Pim-1激酶对小鼠CD4+ T细胞分化的影响

探讨Pim-1 激酶对小鼠脾脏naive CD4+ T 细胞分化的影响。方法　采用不同的细胞因子诱导naive CD4+ T 细胞分化,PIM-Inh 阻断PIM-1 激酶,通过Western blot 技术检测小鼠脾脏naive CD4+ T 细胞分化过程中Tbet、GATA3、FOXP3、RORγt 蛋白的表达,ELISA 检测诱导分化的CD4+ T 细胞上清液中细胞因子IL-4、TGF-β 、IFN-γ、IL-17 的表达。结果　诱导分化的naive CD4+ T 细胞Tbet、GATA3、FOXP3、RORγt 蛋白的表达及上清液中细胞因子IL-4、TGF-β 、IFN-γ、IL-17 的表达均较空白对照组明显升高（P<0.05）,而PIM-Inh 可以抑制naive CD4+ T 细胞Tbet,RORγt 表达并降低上清液中IFN-γ、IL-17 的水平（P<0.05）。结论　Pim-1 激酶可能在naive CD4+ T 向Th1、Th17 分化过程中发挥了重要作用。     

肝星状细胞激活与信号转导

肝纤维化是多种慢性肝病向肝硬化发展的必经阶段,是所有慢性肝病的共同病理基础.目前认为肝星状细胞的激活是肝纤维化形成的关键,各种致病因素作用下引起肝损伤,释放多种细胞因子,如转化生长因子β、血管紧张素、瘦素,通过各种信号转导使肝星状细胞激活.本文就肝星状细胞激活过程中一些重要的膜受体、核受体信号转导途径及其研究进展作一综述.     

Pim-1在 CD4+T 细胞中的表达及其意义

【目的】探讨 Pim-1在 CD4+ T 细胞中的表达及其意义。【方法】采用 RT-PCR、Western blot 技术检测小鼠脾脏 na?ve CD4+ T 细胞激活过程中 Pim-1 mRNA 及蛋白的动态表达,采用 PI3K 抑制剂、P38MAPK抑制剂、JAK2抑制剂及 MEK1/2抑制剂干扰 CD4+ T 细胞,观察对 Pim-1蛋白表达的影响。【结果】na?ve CD4+ T 细胞激活过程中 Pim-1的表达呈动态改变,Pim-1 mRNA 及蛋白在 na?ve CD4+ T 激活4 h 达到高峰,24 h 后 Pim-1表达回落至基础水平;PI3K 抑制剂、P38MAPK 抑制剂、JAK2抑制剂及 MEK1/2抑制剂均能下调 CD4+ T 细胞中 Pim-1蛋白水平,其中 P38MAPK、JAK2抑制更加明显。【结论】na?ve CD4+ T 细胞活化过程中 Pim-1蛋白呈动态表达;PI3K、P38MAPK、JAK2及 MEK1/2均参与 CD4+ T 细胞活化过程中 Pim-1的表达调节,提示 Pim-1为该相关信号通路的下游效应分子。     

熊果酸对肝星状细胞增殖与凋亡的影响

目的 体外观察熊果酸对肝星状细胞增殖与凋亡的影响,探讨熊果酸诱导肝星状细胞凋亡的可能作用机制. 方法 将不同浓度熊果酸作用于肝星状细胞HSC-T6及肝细胞L02,分别在药物作用24、48、72 h后用四甲基偶氮唑盐法检测熊果酸对HSC-T6及L02细胞增殖的影响;流式细胞仪检测熊果酸对HSC-T6凋亡的影响;光学显微镜观察熊果酸作用后细胞形态学变化情况;免疫细胞化学法检测HSC-T6中Bcl-2、Bax和Caspase-3蛋白的表达情况. 结果 各种浓度的熊果酸均可抑制HSC-T6细胞的增殖,且呈剂量-时间依赖性;当熊果酸浓度为25、50、75μmol/L时可促进L02细胞增殖,浓度＞75μmol/L则表现为抑制L02细胞增殖.在病理形态学方面,熊果酸作用HSC-T6细胞48 h后,光学显微镜下可见细胞缩小变圆、核浓缩等.25、50、75 μmol/L熊果酸作用HSC-T6细胞48 h后,流式细胞仪检测显示细胞凋亡率分别为10.30%±3.85%、21.87%±4.46%、31.33%±6.18%,比对照组(2.93%±1.60%)明显升高(P＜0.01).免疫细胞化学显示Bax及Caspase-3蛋白表达较对照组升高(P＜0.05),且呈剂量依赖性,而Bcl-2蛋白表达水平与对照组无明显差异(P＞0.05).结论 在体外熊果酸可较明显地抑制HSC-T6细胞增殖,诱导其凋亡;对L02细胞的生长具有双向调节作用.熊果酸诱导HSC-T6细胞凋亡可能与降低Bcl-2/Bax比值、激活Caspase-3蛋白有关.     

