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人白细胞介素2基因在大肠杆菌中表达水平的提高及产物初步纯化 总被引:1,自引:1,他引:0
利用双Tac启动子和改造后的人白细胞介素2(IL-2)cDNA,提高了IL-2在大肠杆菌(E.coli)中的表达水平,并经包涵体制备、分子重新折叠及分子筛层析等技术,对表达的IL-2进行了提取、活性恢复与纯化,纯度可达95%。本工作为用基因工程方法生产人IL-2积累了经验。 相似文献
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大肠杆菌-分支杆菌穿梭表达质粒的构建及外源基因人白细胞介素-2在大肠杆菌和卡介苗中的表达 总被引:1,自引:0,他引:1
目的构建和鉴定大肠杆菌-分支杆菌穿梭表达质粒,检测外源基因在大肠杆菌和卡介苗(BCG)中的稳定表达。方法采用基因工程技术构建大肠杆菌-分支杆菌穿梭表达质粒,用电穿孔法将重组质粒PZSII-I转化BCG,用酶联免疫吸附法(ELISA)和SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定外源基因白细胞介素-2(IL-2)在BCG和大肠杆菌中的表达。结果外源基因人IL-2基因能在大肠杆菌和BCG中稳定表达,并能从BCG中分泌到胞外。结论构建的BCG重组体,能表达和分泌人IL-2。BCGHSP65启动子表达质粒能启动外源基因在BCG和大肠杆菌中的表达,同时使外源基因分泌至BCG之外,但不能分泌至大肠杆菌之外。 相似文献
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某些氨基酸及氨基酸的衍生物在中枢神经系统的调节中起重要作用,测定人体脑脊液(CSF)游离氨基酸(AAs)对神经系统疾病的诊斯及发病机理研究具有重要意义。 国内有关此项测定报导甚少,张宗昊等研究惊厥和癫痫时测定了CSF中5种AAs介质,牛磺酸、甘氨酸与国外报导值接近,天冬氨酸、谷氨酸等有一定差异。 我们用离子交换色谱法测定了21例非神经系统疾病患者及34例癫痫病人CSF中AAs浓度。本文侧重报导此项测定方法的建立与评价:提供癫痫病人CSF中AAs浓度变化数据,为该病的临床诊断及机理研究提供一定科学依据。 有关癫痫病氨基酸等神经递质的详细研究另文报导。 相似文献
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