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目的纯化铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)溶血素共调节蛋白(Hemolysin co-regulated protein,Hcp)并制备抗血清。方法从NCBI网站查到铜绿假单胞菌Hcp蛋白序列,采用Signal IP 4.1预测定位及信号肽情况;登录Swiss model网站预测三级结构情况;登录www.iedb.org网站预测其B细胞表位。根据Hcp基因序列设计特异性引物,以铜绿假单胞菌基因组DNA为模板,PCR扩增Hcp基因,经双酶切后连到pET28a。将重组质粒pET28a-Hcp转化大肠埃希菌BL21(DE3),然后用IPTG诱导重组Hcp蛋白表达。使用镍柱亲和层析法纯化目的蛋白。用Hcp蛋白免疫BALB/c小鼠,ELISA法检测抗血清效价。结果 Hcp定位在细菌细胞浆,无信号肽,6个单体蛋白组成一个环状的中空结构,含有多个B细胞表位。构建的表达质粒pET28a-Hcp能表达23.9×10~3大小的Hcp蛋白,镍柱层析后得到高纯度的Hcp蛋白,重组Hcp蛋白诱导的抗体效价大于1∶10 240。结论成功重组表达铜绿假单胞菌Hcp蛋白及高滴度的抗血清,为研究Hcp的功能奠定了实验基础。 相似文献
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目的：研究中西医结合治疗多囊卵巢综合致月经失调（PCOS）的临床疗效。方法：选取2008年5月至2011年5月在我院治疗的患者48例，均为已婚女性，分为实验组和对照组，每组24例。实验组患者给予针刺，服用中药补肾益肝汤结合肌注西药HCG。对照组患者给予单纯的西医治疗，只肌注西药HCG。治疗3个月后，检测两组患者雄性激素分泌情况，统计两组经期、经量恢复正常的人数，并比较。结果：治疗3个月后，接受中西医结合治疗的月经恢复正常人数为15例，多于只接受西医治疗的8例。并且实验组患者分泌雄性激素过多的症状得到明显改善，优于对照组。两组数据差异明显，P〈0．05，具有统计学意义。结论：中西医结合方法治疗PCOS疗效良好，显著降低雄性激素分泌量，改善激素分泌紊乱症状，促进排卵量，提高受孕率。 相似文献
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目的探讨脑钠肽(BNP)水平与慢性阻塞性肺疾病急性加重期(AECOPD)患者病情严重程度的相关性,评价其对病情评估的价值。方法收集2010年1月—2012年6月期间我院呼吸内科及ICU的96例AECOPD患者的住院资料进行统计分析,比较有无呼吸机使用指征及不同临床转归患者的BNP水平,行受试者工作特性曲线(ROC)和Logistic回归分析。结果血清BNP水平与二氧化碳分压(PaCO)2、生理与慢性健康评分(APACHEⅡ)、肺动脉收缩压、右室内径呈正相关,与血清胆碱酯酶水平呈负相关。有呼吸机使用指征的患者BNP水平也明显高于无应用指征的患者(P=0.007)。BNP水平(AUC 0.703)对临床转归有影响。结论 BNP水平与AECOPD患者的病情严重程度存在相关性,可以作为评价病情及预测治疗结果的一个独立指标。与急性APACHEⅡ评分相比,BNP并无明显的优势。 相似文献
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目的研究孕前和孕期母体外周血血红蛋白(Hb)浓度与发生胎儿死产风险间的关系。方法选取2015年1月～2017年12月在陕西省宝鸡市高新人民医院经妊娠期≥28周分娩时发生胎儿死产的12例孕妇作为实验组,选取同期胎儿安全出生的孕妇246例作为对照组。使用多变量逻辑回归模型,评估妊娠不同阶段母体外周血Hb浓度和稀释情况与发生死产风险的比值比(OR)及95%的置信区间。结果孕前母体外周血Hb浓度与胎儿死产之间没有相关性。在妊娠中期结束时外周血Hb浓度过高(≥140 g/L)的孕妇发生胎儿死产的风险比Hb浓度为正常值(110～120g/L)的孕妇高出两倍多(OR=2.32);而Hb浓度较低(110 g/L)的孕妇,发生死产的风险下降了29%。在妊娠期或仅在妊娠中期降低母体外周血Hb浓度均可以降低死产风险。结论孕前母体外周血Hb浓度与死产没有相关性。妊娠期高浓度Hb以及血红蛋白缺乏稀释可作为高危妊娠的一个信号。 相似文献
