大肠侧向发育型肿瘤细胞株双向电泳技术成功建立

目的:建立侧向发育型肿瘤细胞(LST)株双向电泳技术.方法:提取LST细胞株总蛋白质,采用不同pH范围IPG胶条进行LST细胞株总蛋白质双向电泳,并对实验步骤进行一系列的调整优化.结果:获得了较为清晰的LST细胞株双向电泳图谱,采用pH 3～10线性IPG胶条分离出1356±43个蛋白质斑点;pH 4～7 IPG胶条两种上样量(250μg和150μg)分别分离出了1285±51和989个蛋白质斑点.结论:通过相关条件的调整优化,成功建立了双向电泳技术,为研究LST特殊性生物学行为相关蛋白质奠定了坚实的基础.     

细胞因子对树突状细胞体外培养的影响

１导言免疫反应的产生首先需要有抗原递呈细胞（AntigenPresentingCellsAPC）捕获抗原，经加工处理后使抗原肽与MHC分子结合而递呈至细胞表面，T细胞得到抗原信息后，在强大的共刺激分子共同作用下而引起特异性的免疫反应。因此，APC是人体免疫反应产生的首要环节。树突状细胞（Den－driticCellsDC）是一类形状不规则的非单核吞噬系统细胞，特点是胞浆有许多长突起呈触须状，使整个细胞形态象个蜘蛛。DC分散于全身的上皮组织和实质性器官，其细胞数量不超过局部细胞总数的１％；也可迁移到血液和淋巴，其数量不超过血液有核细胞总数…     

细胞膜表面Galectin-1抗体阻断对黏附LST-R1细胞凋亡的影响

目的观察细胞膜galectin-1抗体阻断对黏附LST-R1细胞凋亡的影响。方法激光共聚焦显微镜检测galectin-1在LST-R1细胞的表达。galectin-1抗体预孵LST-R1细胞后种植于Ⅰ型胶原（20μL/孔）包被的48孔板中,流式细胞仪检测黏附LST-R1细胞凋亡变化。结果galectin-1表达于LST-R1细胞膜表面,galectin-1抗体预孵LST-R1细胞后结合率为（67.2±6.73）%。galectin-1抗体阻断组黏附细胞呈不规则角形,而对照组黏附细胞呈圆形或类圆形;黏附LST-R1细胞凋亡率分别为（3.46±0.89）%和（8.61±1.23）%。结论LST细胞黏附至细胞外基质后,膜表面galectin-1可促进黏附细胞凋亡增加,表明膜表面galectin-1可能参与了LST病变侧向扩散非侵袭性生长特性的形成。     

外周血CD14+单核细胞HLA-DR对老年创伤脓毒症的预后预测分析

目的 评价外周血CD14+单核细胞HLA-DR(HLA-DR+/CD14+)对老年创伤脓毒症预后的预测价值.方法 采用回顾性病例分析的方法,收集广州军区广州总医院重症医学科2011年1月-2015年12月收治的年龄≥60岁的老年创伤患者的临床资料.HLA-DR+/CD14+、降钙素原(PCT)和C反应蛋白(CRP)为入科第一天指标.采用Spearman相关分析对HLA-DR+/CD14+与ICU停留时间、总住院时间、APACHEⅡ的相关性进行分析.采用ROC曲线分析HLA-DR+/CD14+、PCT、CRP、APACHEⅡ评分对老年创伤脓毒症患者预后的预测价值.结果 死亡患者APACHEⅡ评分(27.38±8.68)显著高于存活患者(17.49±6.25,P=0.000),HLA-DR+/CD14+(37.70％±13.96％)明显低于存活患者(59.80％±18.02％,P=0.000).创伤脓毒症患者APACHEⅡ评分(26.16±8.44)明显高于非脓毒症患者(17.90±7.04,P=0.000);HLA-DR+/CD14+(38.61％±14.48％)则明显低于非脓毒症患者(59.79％±18.17％,P=0.000);PCT(34.45±68.29)明显高于非脓毒症患者(4.25±8.26,P=0.003);CRP(129.88±103.25)亦明显高于非脓毒症患者(76.04±73.48,P=0.011).Spearman相关分析显示,HLA-DR+/CD 14+与ICU停留时间呈负相关(r=-0.304,P=0.008),与总住院时间无相关性(r=0.188,P=0.106),与APACHEⅡ评分呈负相关(r=-0.559,P=0.000).HLA-DR+/CD 14+对老年创伤脓毒症发生预测的AUC为0.807(SE=0.051,95％CI0.706～0.907,P=0.000),最适诊断界点为40.0％,敏感性和特异性分别为88.0％和60.0％.PCT对老年创伤脓毒症发生预测的AUC=0.714(SE=0.063,95％CI 0.591～0.837,P=0.003),最适诊断界点为1.01ng/ml,敏感性和特异性分别为84.0％和65.0％.HLA-DR+/CD 14+预后预测的AUC =0.813 (SE=0.049,95％CI0.716～0.910,P=0.000),最适诊断界点为36.0％,敏感性和特异性分别为94.1％和50.0％.APACHEⅡ评分对老年创伤脓毒症患者预后预测的AUC=0.825(SE=0.052,95％CI 0.724～0.926,P=0.000),最适诊断界点为20,敏感性和特异性分别为80.1％和65.0％.结论 老年创伤患者外周血HLA-DR+/CD 14+低提示其潜在的免疫功能低下,可作为老年创伤脓毒症发生和预后不良的理想预测指标.     