利拉鲁肽调节2 型糖尿病大鼠肝脏 脂质沉积的机制探讨

目的 探讨利拉鲁肽调节2 型糖尿病（T2DM）大鼠肝脏脂质沉积的机制。方法 采用高脂饮 食联合链脲佐菌素诱导复制T2DM 大鼠模型,随机分组为糖尿病组、利拉鲁肽组、对照组,每组10 只。通 过肝脏形态学检测观察大鼠肝细胞脂质沉积改善情况;血液学检测观察血清脂联素水平的变化;Western blot 检测肝脏AMPK、Thr172p-AMPK、SREBP1 蛋白表达水平的变化。结果 糖尿病组大鼠较对照组大鼠肝细 胞脂质沉积增多（P <0.05）,经利拉鲁肽治疗后肝细胞脂质沉积减小（P <0.05）;与对照组比较,糖尿病组血 清脂联素水平升高（P <0.05）。与对照组比较,糖尿病组大鼠肝脏Thr172p-AMPK/AMPK 降低（P <0.05）, SREBP-1c 表达水平升高（P <0.05）。利拉鲁肽治疗后,Thr172p-AMPK/AMPK 升高（P <0.05）,SREBP-1c 表达水平降低（P <0.05）。结论 利拉鲁肽可通过抑制脂质合成,进而改善T2DM 大鼠的肝脏脂质沉积。     

标准三联疗法联合依卡倍特钠治疗幽门螺杆菌相关十二指肠球部溃疡疗效观察

目的 评价标准三联疗法联合依卡倍特钠治疗幽门螺杆菌(Hp)相关十二指肠球部溃疡的临床疗效,以及加入依卡倍特钠对提高疗效的作用 方法 选择符合入选标准的Hp相关十二指肠球部溃疡患者124例,随机分为治疗组和对照组.治疗组给予依卡倍特钠1.5 g,每天2次,并联合应用奥美拉唑20 mg、免林霉素0.5 g,阿莫西林1g,每天2次,连用7d,对照组服用奥美拉唑20 rg、克林霉素0.5 g、阿莫西林1g,每天2次,连用7d,疗程结束后4周,采用’4C尿素呼气试验(14C-UBT)检测Hp根除情况.结果 在临床症状缓解方面及Hp根除治疗方面,治疗组均优于对照组,差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 标准三联疗法联合依卡倍特钠治疗能显著改善Hp相关十二指肠球部溃疡患者的临床症状,加入依卡倍特钠提高了标准三联疗法根除Hp的疗效.     

尼美舒利对SGC-7901胃癌细胞系增殖及端粒酶hTERT-mRNA表达的影响

目的探讨不同浓度的尼美舒利(nimsulide)对人胃腺癌SGC-7901细胞系增殖及其端粒酶hTERT—mRNA表达的作用。方法不同浓度的尼美舒利(50，100，150μmol／L)与SGC-7901细胞系共同培养24、48、72h，MTT检测细胞增殖，相差显微镜动态观察细胞形态及生长方式上的改变，RT—PCR检测细胞端粒酶hTERT—mRNA的表达。结果尼美舒利呈时间剂量依赖性抑制SGC-7901细胞的生长，hTERT—mRNA的表达降低，并且呈剂量依赖关系。结论尼美舒利能抑制SGC-7901胃癌细胞系hTERT—mRNA的表达，进而抑制其生长，这可能是选择性COX-2抑制剂抗肿瘤的机制之一。     

