利用CRISPR／Cas9系统构建H22细胞GP73基因敲除稳定株及功能鉴定

目的：利用CRISPR／Cas9基因编辑系统敲除小鼠源肝癌细胞H22中的GP73基因,构建H22细胞GP73基因敲除的稳定细胞株。方法根据CRISPR／Cas9靶点设计原则,设计2条特异性识别GP73基因启动子的上下游sgRNA,利用载体pX459质粒,构建2对重组真核表达质粒。经酶切和测序鉴定后,将重组质粒转染至H22细胞内,使用嘌罗霉素加压筛选稳定敲除GP73的H22细胞株,利用免疫印迹检测重组质粒对内源GP73的敲除效果。MTT实验检测GP73被敲除后对细胞增殖能力的影响,再利用划痕实验检测细胞的迁移能力。结果免疫印迹结果说明敲除GP73基因的小鼠源H22细胞株内无GP73蛋白的表达;并且GP73被敲除后,H22细胞的增殖能力和迁移能力减慢。结论通过CRISPR／Cas9系统获得了靶向GP73基因的重组质粒,并且筛选出了稳定干扰GP73表达的细胞株,从而为探讨GP73在肝癌发生中的作用奠定基础。     

胶体金法检测乙肝病毒血清标志物的实验研究

 目的:客观评价胶体金法检测乙肝病毒标志物(HBVM)的准确性,了解胶体金法与ELISA法之间的差异.方法:收集急诊手术患者的血清标本1100份,用胶体金法和ELISA法同时检测,以ELISA方法检测结果为参照,比较胶体金法检测HBVM的灵敏度和特异性.结果:与ELISA胶体金法为标准计算HBsAg和HBeAg的灵敏度和特异性均超过90%;其他3个抗体的灵敏度和特异性均低于80%.结论:胶体金法检测HBsAg和HBeAg适用于急诊筛检,乙肝三项抗体金标法存在较严重的漏检,不适合急诊筛查.     

HIV滤纸型质控品洗脱液的选择与应用

目的:制备容易保存的以滤纸为载体的HIV抗体质控品,研究不同洗脱液的洗脱效果及稳定性.方法:取相同的质控品原液制备10μl体系的液态型质控品和滤纸型质控品.液态型质控品使用时加入490μl正常人血清,滤纸型质控品分别用生理盐水组、血清组、PBS组、PBS-TW20组和样品稀释液组等不同稀释液进行溶解,对其质控测定值和稳定性进行研究.结果:5组不同稀释液溶解的滤纸型质控品检测结果与传统的液态质控品相比均无显著性差异(P>0.05).但生理盐水组和PBS组所得数值与液体型最符合,并且在l周内具有较好的稳定性和均一性.结论:滤纸型质控品可替代液态质控品用于HIV初筛实验室的室内或室间质控.采用容易获得的生理盐水作为滤纸型质控品的洗脱液,具有较好的稳定性和准确性.     

肝移植患者白细胞计数假性增高4例报告

自2002年5月—2003年4月问，对60例肝移植患者血常规分析中，我们发现有白细胞计数假性增高现象，现报告如下：     

中国国际救援队在巴基斯坦流动医院行鼻腔异物取出术1例

鼻腔异物是耳鼻口冈喉头颈外科常见的急诊之一,多见于儿童,儿童玩耍时因新奇感,不慎将异物塞入鼻孔内,而又难以自行取出,造成鼻腔异物的误诊及漏诊,时间长了会带来各种并发症,给诊断与治疗增加困难。自2010年7月以来,巴基斯坦发生建同以来最大洪水灾害,中国国际救援队前往重灾区信德省特达市塔塔镇实施灾害救援,曾晚上接诊一位鼻腔异物患儿,行急诊全麻手术,成功取出异物。     

北京和乌鲁木齐驻军季节过敏性鼻炎流行病学调查的比较

 目的 比较北京、乌鲁木齐驻军季节过敏性鼻炎患病情况.方法 通过临床病史、皮肤点刺试验及过敏原特异性IgE抗体检测,对两地季节过敏性鼻炎患病情况进行分析.结果(1)驻乌部队季节过敏性鼻炎患病率(9.3％)显著高于驻京部队(1.2％,P＜0.05).(2)两地区当地郊区驻军患病率显著高于市区.(3)两地区过敏性鼻炎合并哮喘症状患者北京12例(1％),乌鲁木齐112例(5％),差异无统计学意义(P＞0.05).结论 乌鲁木齐驻军季节过敏性鼻炎患病率高于北京驻军;由鼻炎引起的哮喘症状不容忽视.     

