蛋白激酶C在软脂酸诱导HepG2细胞胰岛素抵抗中的作用

目的从蛋白激酶C(PKC)信号通路角度,探讨游离脂肪酸(FFA)引起肝脏胰岛素抵抗(IR)的可能机制。方法培养HepG2细胞,同时设立对照组、软脂酸(PA)组、高胰岛素组。软脂酸组、高胰岛素组分别用250μmol/L PA、5×10-7mol/L胰岛素处理24h。然后对照组、软脂酸组再根据胰岛素刺激前加( )与不加(-)PKC抑制剂白屈菜红碱盐酸盐(chelerythrine chloride,CC)5μmol/L预处理1h,随机分为两亚组:对照组(-)、对照组( )、PA组(-)、PA组( )。葡萄糖氧化酶法测定胰岛素刺激后12h葡萄糖消耗量,蒽酮法测定胰岛素刺激后3h点细胞内糖原含量,Western blotting技术检测15min点细胞内P-Ser473PKB、P-Ser21/9GSK-3α/β水平。结果PA组(-)与高胰岛素组葡萄糖消耗量无统计学差异(P=0.523)。葡萄糖消耗量、细胞内糖原含量、P-Ser473PKB、P-Ser21GSK-3α、P-Ser9GSK-3β水平均显示,PA组(-)与对照组(-)比较显著降低(P值依次为0.000,0.000,0.004,0.004,0.028),对照组( )与对照组(-)比较略有升高但无显著性差异;PA组( )与PA组(-)比较显著升高(P值依次为0.000,0.014,0.043,0.041,0.035)。结论PA(250μmol/L)体外成功诱导了HepG2细胞产生IR,PKC信号通路在FFA引起肝脏IR中起着重要作用。     

晚期NSCLC吉非替尼治疗失败后的再次治疗(病例报告及文献复习)

目的:对吉非替尼治疗失败后的晚期NSCLC患者再次使用吉非替尼治疗,分析其疗效及安全性。方法:复习1例吉非替尼治疗失败后的晚期NSCLC患者再次使用吉非替尼治疗及临床资料,结合相关文献探讨其临床特征、治疗及预后。结果:该患者首次使用吉非替尼约8月后耐药,停药5月后再次使用吉非替尼,1月后复查肺部CT提示肺部病灶明显缩小,2个月后再次失效,最终总生存期达21月,使用吉非替尼期间不良反应轻微。结论:曾使用吉非替尼有效的晚期NSCLC患者,再次使用吉非替尼仍有可能延长其生存时间且不良反应轻微。     

透视引导下103例纤支镜肺活检临床分析

目的 总结透视下纤支镜肺活检病例,为肺部疾病的临床诊断提供前瞻性的依据.方法 回顾性分析12年来共103例行透视下纤支镜肺活检病例的临床诊断和病理诊断资料.结果 肺活检总体取材准确率为93.2％.取材准确的96例中,最终病理确诊75例,占78.1％,其中肺部感染25例,间质性肺疾病24例,肺部肿瘤21例.在96例中,影像学表现为肺部周围局部性病变有20例,病理确诊16例(80.0％).其中以肺部肿瘤(8例)最为多见,其次为肺部感染(7例).影像学表现为肺部弥漫性病变有76例,病理确诊59例(77 6％),以间质性肺疾病(24例)最为多见,其次为肺部肿瘤(18例). 75例病理诊断的病例中,病理诊断与出院诊断相符共67例,病理诊断准确率为89.3％.103例中术后出现咳血12例,气胸1例.结论 对于肺部局部性病变,应注重肺部肿瘤的诊断;对于肺部弥漫性病变,则更注重间质性肺疾病的诊断.透视下纤支镜肺活检对于常规纤支镜不能明确病因的肺部疾病,是适应证广泛,准确率高,阳性率也较高的检查手段,可作为首选检查方式.     

肺腺癌瘤周微淋巴管密度的检测及其预后意义

目的　检测肺腺癌瘤周微淋巴管密度（ＬＭＶＤ）,探讨其与患者预后之间的关系。方法　应用免疫组化ＳＰ法检测６５例肺腺癌Ｄ２-４０蛋白表达并计数Ｄ２-４０表达阳性瘤内、瘤周的ＬＭＶＤ,分析其与患者临床病理特征的关系;观察患者总生存时间。结果　肺腺癌Ｄ２-４０表达阳性瘤周的ＬＭＶＤ为１１.５６±１０.７３,明显高于瘤内的３.９６±１.１５（Ｐ＜０.００１）。Ｄ２-４０表达阳性瘤周的ＬＭＶＤ与淋巴结转移密切相关（Ｐ＝０.００３）。瘤周高ＬＭＶＤ组（＞１０）中位生存时间为１３个月（９５％ＣＩ：１１.４～１４.６个月）,瘤周低ＬＭＶＤ组（≤１０）中位生存时间为３１个月（９５％ＣＩ：１７.８～４４.２个月）,两组间差异有统计学意义（Ｐ＝０.００５）。多因素分析显示,瘤周ＬＭＶＤ、有无淋巴结转移和ｐＴＮＭ分期是独立的预后因素。结论　Ｄ２-４０表达阳性的瘤周ＬＭＶＤ可以用于预测肺腺癌的预后。     

