抗日本血吸虫SEA鸡卵黄抗体的制备与鉴定

目的 制备特异性抗日本血吸虫可溶性虫卵抗原（SEA）的鸡卵黄免疫球蛋白（IgY）并检测其特异性、敏感性。 方法 用日本血吸虫SEA经翅膀下静脉和皮下免疫25周龄海兰母鸡4次（首次剂量为60 μg/只，加强剂量为30 μg/只），每次间隔10 d。取免疫前和首次免疫后35 d的鸡蛋卵黄，分别用水稀释法提取IgY，BCA法测定蛋白含量，并进行十二烷基磺酸钠?鄄聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）和蛋白质印迹（Western blotting）分析，ELISA检测纯化后IgY特异性和敏感性。分别提取免疫后不同时间的卵黄抗体，观察抗体效价的变化。 结果 海兰母鸡经SEA首次免疫后35 d，每枚蛋经提纯后可得到约61 mg抗体，经SDS-PAGE和Western blotting分析，纯化的IgY有1条主要蛋白带，相对分子质量（Mr）为130 000，并可被SEA识别。母鸡初次免疫后第10天，经SDS-PAGE和ELISA分析，鸡蛋卵黄内即有抗体产生，初次免疫后31 d效价可达1∶1 600。双抗体夹心ELISA结果显示纯化后的IgY有较高的敏感性，可检测到的SEA达2.4 ng/ml。 结论 制备的抗SEA鸡卵黄抗体的特异性和敏感性均较高。     

日本血吸虫卵对小鼠溃疡性结肠炎保护机制的探讨

目的探讨日本血吸虫卵对小鼠溃疡性结肠炎保护作用的免疫调节机制。方法以10 000个日本血吸虫卵经腹腔注射免疫小鼠4次,每次间隔1周,末次免疫后6 d用三硝基苯磺酸(TNBS)诱导结肠炎模型,观察虫卵免疫组和未免疫组小鼠的细胞因子和调节性T细胞(regulatory T cells,Tregs)亚群CD4+CD25+Foxp3+水平的变化。结果未经虫卵免疫的小鼠经TNBS诱导后结肠炎症状明显,细胞因子IFN-γ水平高达3.47±0.87 ng/ml,IL-4I、L-5和IL-10水平则较低分别为146.06±45.76 pg/ml,140.32±39.01 pg/ml,385.91±134.89 pg/ml;经虫卵免疫的结肠炎小鼠的炎症得到明显控制,IFN-γ表达被明显抑制其水平为1.53±0.51 ng/ml,IL-4I、L-5和IL-10水平显著升高分别为598.50±135.90 pg/ml,217.86±77.82 pg/ml,799.651±197.93 pg/ml。经虫卵免疫的结肠炎小鼠脾脏CD4+CD25+FoxP3+T细胞亚群比例为(3.55±0.81)%,显著高于未免疫组结肠炎小鼠的(2.31±0.39)%。结论日本血吸虫卵免疫对TNBS诱导的结肠炎小鼠具有保护作用,其保护性机制可能与CD4+CD25+FoxP3+T细胞对Th1过度反应的反馈性调节有关。     

慢性日本血吸虫感染对小鼠实验性1型糖尿病的影响

目的 探讨慢性日本血吸虫感染对小鼠实验性自身免疫性1型糖尿病发病的影响及其机制。方法 19只雄性BALB／c小鼠随机分为3组：日本血吸虫感染＋糖尿病造模组（A组，7只），糖尿病模型组（B组，6只）和正常对照组（C组，6只）。A组每只小鼠感染25条日本血吸虫尾蚴后9周，与B组小鼠同时腹腔注射链脲佐菌素诱导1型糖尿病，动态观察血糖变化。至12周末剖杀小鼠，留取血清，取胰腺组织切片HE染色，进行胰岛炎评分，用ELISA测定血清干扰素-γ（IFN-γ）、白细胞介素-4（IL-4）水平。结果 给药后，小鼠血糖逐渐升高，在第21d、28d两个时间点B组显著高于A组（P〈O．05）；A组〈40％的胰岛可见淋巴细胞浸润，B组有80％的胰岛可见淋巴细胞浸润，两者比较差异有显著性（P〈O．01）；至感染12周末，A组小鼠血清IL一4水平显著高于B组（P〈O．01）；B组小鼠血清IFN-γ水平显著高于A组（P〈O．05）和C组（P〈O．01）。结论 慢性日本血吸虫感染对小鼠实验性1型糖尿病具有拮抗作用，其机制与Thl／Th2免疫偏移有关。     

日本血吸虫卵抗TNBS诱导的小鼠结肠炎的观察

目的 探讨日本血吸虫卵对2,4,6 三硝基苯磺酸（TNBS）诱导的小鼠结肠炎的抑制作用。 方法 50只6～8周龄BALB/c 雌性小鼠随机分为正常对照组、乙醇对照组、虫卵对照组、结肠炎组和虫卵免疫结肠炎组，10只/组。虫卵免疫结肠炎组以日本血吸虫卵经腹腔注射免疫小鼠 4次，10 000个卵/鼠，每次间隔1周，末次免疫后6 d用TNBS诱导结肠炎模型。观察对照组和实验组小鼠的体重、结肠病理改变及细胞因子水平的变化。 结果 结肠炎组小鼠经TNBS诱导后，出现明显的粘液血便、体重下降、结肠充血水肿，肠黏膜呈现严重炎性浸润伴溃疡，IFN-γ水平为（3.47±0.87） ng/ml，IL-4水平为（146.06±45.76） pg/ml。虫卵免疫结肠炎组小鼠症状较轻，体重恢复较快，IFN-γ表达被明显抑制，其水平为（1.53±0.51） ng/ml，IL-4水平显著升高至（598.50±135.90） pg/ml。 结论 日本血吸虫卵对TNBS诱导的BALB/c小鼠结肠炎具有抑制作用。