血浆HIV-1 RNA与干血斑HIV-1 DNA基因型耐药检测比较

目的 通过对不同病毒载量的同一研究对象同时进行血浆HIV-1 RNA与干血斑HIV-1 DNA的基因型耐药检测并对结果进行比较,探讨HIV-1 DNA用于耐药检测的可行性和用途。方法 2021年12月采集云南省、广西壮族自治区及新疆维吾尔自治区接受ART后1年以上的HIV/AIDS患者静脉血5 mL,EDTA抗凝,分离血浆和制备成干血斑样本,分别提取病毒DNA和RNA进行pol区扩增,比较两种方法的扩增效率;并对同时扩增成功的序列利用MEGA7构建系统进化树并分析序列一致性。利用斯坦福大学HIV耐药数据库进行耐药位点分析,比较耐药性结果。结果 209例样本中,来自云南82份（39.2%）,来自广西壮族自治区69份（33.0%）,来自新疆维吾尔自治区58份（27.8%）。105例VL<20拷贝/mL,25例20拷贝/mL≤VL<200拷贝/mL,42例200拷贝/mL≤VL<1 000拷贝/mL,37例VL≥1 000拷贝/mL。不同病毒载量的样本分类中,使用血浆中HIV-RNA pol区扩增成功率分别为12.4%、28.0%、69.0%、89.2%;使用干血斑中HIV...     

基于8E5细胞的HIV-1病毒载量能力验证质控品制备及评估

目的制备及评价基于8E5细胞的人类免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus 1,HIV-1)病毒载量能力验证质控品的均一性、稳定性和反复冻融性。方法将8E5细胞上清原液10倍梯度稀释得到浓度依次为10⁶、10⁵、10⁴、10³拷贝/ml的4组HIV-1病毒载量能力验证质控品,应用病毒载量分析仪进行检测,将病毒拷贝数其换算成lg值,计算均值(xˉ)、标准差(s)、变异系数(coefficient of variation,CV)、变化趋势,并对质控品的均一性、稳定性和反复冻融性进行评价。结果在4个浓度梯度的均一性评价中,各浓度组质控品的CV分别为1.2%、2.6%、1.8%和3.2%。稳定性评价实验中,在-20℃条件下,各组质控品在5个月评价期间内,检测结果不随时间延长而改变(P>0.05)。在4℃条件下,各组质控品在5周评价期间内,检测结果随时间延长而未改变(P>0.05)。在25℃条件下,各组质控品在15 d评价期间内,检测结果随时间延长而减少(P<...