直接扩增和鉴别粪标本中致病性与非致病性溶组织内阿米巴的DNA

取定量的HK-9株溶组织内阿米巴滋养体放入受检者的0.1g粪便中,再加DTT、KOH等在65℃孵育15min,后用HCl中和,并以酶/氯仿/异戊醇振荡抽提DNA。同时再取受检者粪便0.1g以NaCl洗涤,离心,蛋白酶K消化,抽提其DNA。用以rRNA为模板设计的致病性与非致病性引物进行双向PCR,PCR产物以含0.2μg/ml溴乙锭的1.3％的琼脂糖凝胶电泳显示,并用限制性内切酶DraⅠ和Sau 96Ⅰ进行消化。     

单克隆抗体对溶组织内阿米巴吞噬红细胞的影响

用具有抗细胞膜活性和抗细胞核、胞浆活性的单克隆抗体３Ｆ７和４Ｇ６与致病性溶组织内阿米巴ＨＭ－１∶ＩＭＳＳ株滋养体３７℃孵育，在孵育即刻、５ｍｉｎ、１０ｍｉｎ加入红细胞，检测滋养体吞噬红细胞的能力，并以正常小鼠血清和抗克氏锥虫抗体ＴＣＥ０４作为对照。结果，经单克隆抗体３Ｆ７孵育即刻的ＨＭ－１∶ＩＭＳＳ虫株滋养体吞噬红细胞能力明显减弱（Ｐ＜０．００１），而４Ｇ６抑制滋养体吞噬红细胞的作用不如前者明显。提示，抗细胞膜单克隆抗体对抑制滋养体吞噬红细胞有显著作用，但随着时间的推移，抑制作用明显减弱。     

三种蚊唾腺蛋白IgE亲和成分的初步分析

从我国分布较广的三种蚊中华按蚊、淡色库蚊和白纹伊蚊中分离出唾液腺 ,制成唾腺蛋白粗提物 ,再应用ELISA、竞争抑制ELISA和免疫印迹试验分析其与IgE结合的组分。结果显示三种蚊唾腺蛋白含能与IgE结合的成分 ,以白纹伊蚊反应所呈现的A值最高 ;免疫印迹在三种蚊均显示 4条阳性带 ,中华按蚊和淡色库蚊相似 ,白纹伊蚊有 3条带差异 ,但其相对分子质量为 30 0 0 0～ 310 0 0组分阳性条带均出现于三种蚊唾腺蛋白     

溃疡性结肠炎合并肠阿米巴病一例

本研究报道1例溃疡性结肠炎合并肠阿米巴病的病例。患者因腹痛伴黏液血便入院诊治,粪便涂片检查发现可疑阿米巴滋养体,血清学和核酸诊断结果提示溶组织内阿米巴感染,结肠镜和病理检查发现患者合并溃疡性结肠炎。经抗阿米巴和抗炎治疗,患者病情好转。本病例提示临床上遇到黏液血便诊断炎症性肠病的患者,如果抗炎辅以常规抗感染治疗效果不佳,...     

天然人源IgG Fab噬菌体抗体库的构建及多样性分析

目的:构建天然人源IgGFab噬菌体抗体库并分析来源于健康人外周血B淋巴细胞的抗体基因可变区的多样性及优势选择。方法:以DNA重组技术从300名健康志愿者的外周血淋巴细胞中扩增出全套人抗体轻链及重链Fd基因,分别插入噬菌体载体pFabICN相应位置,构建天然人源免疫球蛋白G基因文库;进一步从抗体库中随机挑选克隆,获得重轻链基因进行核苷酸序列测定并利用IgBLAST数据库分析抗体基因可变区的同源家族。结果:从4×108库容的天然人源IgGFab噬菌体抗体库中随机挑选克隆,对其中32个轻链及重链Fd基因插入正确的克隆进行核苷酸序列测定和氨基酸序列的推算,获得29条彼此完全不同的Fd重链基因及轻链基因。以IgBLAST数据库比对分析显示29条重链基因的V区分别属于VH3(72.4%),VH1(10.3%),VH4(6.9%),VH5(6.9%)和VH7(3.4%)基因家族。29条轻链基因分别属于Vκ1(44.8%),Vκ2(15.4%),Vκ3(11.5%),Vκ4(23.1%)基因家族和Vλ1(11.5%)基因家族。结论:以300份健康人外周血淋巴细胞的抗体基因构建的天然人源IgGFab噬菌体抗体库基因多样性良好,重链VH3基因家族存在优势表达。     

