CD44在胃癌患者及胃癌细胞系中的表达及意义

目的探讨CD44在胃癌患者组织及其胃癌细胞系中的表达水平,并分析其与临床病理参数的关系。方法收集60例胃癌患者手术切除的癌组织及癌旁组织,常规培养胃癌细胞系BGC-823和SGC-7901,用免疫组织化学染色及免疫荧光染色检测其CD44的表达水平,并分析其与临床病理参数的关系,体外划痕实验检测不同CD44表达水平的胃癌细胞系的迁移能力。结果 60例胃癌患者癌组织中CD44阳性表达率为81.6%(49/60),与癌旁组织26.7%(16/60)比较,差异有统计学意义(χ2=36.55,P0.05),且CD44表达水平与患者的临床分期、肿瘤浸润深度、淋巴结转移有关(P均0.05);荧光免疫染色结果表明,CD44蛋白在BGC-823细胞中的荧光强度高于SGC-7901细胞;体外划痕实验结果证实,CD44表达水平较高的BGC-823细胞的迁移能力明显高于SGC-7901细胞。结论 CD44在胃癌患者癌组织及胃癌细胞系中的表达水平较高,可作为胃癌迁移能力判断及临床预后分析指标。     

高尔基蛋白73、甲胎蛋白异质体3、甲胎蛋白和α-L-岩藻糖苷酶在肝脏疾病中的诊断价值

目的比较高尔基蛋白73(GP73)、甲胎蛋白异质体3(AFP-L3)、甲胎蛋白(AFP)和α-L-岩藻糖苷酶(AFU)在不同肝脏疾病患者中的意义及其单项或联合检测诊断肝癌的价值。方法对2013年1-12月收治的272例肝癌患者、203例肝硬化患者、248例慢性肝炎患者及210例健康体检者血清中的GP73、AFP-L3、AFP和AFU水平进行检测。非正态分布的数据多组间比较采用Kruskal-Wallis H检验,组间两两比较采用Mann-Whitney U检验,率的比较用卡方检验。ROC曲线绘制分别以健康人组和非肝癌组(健康体检、慢性肝炎、肝硬化)为对照。联合指标先进行Logistic拟合后再做ROC曲线。结果 GP73水平肝硬化组[177.0(116.0,247.0)ng/ml]较肝癌组[141.0(83.3,218.8)ng/ml])和慢性肝炎组[151.0(83.0,235.3)ng/ml]高(U=22 116.5、21 052.0,P均0.05);AFP-L3和AFP在肝癌组中的水平[11.3(4.3,21.2)%,78.4(7.1,2455.8)ng/ml]明显高于肝硬化组[6.0(4.0,8.0)%,10.0(3.8,49.5)ng/ml]和慢性肝炎组[7.0(5.0,9.0)%,18.8(4.4,79.6)ng/ml](P均0.05)。以健康人血清样本为对照绘制的诊断肝癌的ROC曲线,GP73、AFP-L3、AFP和AFU的ROC曲线下面积(AUC)分别为0.827、0.817、0.901和0.680。由此可知在鉴别健康人和肝癌患者方面,前3者比AFU有较高的准确性。以非肝癌患者血清样本为对照绘制的诊断肝癌的ROC曲线,4个指标对应的AUC分别为0.573、0.734、0.753和0.552,可见AFP-L3和AFP对于诊断肝癌有一定的准确性,其敏感性和特异性达到最大时的cut off值依次为8.55%(56.6%,84.9%),49.88 ng/ml(57.7%,80.9%)。结论 GP73的上升与肝损伤及长期纤维化有关,其在诊断肝脏疾病中有较好的敏感性,AFP-L3和AFP在诊断肝癌方面特异性较好,AFP-L3和AFP两者联合应用可提高肝癌的诊断敏感性至62.1%。     

凝集素亲和层析分析血清GGT寡糖链结构

目的用凝集素亲和层析法,探讨血清GGT在各种肝病时其寡糖链的变化,寻找出肝癌特异性GGT寡糖链结构,为进一步建立简易、特异的小柱亲和层析法分离肝癌特异性GGT奠定基础.方法以唾液酸酶水解GGT糖链末端的唾液酸,再用DSA和ConA亲和层析柱对各种肝病患者血清GGT进行洗脱,结合两种凝集素结合糖链的特性,分析其糖链结构.结果血清经唾液酸酶水解,再用两种凝集素亲和层析后,发现肝病患者GGT糖链结构均有所变化.N糖链天线数肝癌＞良性肝病＞正常人,糖链末端唾液酸量肝癌＞良性肝病＞正常人.肝癌病人出现和DSA强结合组分,该组分不被ConA结合.结论肝癌病人血清GGT可出现和DSA强结合的三天线或四天线N糖链,可利用这一特点建立检测肝癌特异性GGT的凝集素亲和小柱层析法.     

