单中心心力衰竭住院患者临床特征及治疗状况调查

本研究的目的是统计心力衰竭(心衰)住院患的年龄、性别构成，心功能状况等因素，分析心衰的病因构成，了解心衰患的治疗现状及与心衰治疗指南的差距。     

高氟对人体胰岛B细胞功能影响的研究

目的 研究长期摄取过量的氟对人体胰岛Ｂ细胞功能的影响。方法 对暴露组和对照组人群进行Ｘ线检查、尿氟测定、口服葡萄糖耐量试验（ＯＧＴＴ）、血清胰岛素及Ｃ肽释放试验,对其饮用水进行水质分析。结果 ①暴露组饮水含氟量、尿氟总体几何均数明显高于对照组;②暴露组空腹血糖及服糖后峰值均明显高于对照组,峰值出现时间明显延迟;③暴露组糖尿病、糖耐量减低（ＩＧＴ）的检出率显著高于对照组,暴露组中氟骨症者显著高于非氟     

内皮细胞类表皮生长因子域7对血管平滑肌细胞凋亡的影响

目的 探讨人脐静脉内皮细胞株（HUVEC）中类表皮生长因子功能域7（EGFL7）对共培养的人主动脉平滑肌细胞（AoSMC）凋亡的影响以及可能的信号转导通路。方法 利用细胞共培养池行HUVEC与AoSMC共培养,将EGFL7的特异siRNA转染HUVEC细胞,利用MTS法检测HUVEC中EGFL7基因的有效沉默对共培养的AoSMC细胞存活率的影响;并合成无关siRNA作为阴性对照组（neg组）,以未转染siRNA的细胞为空白对照组（con组）。同时利用分光光度法检测其对AoSMC细胞乳酸脱氢酶（LDH）、三磷酸腺苷（ATP）以及细胞凋亡蛋白酶（Caspase-3 ）表达的影响;应用RT-PCR检测共培养AoSMC 的bcl-2及bax mRNA表达水平的改变。结果 与neg组及con组相比,干扰HUVEC细胞EGFL7表达12h后,AoSMC存活率无明显变化（P>0.05）,而干扰24、36、48h后,存活率显著降低（P<0.05）;干扰12、24、36、48h后,AoSMC细胞线粒体ATP释放量减少、培养基中LDH含量及Caspase-3表达量均增加（P<0.05）。RT-PCR检测结果显示,与neg组及con组相比,干扰siRNA转染HUVEC细胞24、36、48h,共培养的AoSMC凋亡基因bcl 2表达水平轻度降低（P<0.05）;但Bax表达水平在相应干预时间点均无明显改变（P>0.05）。结论 内皮细胞株EGFL7基因沉默时,可导致平滑肌细胞凋亡;EGFL7通过bcl-2相关信号通路调节SMC凋亡,而与Bax基因表达无关。     

小鼠胰岛微血管内皮细胞外泌体的提取和鉴定方法

目的：建立小鼠胰岛微血管内皮细胞来源的外泌体的提取和鉴定方法,为糖尿病胰岛微血管内皮受损的发病机制研究及重建胰岛微循环完整性的应用提供必要材料。方法选取小鼠胰岛微血管内皮细胞株（MS-1）细胞作为研究对象,取其培养上清液,经多步离心结合蔗糖／D2O垫超速离心方法获取提取物,然后采用透射电镜和Western blotting 法对提取物进行形态和蛋白成分分析,以确定其是否为外泌体。结果提取物呈形态均一的类圆形囊泡,有完整双层膜包绕,内部含有低电子密度物质。囊泡大小约为40～100 nm,可散在分布,也可聚集成团,提取物均阳性表达CD63、CD9和TSG101分子。结论经过形态和蛋白成分分析证实所提取到的物质正是MS-1细胞来源的外泌体,便于后续临床和基础研究工作的开展。     

高氟对人体血液生化及血脂代谢影响的临床观察

对暴露组和对照组各 62例进行了血 K 、Na 、Cl-、Ca2 、Mg2 、P3-、AL P、TC和 TG测定。结果显示 ,暴露组血 K 、P3-、ALP、TC和 TG显著高于对照组 ( P<0 .0 1) ,Mg2 显著低于对照组 ( P<0 .0 1)。暴露组中重度氟骨症与非氟骨症者上述指标也有显著性差异 ( P<0 .0 1)。表明长期摄取过量的氟对人体血液生化及血脂代谢有明显的影响 ,且与氟中毒程度呈正相关。     

