土荆皮乙酸诱导鼻咽癌细胞铁死亡的作用及机制

目的 探讨土荆皮乙酸诱导鼻咽癌发生铁死亡的机制。方法 CCK-8法检测土荆皮乙酸(pseudolaric acid B,PAB)干预鼻咽癌细胞的细胞毒性。将鼻咽癌细胞分为对照组、土荆皮乙酸组(PAB组)、土荆皮乙酸+铁死亡抑制剂组(PAB+Fer-1组),划痕实验检测土荆皮乙酸对鼻咽癌细胞迁移能力的影响;化学发光法检测鼻咽癌细胞丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽(GSH)含量水平;Western Blot检测鼻咽癌细胞铁死亡相关蛋白谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)、重肽铁蛋白(FTH1)、溶质载体家族7成员11(SLC7A11)、环氧化酶2(COX-2)的表达水平;流式细胞术检测鼻咽癌细胞的活性氧(ROS)水平。结果 土荆皮乙酸随着剂量的增加和时间的延长抑制鼻咽癌细胞的细胞活力并诱导细胞死亡的作用增强。土荆皮乙酸能够明显抑制细胞迁移和增殖,促进细胞凋亡。土荆皮乙酸增加ROS水平、降低GSH水平、降低SOD活性、增加MDA浓度;下调GPX4、FTH1、SLC7A11表达,上调COX-2表达。土荆皮乙酸+铁死亡抑制剂组降低ROS水平、MDA浓度,增加GSH、SOD水平,上...     

化湿理气法在岭南郁证人群中的应用

随着现代社会飞速发展,外界压力增大使得郁证发病率逐年增加。传统的郁证治法多从肝论治,忽视了脾胃功能失调在郁证中的影响。脾胃位居中焦,为气机升降之枢纽。脾胃失和,气机郁滞可发为郁证。冼绍祥教授认为,岭南地区人群常年居处于湿热之地,多具脾虚痰湿的体质学特点。中医认为人与自然为一个整体,结合三因致病学说理论依据,在岭南郁证人群的调治中,应重视“湿”这一特点,化湿理气法成为岭南地区郁证治疗的重要方法。     

基于AKT/GSK3-β/SNAIL 通路探讨黄芪甲苷对心力衰竭心肌纤维化小鼠的保护作用

目的基于AKT/GSK3-β/SNAIL 通路探讨黄芪甲苷对心力衰竭（Heart Failure,HF）心肌纤维化小鼠的保 护作用。方法将40 只雄性C57BL/6J 小鼠随机分为假手术组、模型组、黄芪甲苷组（80 mg·kg-1）、曲西瑞宾 组（1 mg·kg-1,AKT 抑制剂）及黄芪甲苷（80 mg·kg-1）+SC79（5 mg·kg-1,AKT 激动剂）组,每组8 只。采用主动 脉弓缩窄术复制心力衰竭小鼠模型。模型复制前,曲西瑞宾组给予腹腔注射给药,每日1 次,连续1 周;模型 复制成功后,黄芪甲苷组给予灌胃给药,每日1 次,连续4 周;黄芪甲苷+SC79 组采用腹腔注射联合灌胃给 药,模型复制前腹腔注射SC79（5 mg·kg-1）每日1 次,连续1 周,模型复制成功后以黄芪甲苷（80 mg·kg-1）灌 胃,每日1 次,连续4 周。采用心脏彩超检测小鼠心功能,采集左心室射血分数（LVEF）和左室短轴缩短 率（LVFS）;采用Masson 染色法检测小鼠心肌组织纤维化情况;采用天狼星红染色法检测小鼠血管及间质内胶 原纤维沉积情况;采用Western Blot 法检测小鼠心脏组织CD31、α-SMA、AKT、GSK3-β、pGSK3-β、SNAIL 蛋白表达情况。结果与假手术组比较,模型组小鼠的LVEF、LVFS 水平显著降低（P＜0.01）,心肌纤维化面 积显著增加（P＜0.01）,血管周围及间质的胶原纤维沉积显著增加（P＜0.01）,CD31 蛋白表达水平明显下 降（P＜0.05）,α-SMA、AKT、GSK3-β、pGSK3-β、SNAIL 蛋白表达水平明显升高（P＜0.05）。与模型组比 较,黄芪甲苷组和曲西瑞宾组的上述各项检测指标均得到明显逆转（P＜0.05,P＜0.01）,黄芪甲苷+SC79 组的 指标变化均不明显（P＞0.05）。结论黄芪甲苷可能通过AKT/GSK3-β/SNAIL 通路抑制内皮间质转化,从而抑 制心肌纤维化,改善心力衰竭。     