血清可溶性髓样细胞触发受体-1对重症脓毒症患者预后判断价值

目的 研究血清可溶性髓样细胞触发受体-1(sTREM-1)浓度检测对重症脓毒症患者预后的判断价值.方法 回顾性分析重症脓毒症患者共83例,根据28 d死亡结局分为存活组(n=63)和死亡组(n=20),比较2组患者在基本情况、入院24 h APACHEⅡ评分最高值、全血C反应蛋白(C-reactiveprotein,CRP)和乳酸(lactate,Lac)浓度、血清降钙素(procalcitonin,PCT)和sTREM-1浓度等方面的差异,并绘制ROC曲线分析相关指标对疾病的预后判断及诊断价值,多因素Logistic回归分析探讨与疾病死亡相关的危险因素.结果 2组患者基本情况差异无统计学意义(P＞0.05).死亡组患者在APACHEⅡ评分最高值和血清sTREM-1浓度上要高于存活组(P＜0.05),而在血清PCT、全血CRP和Lac浓度上2组间比较,则差异无统计学意义(P＞0.05).ROC曲线分析结果表明,血清sTREM-1浓度对重症脓毒症患者死亡预测的曲线下面积为0.77.多因素Logistic回归分析结果显示,APACHEⅡ评分和血清sTREM-1浓度是重症脓毒症患者死亡的独立高危因素.结论 血清sTREM-1浓度有望成为预测重症脓毒症患者预后的可靠指标,也可能是重症脓毒症患者死亡的独立危险因素.     

库普弗细胞功能异常在重症中暑中的作用

生理状态下肝脏对于肠源性内毒素提供第二水平保护,库普弗细胞(kupfer cell,KC)是这种保护作用的重要细胞基础.肠源性内毒素血症为重症中暑的重要发病机制之一.重症中暑病理生理过程中,胃肠和肝脏常为重症中暑首发打击脏器,使机体肠源性内毒素清除双重屏障破坏,形成肠肝轴保护功能障碍,综合导致肠源性内毒素血症的产生.在重症中暑热应激损伤过程,可能存在KC功能活性异常导致肝脏自身损伤和全身炎症损伤的加剧,进而推动重症中暑病程的进展.     

Galectin-1表达对LoVo细胞表型的影响

目的观察galectin-1表达对LoVo细胞表型的影响。方法构建galectin-1真核表达载体,转染LoVo细胞,细胞免疫化学检测蛋白质水平的改变,dot-blotting检测细胞培养上清分泌性galectin-1,观察LoVo细胞表型变化。结果成功构建了galectin-1真核表达载体,并建立了稳定的真核表达载体转染LoVo细胞系。galectin-1表达可降低LoVo细胞与Ⅰ型胶原的粘附,促进细胞同质粘附,且降低细胞体内成瘤(P0.001)。结论Galectin-1表达可降低LoVo细胞恶性相关表型。     

血必净注射液抑制肺血管内皮糖萼降解改善重症中暑大鼠急性肺损伤

目的 探讨血必净注射液调控血管内皮糖萼异常，改善重症中暑大鼠急性肺损伤的机制。方法 将48只Wistar大鼠随机分为对照组、中暑组、血必净组，每组16只，其中8只用于伊文思蓝(EB)法测定。采用高温高湿[温度(40±2)℃，湿度65%±5%]打击60 min制备中暑大鼠模型，血必净组大鼠于造模前连续3 d尾静脉注射血必净注射液(2 ml/kg,2次/d)。各组大鼠于造模后2 h行麻醉处理并取材，记录肺湿/干重比，测定肺泡灌洗液(BALF)蛋白浓度，EB法测定肺血管通透性，HE染色观察肺组织病理学变化，免疫荧光染色观察肺血管表面透明质酸(HA)的表达变化，Western blotting检测肺组织多配体蛋白聚糖-1(Syndecan-1)、磷脂酰肌醇聚糖-1(Glypican-1)、血管内皮钙黏蛋白(VE-Cadherin)、紧密连接蛋白(Occludin)、血管细胞黏附分子-1(VCAM-1)及E-选择素(E-selectin)等蛋白的表达，酶联免疫吸附(ELISA)法测定血清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)及肺组织中乙酰肝素酶(HPA)的表达水平。结果 血...     

热打击诱导血管内皮细胞组织因子早期表达分泌的初步研究

目的 探讨热打击诱导血管内皮细胞组织因子(TF)早期表达分泌的规律。方法 将30只SPF级C57BL/6雄性小鼠随机分为对照组与热打击后复温0、3、6、9 h组(n=6)。热打击组小鼠暴露于动物孵箱热环境，核心温度达42.5℃时即为发生重症中暑。采用HE染色观察小鼠肝脏、肺脏及肾脏组织病理学变化；RT-qPCR检测小鼠组织TF mRNA表达水平；ELISA法检测小鼠血浆TF浓度。体外建立人脐静脉内皮细胞(HUVECs)热打击模型，分为对照组与热打击后复温0、3、6、9 h组。采用RT-qPCR、Western blotting及细胞免疫荧光化学技术分别检测HUVECs中TF mRNA及蛋白表达水平；采用ELISA法检测HUVECs培养上清中TF水平。结果 对照组小鼠各组织未见明显病理损伤，热打击复温小鼠存在不同程度组织细胞结构性损伤及出血性、炎症性损伤。与对照组小鼠比较，热打击复温0、3 h组肾脏(1.719±0.018、1.241±0.178 vs. 1.000±0.063)、复温3 h组肺脏(2.444±0.511 vs. 1.000±0.106)及复温6 h组肝脏(7.312±0...