去卵巢大鼠下丘脑-垂体-卵巢轴的功能代偿机制研究

目的:在细胞和分子水平上,探讨机体因各种原因导致卵巢功能低下时,下丘脑-垂体-卵巢轴(HPOA)功能的自然代偿机制.方法:观察大鼠切除卵巢后1～6个月,下丘脑促性腺激素释放激素(Gonadotropin releasinghormone,GnRH)及其mRNA表达的改变以及阴道脱落细胞形态和外周血雌二醇(E2)水平的变化.结果:去卵巢后5～6个月时,大鼠阴道涂片出现成熟脱落细胞;4个月时血E2水平明显升高,6个月时几乎稳定在正常水平的一半以上;随去卵巢时间延长,大鼠下丘脑GnRH神经元数目较去卵巢1个月时逐渐增多,至6个月时,升高有显著差异,但仍低于正常组数目;去卵巢1个月大鼠下丘脑组织GnRHmRNA表达明显减少,去卵巢后5个月明显升高,与正常组相比没有显著差异;GnRH棘型神经元的比例在去卵巢4个月时即升高到正常水平.结论:大鼠卵巢功能低下时,机体体内可能存在一种自然代偿作用,使异常的HPOA功能趋于正常化.     

针刺对急性手术创伤大鼠下丘脑促肾上腺皮质激素释放因子家族肽及其受体表达的影响

目的:通过观察针刺对急性手术创伤大鼠下丘脑促肾上腺皮质激素释放因子(CRF)家族肽及其受体表达的影响,探讨针刺调节急性手术创伤所导致的下丘脑-垂体-肾上腺(HPA)轴功能异常作用的神经内分泌机制。方法:雄性SD大鼠40只,随机分成正常组、创伤组、正常加电针组、创伤加电针组,每组10只。创伤动物在乙醚麻醉下行剖腹探查术。电针组动物电针"足三里""三阴交"30min。应用特异性放射免疫法检测各组动物血清促肾上腺皮质激素(ACTH)、皮质肌动蛋白(Cort)、促黄体生成素(LH)和肌钙蛋白(T)的水平,应用RT-PCR的方法观察各组动物下丘脑CRF家族肽和其受体mRNA的表达。结果:创伤组大鼠血清ACTH水平显著下降(P0.05),创伤加电针组血清ACTH水平和创伤组相比显著升高(P0.05);创伤组大鼠血清Cort水平较正常组显著上升(P0.05),创伤加电针组血清Cort水平较创伤组显著降低(P0.05);各组动物血清LH和T水平差异无统计学意义(P0.05)。创伤组大鼠下丘脑CRF mRNA的表达和正常组相比降低(P0.05),创伤加电针组大鼠下丘脑CRF mRNA的表达和创伤组相比升高(P0.05);创伤组大鼠下丘脑Ucn1 mRNA的表达与正常组比较升高(P0.05),创伤加电针组大鼠下丘脑Ucn1 mRNA的表达和创伤组相比下降(P0.05);各组Ucn2、Ucn3和CRF受体1 mRNA的表达差异均无统计学意义(P0.05)。结论:电针效应具有多环节、多靶点的特点,电针可能通过调整急性创伤大鼠下丘脑CRF和Ucn1 mRNA的表达,进而调整急性剖腹探查所致的大鼠HPA轴功能异常。     

GPR54/kisspeptin的生殖内分泌作用研究进展

GPR54是新发现的视黄酸家族G蛋白偶联受体,其内源性配体为k isspeptin。GPR54/K iss-1 mRNA分布于中枢神经系统的下丘脑、弓状核等多个区域,其表达随大鼠不同生理阶段及性周期的改变而变化。GPR54/k isspeptin在调节促性腺激素LH和FSH的释放,促进生殖器官的发育及青春期启动中具有相当重要的作用。     

糖皮质激素受体及其调节药物在应激中的作用及机制

海马糖皮质激素受体(GR)参与下丘脑-垂体-肾上腺(HPA)轴功能的负反馈调节,是调控机体应激反应和海马可塑性不可或缺的因素.海马GR可以通过抑制HPA轴关键调节因子促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)的转录与合成,实现对HPA轴的负反馈调节,从而促进应激后机体内稳态恢复.但GR长期过度激活将损害海马突触可塑性,影响学习...     

滋阴泻火中药对性早熟模型大鼠促性腺激素释放激素及其受体mRNA表达的影响

目的：观察滋阴泻火中药对达那唑诱导的性早熟模型大鼠下丘脑促性腺激素释放激素(GnRH)和垂体GnRH受体mRNA表达的影响,探讨滋阴泻火中药的作用机制。方法：将动物分为正常组、模型组、生理盐水组和中药组。模型组、生理盐水组和中药组动物5日龄时皮下注射达那唑300μg;中药组在15日龄时开始喂饲滋阴泻火中药,生理盐水组同时给予等量的生理盐水。免疫组织化学ABC法观察大鼠下丘脑GnRH的表达;逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)观察下丘脑GnRHmRNA和垂体GnRH受体mRNA的表达。结果：和正常组比较,模型组和生理盐水组大鼠阴门开启和建立性周期的时间提前,下丘脑GnRHmRNA和垂体GnRH受体mRNA的表达升高,下丘脑GnRH免疫阳性神经元减少;中药组大鼠阴门开启和建立性周期的时间延缓,下丘脑GnRHmRNA和垂体GnRH受体mRNA的表达降低,下丘脑GnRH免疫阳性神经元增多。结论：滋阴泻火中药可能通过抑制下丘脑GnRH的合成和释放以及降低垂体对GnRH的反应性,抑制提前启动的下丘脑-垂体-性腺轴功能,这可能是滋阴泻火中药治疗性早熟的机理。     