艾滋病筛查实验室检测准确性的变化趋势

目的回顾性评价艾滋病实验室筛查检测准确性的变化规律。方法对武警总医院10年的艾滋病病毒（HIV）抗体检测数据进行回顾性分析。结果 1999-2008年共检测HIV抗体90289人次,其中筛查阳性412人次,复检阳性54例,经过确认阳性19例,阴性14例,不确定21例;人群HIV抗体阳性率为0.03%,HIV抗体不确定发生率为0.03%,其复检效率为86.9%,确认效率为61.1%。HIV抗体筛查阳性率由2002年0.79%下降到2008年0.19%,首次筛查阳性的真阳性率逐年上升,由2004年3.7%上升到2008年15.4%,筛查阳性的复检阳性率由2004年7.4%上升到2008年38.5%,复检效率由2002年100.0%下降到2008年61.5%。结论艾滋病实验室HIV抗体筛查准确性10年内提高了近4倍。     

影响FK-506在全血中分布的因素

目的分析影响FK-506在全血中分布的因素。方法全血和血浆的FK506浓度采用微粒子酶免疫测定法（Microparticle enzyme immunoassay MEIA），红细胞压积和红血球记数采用全自动血液细胞分析仪进行测定，HDL，VLDL和总胆固醇使用常规的生物化学方法进行测定。结果红细胞压积和红血球记数与FK-506的分布呈现正相关的关系，HDL、VLDL、总胆固醇和FK-506在血浆中的浓度密切相关，血浆白蛋白浓度与FK-506在血浆中分布没有相关性。结论红细胞压积和红血球记数严重影响全血中FK-506的分布，HDL、总胆固醇对FK-506在血浆中有一定的影响作用，血浆白蛋白浓度不影响在FK-506在血浆中的分布。     

乌鲁木齐地区武警官兵季节过敏性鼻炎流行病学调查

目的调查乌鲁木齐地区武警官兵季节过敏性鼻炎患病情况并分析疾病特点,指导官兵对季节过敏性鼻炎进行防治。方法 2010年7-8月,以驻乌部队2294名官兵为研究对象(经问卷调查纳入研究2194例),通过病史、皮肤点刺试验及过敏原特异性IgE抗体检测,了解驻乌部队季节过敏性鼻炎患病情况。结果确诊过敏性鼻炎203例,患病率为9.3%。干部及士官患病率高于战士(15.9%,4.9%,P<0.05),过敏原主要为蒿属花粉。服役时间与过敏性鼻炎阳性例数呈正相关(r=0.8,P<0.05)。根据所在地不同,患病率由高到低分别为郊区/库区、林区、市区(15.8%,7.9%,5.7%,P<0.05)。内地入伍兵患病率高于本地入伍兵(9.4%,7.2%,P<0.05)。汉族官兵的患病率高于少数民族(10.5%,2.1%,P<0.05)。结论乌鲁木齐地区武警官兵季节过敏性鼻炎患病率为9.3%,不同驻地官兵患病率有显著性差异。鼻炎症状随官兵在疆服役时间的延长而加重。     

尿微量蛋白联合检测对移植肾功能恢复的诊断价值

目的:观察肾移植术后移植肾的功能恢复情况以及肾小球和.肾小管的损伤情况.方法:在BNP100特定蛋白分析仪上分别测定病人术前、术后1周、4周尿蛋白,在AEROSET全自动生化仪上测定病人术前、术后1周、4周血肌酐.结果:与术前相比,尿蛋白、血肌酐均有显著性差异,而术后1周和4周相比,尿蛋白有显著性差异,血肌酐则无明显差别.结论:尿微量蛋白联合检测比传统的血肌酐更能反应移植肾的功能恢复及肾小球和肾小管的损伤情况.