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目的探讨以右美托咪定为基础的早期目标导向镇静(EGDS)用于慢性阻塞性肺疾病急性加重(AECOPD)有创机械通气患者的临床价值,以及相对于传统标准镇静方案(STDS)的优势。方法选取52例慢性阻塞性肺疾病(COPD)急性加重患者,有创机械通气大于12 h,随机分为EGDS组和STDS组,比较两组患者的浅镇静达标率、机械通气时间、住院时间、不良反应的发生率以及镇静药物调整次数等。结果两组患者机械通气48 h内,EGDS组浅镇静达标率明显高于STDS组(58.8%比37.8%,P=0.01)。EGDS组患者7天内拔除气管插管率高于STDS组(85%比70%,P=0.01),ICU住院时间更短(5.5(4.2~9.7)比6.5(3.2~10.2),P=0.04),镇静剂的调整次数低于STDS组,不良反应(包括谵妄、血管活性药物的使用)更少。结论早期目标导向镇静(EGDS)用于慢阻肺急性加重机械通气患者是可行的、安全的。以右美托咪定为基础的EGDS较传统镇静药物更具优势,不良反应少,更具实用价值。 相似文献
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金秋九月,洋溢着丰收的喜悦,更让许多妈妈开心的是,她们的宝宝已经从家庭第一课堂毕业,进入社会第一学堂一幼儿园。然而,对宝宝未来的新生活,妈妈们既充满向往,又忧心忡忡。宝宝们将面临全新的生活,怎样才能帮助宝宝顺利度过“入园关”呢？这是每位家长的新课题。 相似文献
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目的调查新生儿后遗症的发生情况,并分析其影响因素。方法以2008年1月-2012年1月期间产科分娩的268例出生时有窒息症状的新生儿为研究对象。采用自制调查问卷表对本组患儿窒息后遗症的发生情况进行调查。并采用Logistic回归分析工具对患儿窒息后遗症发生的影响因素进行分析。结果 268例出生时有窒息症状的新生儿中,发生后遗症的患儿共32例(11.94%)。同时,通过单因素和多因素的分析,母体妊高征(回归系数=2.112,P=0.000)、休克(回归系数=1.762,P=0.000)、5minApgar异常(回归系数=-2.524,P=0.000)、出生时意识昏迷(回归系数=1.361,P=0.000)、CT检查提示出血(回归系数=0.028,P=0.000)、出生时中枢性呼吸衰竭(回归系数=-1.656,P=0.000)。结论产妇在临床分娩过程中出现母体妊高征、休克症状以及新生儿出生时出现意识昏迷、颅脑出血及中枢性呼吸衰竭症状时,预后均不良,婴儿发生后遗症的几率增大。这为临床研究中新生儿窒息后遗症的预防提供了依据及方向。 相似文献
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文题释义：
糖尿病性骨病：糖尿病可导致骨代谢发生改变,表现为骨形成缺陷、成骨细胞数量减少、骨基质形成不足。高糖环境下以成骨细胞功能改变最为显著,高糖诱导成骨细胞是研究糖尿病性骨病的常用细胞模型。
成骨作用：指成骨细胞移至将要合成骨组织的部位,分泌、合成骨胶原及骨蛋白纤维,将钙、磷吸收到纤维孔隙中进行沉淀结晶,形成骨组织的过程。
背景：以往研究表明多种miRNA在骨形成中发挥作用,miR-335-5p可保护成骨细胞免受氧化应激,对枸橼酸铁铵诱导的成骨细胞具有保护作用,但miR-335-5p对高糖环境下成骨细胞增殖和凋亡的影响尚未可知。
目的：探讨miR-455-3p靶向HIPK2对高糖环境下成骨细胞增殖和凋亡的影响。
方法：双荧光素酶报告基因分析法验证miR-455-3p对HIPK2的靶向作用。体外用高糖诱导MC3T3-E1细胞,分为空白组、高糖组、高糖+miR-control组、高糖+miR-455-3p组、高糖+si-control组、高糖+si-HIPK2组、高糖+miR-455-3p+pcDNA组和高糖+miR-455-3p+pcDNA-HIPK2组。qRT-PCR检测miR-455-3p和HIPK2 mRNA的表达,MTT法检测细胞存活率,流式细胞检测细胞凋亡,Western blot检测HIPK2、p-STAT3和STAT3蛋白的表达。
结果与结论：①HIPK2是miR-455-3p的靶基因,miR-455-3p可负性调控HIPK2的表达;②高糖处理可抑制miR-455-3p的表达,促进HIPK2的表达;③过表达miR-455-3p或抑制HIPK2表达均可促进高糖条件下MC3T3-E1细胞的存活和抑制凋亡;④过表达HIPK2可部分逆转miR-455-3p对高糖条件下成骨细胞的存活促进和凋亡抑制作用;⑤miR-455-3p通过调控HIPK2抑制成骨细胞中p-STAT3的表达;⑥结果表明,miR-455-3p通过靶向下调HIPK2抑制高糖诱导的成骨细胞凋亡,促进成骨细胞增殖,这可能与抑制STAT3信号通路有关。
ORCID: 0000-0001-7129-8455(匡嘉兵)
中国组织工程研究杂志出版内容重点：组织构建;骨细胞;软骨细胞;细胞培养;成纤维细胞;血管内皮细胞;骨质疏松;组织工程 相似文献