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目的探讨平滑肌细胞caveolae在大鼠肾动脉对不同血管活性药物收缩反应中的作用及其机制。方法采用单独甲基-β环糊精(methyl-beta-cyclodextrin,MCD)或MCD和胆固醇(cholesterol,CHO)孵育肾动脉以减少和增加平滑肌细胞caveolae含量,并与未处理组[二甲基亚砜(DMSO)组比较]。采用电镜观察caveolae数量,采用血管环张力描记技术检测肾动脉对氯化钾(potassiurn chloride,KCl)、苯肾上腺素(phenylephrine,PE)和血管紧张素Ⅱ(angiotensin,AngⅡ)的收缩反应,采用蛋白免疫印迹(Western blot)检测法、荧光实时定量聚合酶链反应(quantitative real-time PCR,qRT-PCR)检测caveolin-1及血管紧张素受体1型(Angiotensin type 1 receptor,AT1R)的基因和蛋白表达,采用免疫沉淀和Western blot检测caveolin-1与AT1R的结合。结果 MCD单独孵育可显著降低平滑肌细胞caveolae数量,而MCD与CHO共孵育则可使其恢复,MCD或CHO孵育均未影响caveolin-/基因和蛋白表达。MCD与CHO预处理后,肾动脉对KCl和PE的收缩反应无明显改变。但与未处理组相比,MCD单独孵育可使动脉对AngⅡ的收缩反应强度显著降低(P0.05),收缩敏感性显著减弱(P0.05),而MCD与CHO共孵育则可使动脉对AngⅡ的收缩反应强度及敏感性恢复正常水平。CHO与MCD对AT1R的蛋白表达水平无明显影响。在正常动脉,AngⅡ作用后caveolin-1与AT1R的结合显著增加(P0.05),而在MCD孵育动脉,这种反应被明显抑制,CHO则可使其恢复正常水平。结论平滑肌细胞caveolae是大鼠肾动脉收缩功能调控的重要机制,其主要通过影响caveolin-1与AT1R的结合而调控其下游通路。 相似文献
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目的 探讨酸性鞘磷脂酶(acid sphingomyelinase,ASM)/神经酰胺(ceramide,Cer)通路在血管紧张素II(angiotensin II,AngII)致动脉内皮功能障碍中的作用和机制。方法 针对对照组,低、中、高剂量AngⅡ组及ASM抑制剂地昔帕明(desipramine,Dpm)组,采用Western blot检测法、实时定量PCR和免疫荧光化学方法检测ASM、Cer、总内皮型一氧化氮合酶(total endothelial nitric oxide synthase,t-eNOS)和磷酸化eNOS(phosphorylated eNOS,p-eNOS)含量变化;采用血管环张力描记技术检测主动脉血管环的舒张功能;采用二氢乙啶(dihydroethidium,DHE)荧光探针检测血管环超氧阴离子(superoxide anion,O-2·)水平。结果 与对照组相比,AngⅡ孵育后主动脉对乙酰胆碱(acetylcholine,Ach)的舒张反应显著降低(P<0.05),呈剂量依赖性,对硝普钠(sodium nitroprusside,SNP)的舒张反应无明显改变;AngⅡ孵育组动脉ASM表达显著增加(P<0.05),Cer含量显著增多(P<0.05);ASM抑制剂Dpm可显著抑制AngⅡ所致ASM和Cer改变(P<0.05),亦可使动脉对Ach的舒张反应恢复正常;AngⅡ可显著降低 动脉p-eNOS含量(P<0.05),增加O-2·水平(P<0.05),Dpm则可使p-eNOS增加 (P<0.05),降低O-2·(P<0.05)。结论 ASM/Cer可能通过抑制eNOS磷酸化并增加O-2·含量介导AngⅡI所致动脉内皮功能障碍。 相似文献
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目的 探讨冻融胚胎移植周期中,D4胚胎的致密化程度和数量对临床妊娠结局的影响,明确胚胎致密化对抱婴率的影响。方法 选择女方年龄<40岁行冻融胚胎移植的患者。根据移植胚胎致密化程度不同将移植周期分为3组:含有2个部分致密化或致密化以上胚胎组(A组);含1个部分致密化或致密化以上胚胎组(B组);不含部分致密化或致密化胚胎组(C组),对其种植率和临床结局进行分析。研究致密化胚胎的最终妊娠结局。结果 (1)年龄、体质量指数C组均显著低于A组。不孕年限、基础FSH、基础LH,基础E2采用非参数检验3组间差异无统计学意义(P> 0.05)。内膜准备方案,3组间差异无统计学意义(P>0.05)。移植日内膜厚度,C组显著高于A组(P <0.05)。(2)平均移植优质胚胎数A组、B组、C组依次降低,差异有统计学意义(P <0.05)。早期妊娠丢失率3组间差异有统计学意义(P <0.05),B组升高且A组降低。抱婴率3组间差异有统计学意义(P <0.05),A组与C组、B组比较差异有统计学意义(P <0.05)。结论 增加2枚部分致密化以上胚胎可以显著增加抱... 相似文献
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目的 探讨体外受精(in vitro fertilization,IVF)-胚胎移植中,长方案患者不同卵巢反应性获卵数与正常受精数一致性相关因素,探寻长方案最佳的扳机时机以获得最理想的IVF实验室结局.方法 选择女方年龄<40岁行长方案的患者.根据获卵数不同将卵巢反应性分为3组:低反应组(<5个),正常反应组(5~16... 相似文献
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