样细胞的表面标志及细胞特异性标志、结构,并进行分析。结果脐血间充质干/祖细胞克隆在脐血单个核细胞中出现频率为0.5×10-6,在传20代时,可有效扩增1.5×106倍,诱导后,70%的脐血间充质干/祖细胞分化为神经样细胞。结论采用上述扩增与诱导条件,脐血间充质干/祖细胞可得到有效扩增,并可高效向神经样细胞分化,从而证实脐血是一种细胞替代治疗前景光明的细胞来源。     

脊髓源神经干细胞向胆碱能神经元诱导分化的研究

目的 研究胚胎大鼠脊髓源性神经干细胞的培养和在体外骨髓基质细胞诱导其分化的情况。方法 从孕龄13d的胚胎大鼠脊髓组织中分离获得神经干细胞，采用含表皮生长因子（EGF）及碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）的无血清限定性培养基培养，同时进行诱导分化，观测脊髓神经干细胞向胆碱能神经元分化的情况，用细胞免疫荧光化学方法鉴定分化结果。结果 可从胚胎脊髓中分离得到大量的神经于细胞，通过限定性培养基培养可获得于细胞球，经从骨髓基质细胞培养液中获得的限制性培养液在体外可被诱导分化，用细胞免疫荧光化学法鉴定，可见有胆碱能神经元生成。结论 胚胎大鼠脊髓神经干细胞在添加EGF与bFGF的限定性培养基中可以增殖并长期保持稳定的性状，在体外可以被诱导分化为胆碱能神经元。     

Wnt3a在大鼠骨髓源性胆碱能神经元中的表达

目的 通过研究大鼠骨髓基质细胞诱导的胆碱能神经元中Wnt3a的表达变化,了解Wnt3a在胆碱能神经元诱导分化过程中的作用,揭示神经元分化过程中可能的信号通路.方法 取Wistar雄性大鼠的股骨骨髓,培养骨髓基质细胞,经三代纯化CD71免疫细胞化学鉴定后进行分组实验.实验共分四组:骨髓基质细胞组,未加任何诱导因子;胆碱能神经元诱导分化组,加入Shh,RA和bFGF诱导基质细胞向胆碱能神经元分化,并用ChAT鉴定胆碱能神经元;神经干细胞诱导组,加入bFGF、EGF和RA诱导基质细胞为神经干细胞;自然分化组,加入血清诱导分化.提取细胞总RNA,利用RT-PCR进行Wnt3a的半定量分析.结果 与对照的骨髓基质细胞组,神经干细胞诱导组及自然分化组相比,Wnt3a在胆碱能神经元组中表达最高并且有统计学差异.结论 Wnt3a在骨髓基质细胞来源的胆碱能神经元中高表达,提示Wnt3a可能是胆碱能神经元分化的Wnt信号通路中的一个环节.     

不同吸烟量对大鼠气道上皮细胞中细胞问黏附分子1表达的影响

目的 通过研究不同吸烟量、不同吸烟持续时间吸烟及戒烟对大鼠气道上皮细胞中细胞间黏附分子1(intercellular adhesion molecule-1,ICAM-1)mRNA及其蛋白水平表达的影响,探讨吸烟和戒烟与慢性阻塞性肺疾病气道炎症的关系.方法 雄性Wistar大鼠40只,随机分为对照组、长期大量吸烟组、长期小量吸烟组、短期大量吸烟组、长期大量吸烟后戒烟组,每组各8只,用原位杂交法及免疫组织化学法检测ICAM-1 mRNA及其蛋白在各组大鼠气道上皮细胞中的表达.结果 与对照组ICAM-1 mRNA及其蛋白(1.45±0.98,8.83±0.77)水平比较,长期大量吸烟组(6.93±1.44,19.22±0.22)、短期大量吸烟组(2.92±0.67,12.91±1.31)、长期小量吸烟组(4.76±0.68,14.03±2.39)、长期大量吸烟后戒烟组(4.84±0.94,14.95±1.82)表达均明显升高,以长期大量吸烟组最为显著,差异均具有统计学意义(P＜0.05).与长期大量吸烟组相比,长期小量吸烟组、短期大量吸烟组、长期大量吸烟后戒烟组ICAM-1 mRNA及其蛋白水平均低于长期大量吸烟组,差异均具有统计学意义(P＜0.05).结论 吸烟引起大鼠气道上皮细胞ICAM-1 mRNA及其蛋白的表达水平升高,并随吸烟时间和量的增加其表达增加,戒烟后其表达可下降.提示戒烟可减轻气道炎症,是预防慢性阻塞性肺疾病的有效措施.     

骨髓基质细胞在传代与诱导分化为神经细胞过程中hes1和mash1基因的表达变化

目的:探讨骨髓基质细胞(BMSCs)在传代培养与诱导分化为神经细胞过程中hes1和mash1基因的表达变化及作用。方法:采用全骨髓培养法体外分离培养获得BMSCs,倒置显微镜下观察其形态变化,应用半定量RT-PCR技术分析hes1和mash1基因在传代和诱导分化为神经细胞过程中的动态时序表达。结果:诱导后细胞形态出现神经元样改变。hes1在第3代BMSCs诱导后(P)第1日表达下降,之后第3日表达增加。mash1在BMSCs传至第5代时高表达,随后急剧下降;P3的BMSCs诱导后表达逐日增加。结论:hes1和mash1基因在BMSCs传代与诱导分化为神经细胞过程中可能起重要作用。     

人脐血单个核细胞的体外培养观察

目的对脐血间充质干细胞进行体外培养，以进一步阐明其生物学特性，为今后的基础研究和临床应用打好基础。方法采用DMEM培养基培养脐血单个核细胞，流式细胞仪检测细胞表面标志。结果脐血单个核细胞在体外培养24d时，细胞表面CD11b、CD34、CD44和CD45表达阴性，GFAP和nestin表达也为阴性。结论培养所得的单个核细胞区别于脐血中的造血干细胞。     

大鼠脊髓全横断损伤后Wnt信号基因的表达

目的探讨大鼠脊髓全横断损伤后,Wnt信号基因在不同时相脊髓表达的变化及意义。方法成年健康Wistar大鼠30只,随机分为假手术组(sham组)和脊髓损伤组(SCI组),SCI组分为术后1d、3d、7d、14d、21d组,每组5只。SCI组大鼠T11脊髓段做全横断损伤,sham组仅行椎板切除术,术后大鼠进行BBB运动功能评分。采用半定量RT-PCR方法检测脊髓损伤组织中Wnt信号基因的表达。结果SCI组所有动物在术后均表现为双后肢瘫痪,BBB运动功能评分明显低于sham组。SCI组在脊髓横断术后1d、3d、7d Wnt3a表达均较sham组明显增加;尾侧端Wnt3a较同时相头侧端的表达多,且在21d又出现明显的升高。在sham组和SCI组均未检测到神经基因蛋白1(Ngn1)的表达。发状分裂相关增强子1(Hes1)的表达在SCI后第1d较sham组有明显的下降,第3d出现升高,之后逐渐下降。结论Wnt信号可能参与了脊髓损伤后修复再生的过程。