益气温阳活血法对心力衰竭大鼠心肌细胞线粒体通透性转变的影响

目的 观察益气温阳活血法对心力衰竭大鼠心肌细胞线粒体通透性转变的作用。方法 将SD大鼠随机分为对照组、模型组,心阳片低、中、高剂量组,每组6只。除对照组开腹后不行腹主动脉缩窄术,其余大鼠采用腹主动脉缩窄术复制心力衰竭模型,心阳片低、中、高剂量组分别给予心阳片140,281, 562 mg·kg-1,连续2周。采用心脏彩超检测各组大鼠心功能,观察各组心肌细胞线粒体在CaCl2作用15 min后,540 nm吸光值的变化值检测各组心肌细胞线粒体通透性（MPT）转变。通过萤光素-萤光素酶的方法检测心肌细胞三磷酸腺苷（ATP）的含量。结果 模型组左室射血分数（LVEF）和左室短轴缩短率（LVFS）较对照组显著降低（P＜0.01）;心阳片低、中、高剂量组LVEF和LVFS较模型组均显著增加（P＜0.01）。模型组心肌细胞MPT较对照组显著增加（P＜0.01）,而心阳片中、高剂量组MPT较模型组显著减少（P＜0.01）。模型组心肌细胞ATP含量较对照组显著减少（P＜0.01）,而心阳片低、中、高剂量组ATP含量较模型组均显著增加（P＜0.01）。结论 益气温阳活血法代表方心阳片具有抑制心衰大鼠心肌细胞线粒体通透性转变,改善心功能的作用。     

心阳片通过抑制心肌细胞自噬改善心力衰竭小鼠心功能的作用研究

目的探讨心阳片调节心肌细胞自噬改善心力衰竭(Heart failure,HF)小鼠心功能的作用机制。方法将48只雄性C57BL/6J小鼠随机分为假手术组,模型组,心阳片低、中、高剂量组(455、910、1820 mg·kg^-1)及3-甲基腺嘌呤组(15 mg·kg^-1,腹腔注射给药),每组8只;采用主动脉弓缩窄术复制HF小鼠模型;按上述剂量灌胃给药,灌胃体积为8 mL·kg^-1,每天给药1次,连续4周。采用心脏彩超检测各组小鼠心功能:小鼠左心室射血分数(LVEF)及左室短轴缩短率(LVFS);采用q PCR法检测小鼠心脏组织HF生物标记物B型钠尿肽(BNP)mRNA的表达;采用Western Blot法检测小鼠心肌细胞自噬相关蛋白Beclin-1及LC3BⅡ/Ⅰ的表达。结果与假手术组比较,模型组小鼠的LVEF、LVFS显著降低(P<0.05),BNP mRNA及Beclin-1、LC3BⅡ/Ⅰ蛋白表达明显上调(P<0.05)。与模型组比较,心阳片低、中、高剂量组及3-甲基腺嘌呤组小鼠的LVEF、LVFS显著升高(P<0.05),BNP mRNA及Beclin-1、LC3BⅡ/Ⅰ蛋白表达明显下调(P<0.05)。结论心阳片可能通过抑制心肌细胞过度自噬改善HF小鼠的心功能。     

芪苈强心胶囊治疗慢性心力衰竭临床疗效观察

目的观察芪苈强心胶囊治疗慢性心力衰竭的临床疗效。方法将80例慢性心力衰竭患者随机分为两组。对照组40例,予西医常规抗心衰治疗。治疗组40例,在对照组的基础上加服芪苈强心胶囊,每次4粒,每日3次。两组均连续治疗6个月。结果治疗组心力衰竭中医证候疗效显效率37.5%,总有效率92.5%,明显优于对照组。治疗组心功能疗效显效率45.0%,总有效率95.0%,明显优于对照组。治疗后两组B型利钠肽(BNP)均较治疗前明显降低,治疗后治疗组BNP较对照组低(P<0.05)。结论芪苈强心胶囊结合西医常规治疗能改善慢性心力衰竭患者临床症状、心功能,降低BNP含量。     

AGEs刺激对小鼠肝脏moesin表达及其磷酸化水平的影响

目的探讨糖基化蛋白终产物（AGEs）刺激对小鼠肝脏膜突蛋白（moesin）表达及其磷酸化水平的影响。方法 24只C57 BL/6雌性小鼠,随机分为对照组、AGE组、SB203580＋AGE组和Y27632＋AGE组,各6只。制备模型后,取小鼠肝脏组织进行石蜡包埋、切片,通过免疫组化法对各组肝脏moesin及其磷酸化moesin进行观察并行半定量分析。结果四组moesin均主要表达在肝窦和微血管的内皮细胞,肝细胞或胆管上皮细胞无表达;对照组磷酸化moesin几乎观察不到;AGE组肝窦和微血管内皮细胞中558位苏氨酸磷酸化moesin的表达明显增加;SB203580＋AGE组和Y27632＋AGE组肝脏内皮细胞磷酸化moesin染色深度明显低于AGE组并高于对照组。对照组、AGE组、SB203580＋AGE组、Y27632＋AGE组moesin灰度值分别为84.7±0.35、86.2±0.57、85.5±0.69、84.9±0.67,各组moesin相比,P均〉0.05;其磷酸化moesin灰度值分别为34.6±0.36、82.2±0.92、35.7±0.51、35.9±1.67;AGE组的磷酸化moesin与其余三组相比,P均〈0.05。结论 moesin在肝脏主要表达在肝窦和微血管的内皮细胞,AGEs处理或抑制p38 MAPK、ROCK活性后再给予AGEs均不影响肝脏moesin蛋白的表达;AGEs可导致肝脏内皮细胞moesin磷酸化,p38 MAPK和ROCK两条信号途径参与了moesin磷酸化的过程。