16S-23S rDNA内转录间隔区序列寡核苷酸探针鉴定分支杆菌菌种的研究

目的研究以16S-23S rDNA内转录间隔区(intemal transcribed spacer,ITS)序列为靶基因设计分支杆菌菌种寡核苷酸探针,应用PCR-反向杂交技术快速鉴定分支杆菌菌种.方法应用PCR-反向杂交技术检测26种36株分支杆菌标准株,24株分支杆菌临床分离株.结果分支杆菌标准株和临床分离株经PCR扩增,依菌种不同可见一条约340bp～450bp范围DNA片段.探针特异性试验表明,21种寡核苷酸探针除草分支杆菌探针MPH与微黄分支杆菌亦杂交外,其余探针均为特异的.5株结核分支杆菌临床分离株鉴定为结核分支杆菌复合群,19株非结核分支杆菌临床分离株鉴定至种水平.结论 16S-23S rDNA ITS PCR-反向杂交鉴定分支杆菌菌种简便、快速、准确,具有较高应用价值.     

布氏菌素纯蛋白衍生物的研制

用三氯醋酸（ＴＣＡ）及硫酸铵（ＡＳ）综合法从布氏菌菌液中制备了纯化的新型布氏菌素－布氏菌纯蛋白的衍生物，简称“Ｂｒ－ＰＰＤ”。多次动物试验证明，Ｂｒ－ＰＰＤ具有良好的变态反应原性，用ＢｒＳ２菌株制备了３批Ｂｒ－ＰＰＤ。特异性蛋白含量均在９５％以上，多糖，核酸含量均在３％以上，经Ｂｒ－ＰＰＤ与参考标准品标化后，其特异性和敏感性基本不一致，两者反应曲线无显著差异，其它试验均达到Ｂｒ－ＰＰＤ生产规程要求