急性淋巴细胞白血病的免疫分型和基因的研究

目的:回顾性分析30例急性淋巴细胞白血病(ALL)患者的免疫分型,融合基因及基因突变的分子生物学检测结果,并探讨其与临床治疗效果及预后的关系。方法:选取哈尔滨市第一医院血液肿瘤研究中心2015年8月到2016年6月经过骨髓细胞形态学、免疫表型、细胞遗传学、分子生物学等检查确诊的ALL患者30例,按照FAB标准分类,27例为B系ALL,3例为T系ALL。分析ALL患者白血病细胞膜表面及胞浆内分化抗原,并且对所有患者都进行43种融合基因定性筛查(BCR-ABL,AML1-ETO,PML-RARα等)和ALL基因突变(IKZF1,TP53,PAX5,JAK1,JAK2,CRLF2,PHF6,NOTCH1,FBXW7,PTEN)的二代测序(NGS)检测。结果:30例ALL患者中男性14例,女性16例,年龄2-74岁,中位年龄11.5岁。30例ALL中B-ALL发病率(90.00%)明显高于T-ALL(10.00%)。27例B-ALL患者主要表达CD19、CD22、CD10和CD34等。CD19和CD22是B-ALL最具有诊断价值的抗原;3例T-ALL主要表达cCD3、CD7、CD10和cTDT等,CD7和cCD3是T-ALL最具有诊断价值的抗原。30例ALL患者的43种融合基因定性筛查发现,BCR-ABL、TEL-AML1、E2A-PBX1、MLL-AF6、MLL-AF4和SIL-TAL融合基因阳性各1例,ALL相关基因突变的NGS检测结果表明,3例B-ALL患者发生TP53突变,1例B-ALL患者发生TET2 I1762V突变;3例患者(2例T-ALL,1例B-ALL)发现NOTCH1基因突变。1个疗程后成人B-ALL的治疗效果(28.57%)明显差于儿童B-ALL(95.00%),截止至2017年7月10日儿童B-ALL的生存率明显优于成人B-ALL,其差异都具有显著性意义。结论:白血病免疫分型技术及分子生物学检测技术在白血病的诊断、治疗方案的选择及疗效评价方面具有重要指导作用,是骨髓细胞形态学诊断的补充。     

酒精通过抑制肠上皮干细胞增殖损伤肠上皮的更新修复能力

目的 研究酒精对肠上皮干细胞(ISC)和肠上皮更新修复能力的影响。方法 将18只C57BL/6小鼠随机分为对照组(n=9)和酒精处理组(n=9)。采用Gao-Binge法制备慢性酒精中毒模型。在造模成功后,腹腔注射5-溴-2-脱氧脲苷(BrdU),分别在注射后2 h、24 h和72 h取小肠组织,采用免疫组化法检测BrdU阳性细胞和ISC特异性标志物Lgr5表达。结果 与对照组小鼠比,酒精处理组小鼠小肠绒毛高度显著缩短、萎缩;酒精处理组小鼠ISC细胞Lgr5表达显著弱于对照组;酒精处理组小鼠每个肠隐窝BrdU阳性细胞数量为(3.50±0.65)个/肠隐窝,显著少于对照组【(7.90±1.08)个/肠隐窝,P＜0.05】;在注射BrdU 后2 h、24 h和72 h,酒精处理组小鼠小肠BrdU阳性细胞迁移距离分别为(66.67±1.60)μm、(219.40±12.11)μm和(313.90±9.76)μm,显著短于对照组【分别为(111.10±1.60)μm、(319.00±10.04)μm和(625.90±3.34)μm,P＜0.05】。结论 酒精通过抑制ISC引起肠上皮细胞增殖和迁移能力下降,从而损伤肠上皮的更新修复能力,导致肠上皮屏障功能障碍。     