乳酸杆菌对蒙古沙鼠幽门螺杆菌感染性胃炎的疗效及其机制

目的: 观察乳酸杆菌对蒙古沙土鼠H Pylori 感染性胃炎的治疗作用,探讨乳酸杆菌防治H pylori感染的作用机制.方法: 通过接种H pylori,建立蒙古沙土鼠H pylori感染性胃炎动物模型,将造模成功的32只蒙古沙土鼠随机分为4组,每组8只.第1组(抗生素加质子泵抑制剂干预治疗组)、第2组(乳酸杆茵治疗组)、第3组(乳酸杆菌加质子泵抑制剂治疗组)、第4组(生理盐水对照组),用相应干扰剂分别连续灌胃治疗10 d.另8只正常蒙古沙土鼠为第5组(空白对照组).最后1次灌胃4 wk后处死沙鼠,HE染色判断鼠胃黏膜组织学损伤,并用快速尿素酶试验、Giemsa染色和细菌培养进行Hpylori的检测,免疫组化检测胃黏膜中IL-6、COX-2、和TNF-α蛋白的表达.结果: 第1组、第2组和第3组之间蒙古沙土鼠的H pylori根除率无显著差异,但均比第4组的根除率低,之间差异有显著性(87.5%,75%,75%vs100%,均P<0.05).第1组、第2组和第3组蒙古沙土鼠的胃体、胃窦和十二指肠各部位组织胃黏膜慢性炎症评分与第4组相比显著下降(胃体:1.8±0.54,2.0±0.48,1.9±0.50vs4.2±1.06,均P<0.05;胃窦:1.5±0.27,1.4±0.33,1.7±0.46vs4.6±0.74,均P<0.05:十二指肠:1.4±0.41,1.7±0.29,1.6±0.52vs4.1±0.83,均P<0.05).第1组、第2组和第3组蒙古沙土鼠三种炎症因子表达与第4组相比显著下降(COX-2:3.57±0.32,3.89±0.51,2.95±0.76vs6.79±1.68,均P<0.05:IL-6:2.42±0.60,2.28±0.7l,1.93±0.52vs5.61±0.28,均P<0.05;TNF-α:3.30±0.52,3.65±0.35,2.84±0.20vs6.76±1.63,均P<0.05).结论: 乳酸杆菌治疗蒙古沙鼠Hpylori感染性胃炎模型的疗效与PPI加抗生素三联疗法相当;并可显著降低沙鼠胃黏膜的COX-2、IL-6、TNF-α的表达.     

Pim-1抑制剂对巨噬细胞pNF-kBp65、iNOS，TNF-a表达的影响

【目的】探讨Pim-1抑制剂对巨噬细胞pNF-kBp65、iNOS,TNF-a表达的影响。【方法】在脂多糖（LPS）刺激前给予不同浓度的Pim-1特异性抑制剂PIM-Inh,WesternBlot检测pNF-kBp65的表达,RT—PCR测定iNOS,TNF—d的表达,比较不同浓度抑制剂对pNF-kBp65、iNOS,TNF-a表达的影响。【结果】用不同浓度PIM-Inh预处理后,NF-kBp65、iNOS,TNF-a的表达明显下降（P〈0．05）,且呈剂量依赖性,浓度100μmol／L时最为明显。【结论】PIMmInh特异性抑制剂可能抑制TLR4／NF-kB信号转导,降低TNF-a,iNOS的表达。     

Aurora-B蛋白在胃癌组织中的表达及意义

[目的]探讨Aurora-B蛋白在胃癌组织中的表达及意义.[方法]采用免疫组化法检测Aurora-B蛋白在胃癌组织、不典型增生组织及正常胃黏膜组织中的表达水平,分析其与胃癌临床病理特征及预后的关系.[结果]在正常胃黏膜→不典型型增生→胃癌的过程中,Aurora-B蛋白的表达呈逐渐递增趋势,Aurora-B蛋白表达与肿瘤浸润深度、分化程度、淋巴结转移显著相关(P<0.05),而与年龄、性别无关.Log-rank检验显示,Aurora-B蛋白阳性胃癌患者生存率低于Aurora-B蛋白阴性生存率,Cox回归多因素分析:Aurora-B蛋白阳性可作为影响胃癌预后的独立因素.[结论]Aurora-B蛋白表达水平可能是反映胃癌发生、进展、生物学行为,是指导临床辅助治疗的重要生物学指标,Aurora-B蛋白表达还可作为评价胃癌的预后指标.