达那唑诱导的雌性性早熟大鼠GnRH及其受体mRNA的表达

目的 观察达那唑对雌性大鼠下丘脑-垂体-靶腺轴及下丘脑GnRH mRNA和垂体GnRH受体mRNA表达的影响。方法 5天龄雌性大鼠皮下一次注射300μg达那唑以诱导真性性早熟。从25日龄起观察和记录阴门开启鼠龄和从阴门开启日起进行阴道涂片以确定第一个动情周期。检查阴道涂片和体重及垂体、肾上腺、子宫、卵巢器官重量，观察雌激素依赖的阴道脱落细胞的周期性变化和主要器官的发育情况。RT-PCR法观察雌性大鼠下丘脑GnRH mRNA和垂体GnRH受体mRNA的表达。结果 5日龄雌性大鼠给予皮下注射达那唑，可诱导大鼠阴门提前开启和建立性周期的时间提前，子宫和卵巢的重量明显增加，下丘脑GnRH mRNA和垂体GnRH受体mRNA的表达升高。结论 达那唑对雌性大鼠下丘脑-垂体-卵巢轴有多层次的作用，可诱导雌性大鼠下丘脑-垂体-卵巢轴的功能提前启动。     

Kisspeptin/GPR54信号通路促使性早熟形成的作用观察

目的:以达那唑诱导的雌性性早熟模型大鼠为研究对象,探讨下丘脑kisspeptin/GPR54信号通路在性早熟发病机制中的作用。方法:3日龄SD雌性大鼠,随机分为正常组、对照组和模型组。于大鼠5日龄时,模型组皮下注射溶有达那唑的乙醇与乙二醇的混合液进行造模,分别于大鼠15、25、30、35和40日龄时处死,留取标本。观察性器官发育情况;采用ELISA法检测外周血中E2、FSH和LH水平;采用real-time PCR法检测下丘脑Kiss-1、GPR54和GnRH的mRNA表达;应用免疫荧光法观察下丘脑kisspeptin的表达情况。结果:模型大鼠青春期启动和性成熟时间较正常组和对照组显著提前(P0.05);在25和30日龄时,模型大鼠外周血清性激素水平和子宫系数均显著高于正常组和对照组(P0.05);在25和30日龄时,模型大鼠卵巢形态学发育也明显早于正常组;在25日龄时,模型组大鼠下丘脑Kiss-1和GnRH的mRNA及下丘脑弓状核kisspeptin表达显著高于正常组和对照组(P0.05);在30日龄时,模型组大鼠下丘脑弓状核kisspeptin表达低于正常组和对照组(P0.05);在35日龄时,模型组大鼠Kiss-1和GnRH的mRNA表达较正常组和对照组降低(P0.05);在所观察日龄内,各组大鼠GPR54mRNA的表达均无显著差异。结论:性早熟模型大鼠在青春期启动时下丘脑Kiss-1 mRNA和kisspeptin的表达显著上调,提示kisspeptin可能是性早熟形成的启动因子,kisspeptin/GPR54信号通路在性早熟的发病中可能起着重要作用。     

疾病蛋白质组研究进展

蛋白质组是继人类基因组计划之后，生物医学领域的又一研究热点，随着蛋白质组研究技术的日趋完善，蛋白质组研究已开始从建立数据库走向解决生命科学的重大问题，在肿瘤和神经系统疾病的发生与诊断以及病理研究等方面已经得到重大。疾病蛋白质组的深入研究，将对重大疾病的发病机制、疾病诊断、疾病预防和治疗提供重要的理论基础。     

两种慢性痛大鼠脊神经节生长抑素mRNA的表达及电针的影响

目的：观察福尔马林试验和去传入神经两种慢性痛模型大鼠脊神经节生长抑素mRNA的改变。方法：原位杂交组织化学，结果：福尔马林试验可导致大鼠同侧脊神经节生长抑素mRNA阳性细胞增加，而去传入神经则导致大鼠双侧脊神经节生长抑素mRNA阳性细胞减少，结论：电针可以分别改变两种模型大鼠脊神经节生长抑素mRNA的表达。     

电针对去卵巢大鼠下丘脑GnRH系统影响的分子机制

目的：探索电针调整下丘脑垂体卵巢轴功能异常的中枢机制，观察切除卵巢后大鼠下丘脑GnRH及其受体改变，以及电针对它们的影响。方法：应用免疫组化和RT-PCR方法，观察大鼠切除卵巢4星期后，下丘脑GnRH免疫阳性神经元数量和分型、GnRH免疫阳性纤维的变化以及GnRHmRNA和垂体GnRH受体mRNA的改变，及电针对它们的影响。结果：电针后，大鼠下丘脑GnRH神经元数目较去卵巢4星期时明显增多，棘型细胞比例增加，纤维膨体密度增加，下丘脑组织GnRHmRNA表达增高，垂体GnRH受体mRNA表达升高。结论：电针可在分子水平调整去卵巢大鼠中枢GnRH的合成与释放，以及垂体GnRH受体的表达，这可能是电针调整下丘脑－垂体卵巢轴功能异常的中枢机制。