花生四烯酸显著预防软脂酸诱导HepG2细胞胰岛素抵抗

目的 探讨花生四烯酸(AA)对软脂酸(PA)引起HepG2细胞胰岛素抵抗的预防作用及其可能机制.方法 培养HepG2细胞,设立对照组(control组)、软脂酸组(PA组)、软脂酸+花生四烯酸组(PA+AA组)、高胰岛素组(HI组).PA组、PA+AA组、HI组分别用250μM PA、250μM PA加20μM AA,5×10-7 M胰岛素孵育24 h.然后葡萄糖氧化酶法测定各组胰岛素刺激后12 h点葡萄糖消耗量,蒽酮法测定胰岛素刺激后3 h点细胞内糖原含量,Western-blotting技术检测15 min点胞内P-Ser473 PKB、P-Ser21/9 GSK-3α/β水平.结果 葡萄糖消耗量PA组与HI组比较差异无统计学意义(P=0.594).葡萄糖消耗量、细胞内糖原含量、P-Ser473 PKB、P-Ser21GSK-3α、P-Ser9 GSK-3β水平均显示,PA组与control组比较显著降低(P＜0.05),PA+AA组与PA组比较显著升高(P＜0.05).结论 AA(20μM)能显著预防PA引起的HepG2细胞胰岛素抵抗,能在PKB、GSK-3水平上显著维持250μM软脂酸孵育HepG2细胞的胰岛素信号传递.     

氟比洛芬酯联合吗啡治疗难治性转移性骨痛

晚期肿瘤出现骨转移时常常伴有难以控制的重度疼痛.氟比洛芬酯脂微球注射液是非甾体类静脉注射靶向镇痛药物,通过抑制前列腺素(prostaglandin,PG)合成、减少炎性递质产生和降低疼痛阈值而发挥镇痛效果,具有作用持久、疗效明确等优点,广泛用于术后镇痛,也可用于治疗癌性疼痛.但国内外尚未见用于治疗难治性转移性骨痛的报道.     

小鼠肺癌移植瘤肿瘤相关巨噬细胞的表型鉴定

目的　鉴定小鼠Ｌｅｗｉｓ肺癌（ＬＬＣ）移植瘤肿瘤相关巨噬细胞（ＴＡＭ）的表型。方法　将ＬＬＣ细胞接种于Ｃ５７ＢＬ／６小鼠颈部背侧皮下,４周后处死小鼠,取移植瘤。ＥＬＩＳＡ法检测局部微环境中Ｔｈ１／Ｔｈ２细胞因子水平,双标免疫荧光染色观察ＴＡＭ共表达ＣＤ６８和巨噬细胞甘露糖受体（ＭＭＲ）或一氧化氮合酶（ｉＮＯＳ）的情况,酵母菌吞噬试验评估ＴＡＭ的吞噬功能。结果　小鼠ＬＬＣ移植瘤局部细胞因子向Ｔｈ２方向漂移。与正常小鼠肺组织ＩＦＮ-γ（５.４９±１.０４）ｎｇ／ｍｌ和ＩＬ-１２（６１６１.４８±４９８.４９）ｎｇ／ｍｌ相比,移植瘤组织均降低,分别为（２.１９±０.３４）ｎｇ／ｍｌ和（１６３５.９２±７５４.８６）ｎｇ／ｍｌ（Ｐ＜０.０５）;移植瘤ＩＬ-４、ＩＬ-１０浓度分别为（２９.３１±１４.４７）ｎｇ／ｍｌ、（２１.５４±１０.７２）ｎｇ／ｍｌ,均高于正常肺组织的（１６.４３±６.３１）ｎｇ／ｍｌ和（１０.７１±２.０２）ｎｇ／ｍｌ（Ｐ＜０.０５）;ＣＤ６８／ＭＭＲ（＋）ＴＡＭ占全部ＴＡＭ的６９.７％ ～８３.２％,ＣＤ６８／ｉＮＯＳ（＋）占１６.８％ ～３０.３％;移植瘤对酵母菌的吞噬率和吞噬指数分别为（５.４２±１.７４）％和０.０８±０.０２,均低于于正常脾脏组织的（２３.６３±５.８１）％和０.３９±０.１４,差异有统计学意义（Ｐ＜０.０１）。结论　小鼠ＬＬＣ移植瘤ＴＡＭ可能呈替代性活化的表型特征。