HBV感染者HLA-Ⅰ类和HLA-Ⅱ类基因单倍型分析

目的 本研究对黑龙江地区乙型肝炎病毒(HBV)感染者进行了人类白细胞抗原(HLA)Ⅰ类和Ⅱ类基因单倍型分析,并结合HBV-C2亚型探讨其与HBV感染者最终清除病毒和慢性持续的关系.方法 本研究共230个HBV感染者与210个健康无血缘关系健康人作为对照进行比较,并对所有患者进行了HLA等位基因分型和单倍型的连锁分析.结果 本地区最常见的单倍型是A*02-B*40.A*02-DRB1*08,A*02-DRB1*09,A*02-DRB1*12,A术11-DRB1*15,A*24-DRB1*09,A*33-DRB1*07,B*13-DRB1*12,B*15-DRB1*15,B*40-DRB1*08,B*40-DRB1* 09,B*51-DRB1* 09,B*51-DRB1*15,和A*02-B* 15-DRB1* 09携带者可能更易于感染HBV,而A*24-B*13,B*13-DRB1*09,A*02-DRB1*07,A*33-DRB1*13,A*33-DRB1*15,和A* 02-B* 40-DRB1* 15可能保护机体免受HBV感染.另外A*02-DRB1* 12可能还与病毒持续慢性感染相关.感染HBV C2亚型病毒后,A*24-DRB1* 14,B*15-DRB1* 04,A*02-B* 15,A*02-DRB1* 15和A*02-B15-DRB1* 09携带者可能伴有急性的临床发作过程并最终清除病毒.结论 本研究报道了HLA单倍型与HBV感染亚型与感染者临床预后的关系,对HBV的潜在的靶向治疗提供了一定的理论基础.     

自制环套式学步带加综合康复训练治疗外伤性下肢瘫痪疗效观察

目的 探讨自制环套式学步带在颅脑外伤致偏瘫患者早期行走训练中的作用和效果.方法 将100例脑外伤致下肢瘫痪患者随机分为实验组和对照组各50例,在常规治疗和护理完全一样的基础上实验组应用环套式学步带,分别在2周、1个月、3个月评定效果.结果 实验组站立平衡功能Ⅱ级和Ⅲ级者占50%,运动功能Brunnstrom(Br)Ⅳ级以上者占74%,步行速度显著提高者占84%,踝、膝关节自主活动显著改善者占86%,与对照组差异显著(P＜0.01).结论 自制环套式学步带能促进颅脑外伤致偏瘫患者自我认知能力恢复;对保持关节功能和行走能力恢复起重要作用.     

3种体细胞共培养体系对昆明鼠早期胚胎体外发育潜力的影响研究

目的:评价不同体细胞共培养体系对昆明鼠早期胚胎体外发育潜力的影响。方法:采用人卵丘细胞、昆明鼠卵丘细胞、昆明鼠成纤维细胞3种共培养体系与昆明鼠2细胞期胚胎共培养,与对照组比较,观察胚胎发育情况,计数囊胚细胞数、囊胚细胞凋亡数。结果:培养24～48h,4～8细胞及桑葚胚形成率共培养3组与对照组间无差异(P>0.05);培养72h,共培养3组间扩张囊胚形成率和囊胚形成率无差异(P>0.05),但均明显高于对照组(P<0.05);共培养3组间囊胚细胞数及囊胚细胞凋亡率无差异(P>0.05),但与对照组比较存在差异(P<0.05)。结论:不同类型的体细胞共培养体系均可在体外为胚胎发育提供一种更类似于体内的环境,有利于胚胎在体外发育。     

应用流式细胞术评分诊断骨髓增生异常综合征

目的 采用流式细胞术（FCM）评分对骨髓增生异常综合征（MDS）与非MDS（主要为非克隆性血细胞减少患者）患者进行鉴别.方法 应用FCM四参数（CD34＋髓系原始细胞占所有有核细胞百分比、B系祖细胞占CD34＋细胞百分比、髓系原始细胞CD45表达水平、成熟粒细胞SSC峰通道值）对50例MDS患者和20例非MDS患者进行评分,每个参数异常时计1分,评分≥2分时诊断为MDS.结果与非MDS对照组比较,MDS患者CD34＋髓系原始细胞比例增高,B系祖细胞比例降低,成熟粒细胞SSC水平降低,差异有统计学意义（P＜0.05）;而CD34＋髓系原始细胞CD45表达水平差异无统计学意义（P=0.06）.MDS组FCM评分高于非MDS组,差异有统计学意义（P＜ 0.001）.45例患者用此方法正确诊断为MDS,敏感度为90％;1例患者为假阳性,特异度为95％.结论 采用FCM四参数评分可帮助诊断MDS,可行性好,简单方便.     

