弓形虫胚层发育相关蛋白基因的克隆和序列分析

目的 对15个弓形虫虫株的弓形虫胚层发育相关蛋白(TgERP)基因进行克隆和序列分析,了解其变异和进化情况,为评价该蛋白在血清学诊断和疫苗防疫应用上的价值提供理论基础。方法 设计TgERP基因的PCR引物,对15个弓形虫虫株进行PCR扩增和序列测定,测序结果利用Puzzle 5.2、Paup 4.0和DNAStar 5.0软件进行分析。结果 TgERP基因包含的完整开放阅读框(ORF)长度均为315 bp,A+T含量在46.67%～46.98%之间,仅有1个碱基发生变异,变异率为0%～0.32%。编码104个氨基酸,变异率在0%～0.96%之间。系统进化分析显示,TgERP基因序列虽然能够将弓形虫I型虫株与II/III型虫株区分开,但却不能区分所有基因型的虫株。结论 TgERP基因在各基因型虫株中十分保守,不适合作为遗传标记分子来区分不同基因型的弓形虫虫株。