几种肠道原虫主要表面蛋白的研究进展

在溶组织内阿米巴、隐孢子虫和蓝氏贾第鞭毛虫的致病过程中,一些表面蛋白发挥着重要的作用,介导了原虫与宿主细胞的粘附以及侵入宿主细胞的过程,本文综述了其主要表面蛋白的研究进展以及在诊断和治疗中的应用。     

新的塑料袋微生物培养法(PEM)作为白色念珠菌和滴虫性阴道炎的辅助诊断的评价

白色念珠菌和阴道毛滴虫是阴道炎最常见的病原体,尤其是后者,可引起男性尿道炎,并可致严重的并发症。这两种病原体均可借助于分泌物生理盐水涂片或染色法等检出,培养法则可提高检出率。有必要寻找一种简便易行、敏感特异的方法,作者因此提出了塑料袋微生物培养法(PEM)。实验在妇科门诊病人中进行,选择16至40岁主诉有阴     

浙江地区散发新型布尼亚病毒感染患者的临床特点及其基因序列

目的 分析发热伴血小板减少综合征布尼亚病毒(SFTSV)感染患者的临床特征、流行病学以及SFTSV基因序列.方法 收集2011年5月至7月在温州医学院附属舟山医院感染性疾病科收治的5例重症发热伴血小板减少综合征(SFTS)患者,均经PCR检测SFTSV核酸确诊.采用流式细胞仪(FCM)检测CD3+ CD4+、CD3+ CD8+T淋巴细胞,分离的病毒株测序并与GenBank比对.结果 SFTS患者典型临床表现为持续高热、全身肌肉酸痛、浅表淋巴结肿大、腹痛、腹泻,可伴消化道出血,在急性期WBC、PLT、CD3+CD4+T淋巴细胞呈进行性下降,最低分别为(0.97～2.00)×109/L,(12～42)×109/L和7.52％～20.39％.2例患者血清中分离出病毒,其基因序列与GenBank中的SFTSV进行比对,依赖RNA的RNA聚合酶基因与BX-2010、L-WWG、LN3、JS4、SD4、HN6和AH12的同源性为96％,糖蛋白基因的同源性为94％,而N蛋白基因与JS4、SD4和LN4的同源性为95％;分离的2株病毒的上述三种基因序列的同源性为99％.结论 SFTSV在浙江省有散发流行,以本土疫源性可能大,起病急,病情重,伴多脏器功能损害.     

上海市徐汇区公共卫生从业人员弓形虫感染的血清学调查分析

随机抽取2010年12月~2011年3月上海市徐汇区公共卫生从业人员448名,采集静脉血,ELISA法检测血清弓形虫特异性IgG抗体,抽检的448名公共卫生从业人员中,弓形虫IgG阳性率为10.3%(46/448)。不同来源地(上海、安徽、江苏、河南和四川等)和性别人员之间感染率差异均无统计学意义(P>0.05)。≥30年龄组阳性率(14.9%,29/195)明显高于<30年龄组阳性率(6.7%,17/253)(P<0.05),30~39岁年龄组最高,为15.8%(16/101)。食品生产加工行业从业人员阳性率(12.6%,36/286)显著高于非食品生产加工行业从业人员阳性率(6.2%,10/162)(P<0.05)。     

酶靶试验:用溶组织素的免疫酶显色检测肠道的溶组织内阿米巴感染

探索一种高度敏感和特异的检测肠道溶组织内阿米巴感染的方法——酶靶(ENZYMEBA)试验。该法是以溶组织素的免疫酶显色为基础的。首先制备抗溶组织素抗体,即以纯化的溶组织素(主要是半胱氨酸蛋白酶)对新西兰白兔进行免疫,50μg酶加入0.5ml PBS,加福氏完全佐剂使其乳化,作