FHIT在不同类型胃息肉与胃癌中的蛋白表达及与幽门螺杆菌感染的相关性

目的检测不同病理类型胃息肉与胃癌中FHIT（脆性组氨三联体fragile histidine triad,FHIT）蛋白及幽门螺杆菌（H.pylori,Hp）的感染率,讨论其在胃息肉与胃癌中的表达及其相关性。方法对15例慢性胃炎、20例增生性胃息肉、20例腺瘤性胃息肉、20例高分化胃癌和20例低分化胃癌采用免疫组化法检测FHIT蛋白的表达情况,采用快速尿素酶法检测Hp感染情况。结果 FHIT蛋白在高分化和低分化胃癌组均明显低于慢性胃炎组和增生性胃息肉组,差异有统计学意义（P〈0.05）;低分化胃癌组明显低于高分化胃癌组,差异有统计学意义（P〈0.05）;低分化胃癌组明显低于腺瘤性胃息肉组,差异有统计学意义（P〈0.05）;腺瘤性胃息肉组明显低于慢性胃炎组和增生性胃息肉组,差异有统计学意义（P〈0.05）。Hp的感染率在胃癌组与胃炎和胃息肉组相比,Hp感染率有统计学意义（P〈0.05）。Hp感染率和FHIT表达呈负相关（P〈0.05）。结论 FHIT蛋白表达下调与Hp感染可能在胃癌的发生过程中起着协同作用。     

乳黄油治疗面部烧伤的护理体会

面部是五官集中的重要部位,在烧伤事故中常较先累及.且眼睑、耳郭、口、鼻的烧伤处理较复杂[1].我院自2009年9月～2011年6月共收治面部烧伤患者80例,现笔者将护理体会介绍如下. 1 临床资料 本组80例中,男69例,女11例;年龄最大者62岁,最小者3岁,平均26.5岁;小儿10例,成人70例;住院时间为8～49天,平均28.5天;致伤原因:热水烫伤37例,火焰烧伤33例,化学烧伤5例;电烧伤5例;大部分为深Ⅱ度烧伤,仅有5例为Ⅲ度烧伤.     

小檗碱对酒精性肝炎小鼠“肠漏”的保护作用*

目的 探讨小檗碱（BBR）对酒精性肝炎小鼠“肠漏”的保护作用。方法 将40只雄性C57BL/6小鼠随机分为对照组、酒精组、BBR组和酒精联合BBR组,饲养8 w。采用ELISA法检测血清丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天冬氨酸氨基转移酶（AST）和内毒素（LPS）水平。常规行组织病理学和透射电镜检查肝组织学改变和肠上皮细胞间紧密连接（TJ）超微结构。体外培养肠上皮细胞Caco-2,采用免疫荧光法检测经酒精和BBR处理后的细胞间紧密连接主要结构蛋白occludin表达。结果 酒精处理组小鼠血清ALT、AST和LPS水平分别为（46.5± 5.9） U/L、（57.0± 6.1） U/L和（0.40± 0.05） ng/ml,显著高于对照组（P< 0.01）;酒精联合BBR组血清ALT、AST和LPS水平分别为（27.6± 4.2） U/L、（31.8± 4.1） U/L和（0.24± 0.03） ng/ml,均显著低于酒精组（P< 0.05）,而与对照组无显著性差异（P> 0.05）;酒精联合BBR组肝组织细胞变性和炎细胞浸润较酒精干预组明显改善;电镜下,可见酒精处理组小鼠肠上皮细胞间紧密连接结构模糊、缝隙明显增宽,酒精联合BBR组以上改变明显减轻;酒精处理组Caco-2细胞膜occludin分布减少、中断,部分进入胞浆内,酒精联合BBR组分布虽也减少,但仍连续,无中断。结论 小檗碱能改善慢性乙醇摄入诱导的细胞膜occludin减少和上皮细胞间紧密连接结构破坏,改善“肠漏”而具有保护肝脏作用。*基金项目：北京市自然科学基金资助项目(编号：7154194）;国家自然科学基金资助项目（编号：81570536）作者单位：150086 哈尔滨市 哈尔滨医科大学附属第二医院体检中心（王洪岩）;北京市首都医科大学附属北京天坛医院消化内科（李鑫,迟程,徐有青）第一作者：王洪岩,女,31岁,医学博士,住院医师。主要从事酒精性肝病的防治研究。E-mail: xinglin_freedom@126.com