人肝癌组织特异性γ-谷氨酰转移酶分离纯化

目的:分离纯化人肝癌组织中特异性γ-谷氨酰转移酶(GGT),为进一步制备其抗血清提供抗原材料,以便对肝癌早期诊断进行研究。方法:人肝癌组织经匀浆、离心、溶解、透析、凝胶层析及凝集素亲和层析等步骤进行分离纯化;纯化过程用IFCC推荐方法监测GGT催化活性,紫外法监测蛋白质出峰图谱,Lowry法测定蛋白含量。结果:经过粗提、DEAE阴离子交换层析、凝胶过滤层析及凝集素亲和层析等纯化步骤得到电泳纯的GGT,其比活为10.58U/mg蛋白,纯化倍数为84.9,得率为1.60%。结论:该方法能够较好地分离纯化人肝癌组织中特异性GGT。     

肝病患者血清总胆汁酸水平测定及其判断意义

血清总胆汁酸（ＴＢＡ）是胆甾醇在肝内分解以及在肠肝循环中的一组代谢产物，其变化灵敏地反映肝实质损伤程度［１～５］，特别是在慢性肝病时［３，５］。现将２２９例肝病患者的测定结果分析报告如下。１对象与方法１．１以符合１９９５年北京第五次全国肝炎会议诊断标...     

磁性纳米颗粒Fe34@SiO2的制备及在全血DNA提取中的应用

摘要：目的：自制Fe₃₄@SiO₂磁性纳米颗粒并评价在全血样本中DNA提取效果,进一步研究开发磁珠法检测HBV DNA的技术。 方法：采用溶剂热法自制Fe₃₄磁性纳米颗粒,并用表面化学修饰法制备Fe₃₄@SiO₂磁性复合颗粒;利用该颗粒经吸附、洗涤、洗脱等步骤提取全血样本中DNA,并通过电泳、PCR扩增等传统技术检测DNA提取效果,与煮沸法提取血清DNA样本的效果进行对比。 结果：成功制备出直径约550 nm的Fe₃₄@SiO₂磁性纳米颗粒,该颗粒分散均匀;自制的磁性纳米颗粒可用于全血DNA提取与纯化,实验操作简便。自制磁性纳米颗粒提取全血DNA浓度为150.56 ng/μL,纯度为1.53;该提取方法与传统煮沸裂解法对96份样本进行对照研究,证实其灵敏度有较大提高。 结论：利用自制的Fe₃₄@SiO₂磁性纳米颗粒和合适的缓冲液体系,可成功地提取纯度较高的DNA,通过PCR扩增及对比实验表明,该磁性纳米颗粒及其提取工艺经优化后,可用于传染病的体外分子诊断研究。     

298例医务人员血清冠状病毒抗体阳性率的调查及意义

始于2002年11月,在我国广东地区首先出现的非典型肺炎,后被WHO定义为严重急性呼吸综合征(SevereAcute Respiratory Syndrome,SARS),为一种新出现的传染病,经11个国家和地区13个实验室确定其SARS的元凶为冠状病毒的变异株(SARS Coronavirus,SARS-CoV)。我们采用北京华大吉比爱生物技术有限公司生产的SARS-CoV抗体试剂盒,对我院医务人员进行了SARS抗体水平的检测,现将结果报告如下。     

HIV感染者和AIDS患者及正常人CD_4与CD_8细胞计数对照研究

目的研究正常人与艾滋病（AIDS）患者、人类免疫缺陷病毒（HIV）感染者之间免疫指标CD4细胞计数、CD8细胞计数及CD4/CD8比值的差异。方法使用BD公司CD4T细胞检测试剂对我院体检的43份正常人全血样本（正常组）,与随访检查的199例HIV感染者（感染组）及49例AIDS患者（患者组）的全血样本进行检测。结果正常组与患者组及感染组CD4细胞计数、CD8细胞计数、CD4/CD8比值之间差异有统计学意义（P〈0.05）,患者组、感染组CD4细胞计数、CD4/CD8比值显著低于正常组（P〈0.05）,CD8细胞计数显著高于正常组（P〈0.05）;患者组与感染组CD4细胞计数、CD4/CD8比值、CD8细胞计数差异无统计学意义（P〉0.05）。结论 HIV感染者、AIDS患者的CD4细胞计数、CD4/CD8细胞计数降低,而CD8细胞计数升高。     

血清甘氨酰脯氨酸二肽氨基肽酶连续监测法测定

血清甘氨酰脯氨酸二肽氨基肽酶连续监测法测定南京市钟阜医院（２１０００３）王念跃，常伟甘氨酰脯氨酸二肽氨基肽酶（Ｇｌｙｃｙｌｐｒｏｌｉｎｅｄｉｐｅｐｔｉｄｙｌａｍｉｎｏｐｅｐｔｉｄａｓｅ，ＧＰＤＡＥＣ３·４·１·４５）１９６６年首次被发现［１］。生化特...