构建靶向血管内皮生长因子受体2可调控活性的嵌合抗原受体T细胞及其体外功能验证

目的构建靶向血管内皮生长因子受体2(VEGFR2)可调控活性的小分子门控嵌合抗原受体T(smgCAR-T)细胞系统并在体外验证其抗肿瘤和可调节活性。方法采用基因全长合成和磷酸钙转染法构建smgCAR-T及其阳性(CAR+-T)和阴性(CAR--T)对照细胞。同时构建表达VEGFR2的小鼠结直肠癌细胞(MCA38VEGFR2+)。验证并筛选构建成功的细胞后再体外验证CAR-T细胞靶向结合能力。在不同的效靶比下检测白细胞介素-2和肿瘤坏死因子-γ的浓度来评估CAR-T细胞的体外分泌功能,用乳酸脱氢酶浓度评估CAR-T细胞的体外抗肿瘤活性。组间的比较采用t检验或单因素方差分析。结果基因测序和流式细胞术证实CAR-T细胞和靶细胞构建成功。与对照组比较,CAR+-T细胞+MCA38VEGFR2+组具有最强的靶细胞杀伤能力。在smgCAR-T细胞+MCA38VEGFR2+组中,随着C16-(S)-3-甲基吲哚雷帕霉素(Rapalog)滴度升高靶细胞杀伤率逐渐升高;当Rapalog为40 nmol/L时杀伤率达到最大值,为(66.25±13.20)%。分别向smgCAR-T细胞+MCA38VEGFR2+细胞组(A和B组)加入40 nmol/L的Rapalog后,在24 h时可观察到两组杀伤率出现同步升高[(44.25±6.24)%比(49.25±5.56)%,t=1.197,P>0.05],差异无统计学意义。在置换培养基后,再次添加了Rapalog的A组中观察到靶细胞杀伤率升高明显;而未再次添加Rapalog的B组中靶细胞杀伤率升高缓慢;此时,A和B组杀伤率差异有统计学意义[(89.00±3.16)%比(56.50±6.61)%,t=8.873,P<0.01]。结论构建的smgCAR-T细胞在体外展现出一定的抗肿瘤活性,且其活性受小分子化合物Rapalog的可逆调控。     

结直肠癌系膜癌结节相关的病理因素及预后分析

目的探讨结直肠癌病人肠系膜癌结节(tumor deposit,TD)数目对预后的影响。方法回顾性分析2011年3月至2014年11月于武汉大学人民医院胃肠外科行结直肠癌根治术病人的临床病理资料,对病人生存情况进行随访,并对TD有无以及根据TD的截断值(cutoff值)分组的病人进行生存分析。结果TD阳性、T3~4期、N1和N2期、神经侵犯阳性、癌胚抗原(CEA)阳性以及肿瘤病理分化为低分化是结直肠癌病人预后不良的独立危险因素(均P<0.05)。根据TD的cutoff值分组行生存分析,发现TD数目总体上与结直肠癌病人预后呈负相关,且TD数目4~5组病人死亡风险较TD1~3组高[HR=7.596,95%CI(3.147,18.333),P<0.01],TD≥6组病人较TD4~5组病人更高[HR=41.976,95%CI(12.343,142.754),P<0.01]。结论肠系膜TD为结直肠癌病人预后的独立不良因素,且不同TD数目对预后的影响不同,简单将TD阳性(淋巴结转移阴性)划分至N1c期或许不能精确地评估病人预后。     

肿瘤标志物和Ki67在结直肠癌中的表达及预后因素分析

目的 探讨术前血清肿瘤标志物与术后Ki67联合检测对结直肠癌病人预后评估的价值.方法 收集2012年1 月至2014年6月在武汉大学人民医院胃肠外科就诊的结直肠癌病人的临床病理资料和随访资料.癌胚抗原(CEA)＞5 μg/L定义为阳性,癌抗原(CA)19-9＞35 kU/L定义为阳性.Ki67 LI大于其对应截断值定义...     

结直肠癌患者肿瘤静脉血CTCs和CEA mRNA水平对异时性肝转移的预测价值

目的:探讨检测结直肠癌患者肿瘤静脉血CTCs、CEA mRNA对异时性肝转移的预测价值.方法:选取2017年3月至2018年12月无同时性肝转移的结直肠癌患者75例,检测患者肿瘤静脉血CTCs和CEA mRNA水平,随访半年,分析CTCs和CEA mRNA水平与异时性肝转移和TNM分期的关系.结果:CTCs、CEA m...     

内脏肥胖对结直肠癌根治手术操作及患者预后影响的关联性分析

目的分析内脏肥胖对腹腔镜结直肠癌根治手术操作及患者预后影响的关联性。方法选择该院2012-02~2013-10接受腹腔镜结直肠癌根治手术的结直肠癌患者103例,根据SMA角大小将研究对象分为内脏肥胖组(SMA角≥51.75°,n=52)和非内脏肥胖组(SMA角<51.75°,n=51)。分析内脏肥胖与结直肠癌根治术手术时间、术中出血量、中转开腹率、淋巴结转移率、术后住院时间、术后并发症及术后生存时间之间的关联性。结果SMA角可用于诊断内脏肥胖,其ROC曲线下面积为0.771(95%CI:0.680~0.863,P<0.05),截断值为51.75°,灵敏度为75.00%,特异度为74.50%。内脏肥胖组男性、年龄≥60岁的人数比例大于非内脏肥胖组,而淋巴结转移率≥18%的人数比例小于非内脏肥胖组,差异有统计学意义(P<0.05)。内脏肥胖组的手术时间长于非内脏肥胖组,中转开腹率高于非内脏肥胖组,差异有统计学意义(P<0.05)。内脏肥胖组的并发症发生率高于非内脏肥胖组(P<0.05),但两组Clavien-Dindo分级情况差异无统计学意义(P>0.05)。内脏肥胖组的术后住院时间长于非内脏肥胖组,差异有统计学意义(P<0.05)。内脏肥胖组的中位生存期(OS)为40个月,非内脏肥胖组的中位OS为38个月,两组OS差异有统计学意义(P<0.05)。单因素分析结果显示,年龄、淋巴结转移、TNM分期和肿瘤分化程度与结直肠癌患者的OS具有关联性(P<0.05)。Cox回归分析结果显示,TNM分期=Ⅲ,肿瘤高、中分化程度和内脏肥胖是结直肠癌根治术后OS的保护因素,而有淋巴结转移为危险因素。结论SMA角可作为内脏肥胖的诊断指标,且当SMA角为51.75°时诊断效能最大。同时,内脏肥胖会影响结直肠癌手术操作,增加术后并发症发生率,但可改善患者远期预后,延长患者生存时间。