类表皮生长因子域7与动脉粥样硬化斑块内血管生成关系

目的 研究类表皮生长因子域7( Egfl7)在动脉粥样硬化斑块内的表达水平和小分子干扰RNA(siRNA)对内皮细胞株血管生长因子表达的影响. 方法 利用免疫组化和免疫荧光染色检测人髂动脉和小鼠无名动脉粥样硬化斑块内Egfl7的表达水平;并利用以Egfl7为靶标的siRNA,通过脂质体将siRNA转入人脐静脉内皮细胞株(HUVEC),以未转染siRNA细胞和转染无关siRNA细胞为对照,在干扰后0h,12 h,24 h,48 h,反转录聚合酶链反应(PT-PCR)检测Egfl7、血管内皮生长因子(VEGF)、血小板衍生生长因子A、B(PDGF-A、PDGF-B) mRNA水平的改变,免疫印迹法检测Egfl7、VEGF、PDGF、血管细胞黏附分子(VCAM)及细胞间黏附分子(ICAM)蛋白表达水平的变化.结果 人髂动脉和小鼠无名动脉粥样硬化斑块内Egfl7表达水平上调;HUVEC内Egfl7在siRNA干扰后0h、12 h、24 h、48 h时mRNA表达分别为(0.31±0.05)、(0.14±0.02)、(0.09±0.01)、(0.02±0.01),蛋白表达为(0.93±0.08)、(0.71±0.11)、(0.39±0.09)、(0.07±0.01).Egfl7、VEGF、PDGF-A、PDGF-B mRNA及其蛋白表达水平随干扰时间延长均下降或抑制,与siRNA干扰0h比较差异有统计学意义(均P＜0.05). 结论 动脉粥样硬化斑块内Egfl7表达水平提高;siRNA抑制HUVEC Egfl7表达水平的同时,其他血管生长因子和黏附分子表达水平亦下降.     

葛根素对血管内皮损伤后细胞外基质CatS、CysC表达的影响及意义

目的探讨葛根素对动脉球囊损伤后细胞外基质重塑过程中组织蛋白酶S（CatS）及其抑制剂胱蛋白C（CysC）表达的影响及其意义。方法建立兔髂腹主动脉球囊损伤后再狭窄模型。观察应用葛根素治疗前后再狭窄形成的范围。检测再狭窄局部CatS及其抑制剂CysC和内皮下胶原的表达水平。结果葛根素组与球囊损伤组比较,再狭窄范围明显减小,CatS表达水平降低,内皮下胶原含量减少,（P〈0.05）CysC表达水平无显著差异（P〉0.05）。结论葛根素可降低球囊损伤部位再狭窄形成过程中CatS表达、减少斑块内胶原的聚集,抑制再狭窄的形成。     

血清组织蛋白酶S、胱抑素C水平与冠状动脉粥样硬化病变严重程度相关性的研究——附107例报告

目的:探讨冠状动脉粥样硬化性心脏病(冠心病)患者血清组织蛋白酶S(cathepsin S,CatS)及胱抑素C水平与冠状动脉病变程度的关系.方法:对155例疑诊心绞痛患者进行冠状动脉造影(coronary angiography,CAG),根据GAG结果分为冠心病组(107例)及对照组(48例),测定所有入选者的空腹血清CatS、胱抑素C水平,采用Gensini积分对冠状动脉病变程度进行评价并分析它们之间的关系.结果:冠心病组血清CatS、胱抑素C水平较对照组高(P＜0.01),前者上升幅度更大,血清CatS水平与Gensini积分呈正相关(r=0.69,P＜0.01),Logistic回归分析剔除年龄、性别、收缩压、血清总胆固醇等因素后,此相关性仍存在(r=0.71,P＜0.01).结论:冠心痛患者的血清CatS、胱抑素C的水平增高,且CatS与冠状动脉粥样硬化病变程度密切相关,说明CatS及胱抑素C可能参与细胞外基质重塑的过程.     

PPARγ在糖尿病心肌纤维化大鼠心肌细胞及微血管内皮中的表达

目的通过观察过氧化物酶体增殖物激活型受体γ（PPARγ）与血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）在糖尿病心肌纤维化模型大鼠心肌细胞及微血管中表达情况,初步探讨PPARγ在糖尿病心肌纤维化中的作用。方法雄性Wistar大鼠27只,随机分为①糖尿病组（n=15）,给予大鼠腹腔内注射链佐菌素(STZ)65mg/kg以制备糖尿病心肌纤维化大鼠模型;②正常对照组（n=12）。均给与标准饲料喂养5个月,糖尿病组大鼠成功建模并最终存活11只。采用放射免疫法测定各组血浆AngⅡ水平;心肌组织HE染色及Masson染色观察心肌细胞、胶原分布形态,测定胶原容量及微血管密度;采用免疫组织化学法测定AngⅡ及PPARγ在心肌细胞及微血管中表达。结果糖尿病组大鼠血浆AngⅡ水平明显高于正常对照组(P＜0.05);糖尿病组心肌内胶原组织明显增多,微血管密度降低,胶原容量明显高于对照组(P均＜0.05);镜下可见,糖尿病组心肌组织微血管内皮细胞及心肌细胞中PPARγ的大量表达,均明显高于正常对照组(P＜0.05);AngⅡ在糖尿病组心肌细胞中的表达明显增高(P＜0.05),而两组内皮细胞中的表达无差异(P>0.05)。结论糖尿病心肌纤维化大鼠心肌细胞和微血管内皮细胞中PPAR表达均明显增强,提示PPARγ可能在糖尿病心肌纤维化中发挥重要作用。