左归丸与右归丸的药理研究进展

左归丸与右归丸是张仲景补肾名方,左归丸与右归丸均可调节下丘脑-垂体-靶腺轴,调控神经-内分泌-免疫网络系统,改善骨代谢,而左归丸还能促进骨髓形成肝细胞,从而调节肝再生。二者对机体多系统,多环节有调节作用。就近十年来二者的药理研究做一概述。     

MBP_(68-86)与MBP_(87-99)诱导实验性自身免疫性脑脊髓炎大鼠的轴突损伤修复及其机制研究

目的观察髓鞘碱性蛋白(myelin basic protein,MBP)68-86及MBP87-99诱导实验性自身免疫性脑脊髓炎(experimentalautoimmune encephalomyelitis,EAE)大鼠模型中淀粉样前体蛋白(amyloid precursor protein,APP)及生长相关蛋白(growth-associatedprotein,GAP)-43mRNA表达及其环磷酸腺苷(cyclic adenosine monophosphate,cAMP)-蛋白激酶(protein kinase,PKA)的变化,探讨EAE大鼠发病过程中轴突损伤修复及其可能的分子机制。方法应用不同肽段的MBP68-86或MBP87-99与不完全福氏佐剂及结核杆菌混合制成抗原,皮下注射于大鼠双后足垫,建立大鼠EAE模型。观察其神经功能评分、脑组织病理变化,酶联免疫测定大鼠脑组织cAMP含量,实时荧光定量RT-PCR法测定大鼠脑组织APP、GAP-43及PKA mRNA表达。结果与MBP87-99组大鼠比较,MBP68-86所致EAE病情进展快,神经功能评分较高,炎细胞浸润重并形成袖套状改变。中剂量MBP68-86免疫大鼠第14天,脑组织GAP-43 mRNA表达较正常组明显降低(P<0.05);第28天,APP mRNA表达明显升高(P<0.05)。MBP87-99免疫大鼠第28天,APP mRNA表达较正常组和小剂量MBP68-86明显上升(P<0.05);GAP-43 mRNA表达较大、小剂量MBP68-86明显升高(P<0.05)。大、小剂量MBP68-86与MBP87-99免疫大鼠第28天,脑组织cAMP水平均较正常组明显增高(P<0.01或P<0.05),中剂量MBP68-86与MBP87-99组大鼠脑组织PKA mRNA表达明显升高(P<0.01)。结论 MBP68-86或MBP87-99均可诱导Lewis大鼠产生EAE。可引起脑组织的炎性细胞浸润、脱髓鞘及轴突损伤等,且损伤有一定的自我修复功能,其机制可能与调节cAMP-PKA信号途径有关。综合分析研究结果发现,MBP68-86中剂量(每只50μg)可作为探索EAE发病特点及药物观察的实验模型。     

中医药促进中枢神经再生的研究进展

大量的研究发现,某些单味中药或其有效成分及中药复方具有改善中枢神经轴突损伤后神经营养因子类物质(neurotrophin factors,NTFs)缺乏的微环境,促进神经再生相关蛋白的表达,从而促进神经干细胞(neural stem cell,NSC)分化成神经元,有助于神经轴突的再生。但目前中医药对中枢神经再生的研究领域较局限,主要集中在脑缺血缺氧导致的神经损伤方面,而且对中医药的作用机制研究不够深入和系统,今后应深入开展中医药促进中枢神经再生的机制研究,为其临床应用提供客观依据。     

左归丸与右归丸对EAE大鼠APP及GAP-43表达的影响

目的 观察左归丸和右归丸对实验性变态反应性脑脊髓炎(EAE)大鼠淀粉样前体蛋白(APP)及生长相关蛋白[GAP-43)表达的影响,探讨滋阴与温阳补肾法治疗EAE的可能机制.方法 应用髓鞘碱性蛋白(MBP)68-86免疫诱导Lewis大鼠建立EAE模型.免疫后第7天、第14天、第28天取大鼠脑白质与脊髓,采用Western-blot和实时荧光定量RT-PCR技术检测APP及GAP-43蛋白及mRNA的表达.结果 免疫后第7天,激素和左归丸均能升高EAE大鼠脊髓中APP和脑白质中APP mRNA的过低表达(P<0.05或P<0.01),且在脊髓中二者对APP的调节优于右归丸(P<0.05);第14天,左归丸显著调节脑白质中APP mRNA的过高表达、脊髓中APP mRNA的过低表达(P<0.05或P<0.01),作用优于右归丸(P<0.05).免疫后第7天,激素与左归丸显著上调EAE大鼠脑白质和脊髓中GAP-43水平(P<0.05或P<0.01),在脊髓中二者作用优于右归丸(P<0.01),右归丸显著下调脑白质中GAP-43 mRNA的表达(P<0.05);第14天,激素与左归丸显著抑制脑白质中GAP-43的过高表达(P<0.05);第28天,激素组与左归丸组脑白质中GAP-43水平低于模型组与右归丸组(P<0.01).结论 左右归丸对EAE大鼠脑白质和脊髓中APP和GAP-43蛋白与基因的表达均具有一定调节作用,且左归丸的作用明显优于右归丸.     

二黄胶囊对实验性自身免疫性脑脊髓炎小鼠细胞免疫的影响

目的观察二黄胶囊对实验性自身免疫性脑脊髓炎小鼠(EAE)细胞免疫的影响。方法皮下注射髓鞘少突胶质细胞糖蛋白35-55(MOG35-55)与完全弗氏佐剂(CFA)混合的抗原,辅以腹腔注射百日咳毒素(PTX),建立EAE模型。造模后每天记录各组小鼠体质量及神经功能评分;用流式细胞仪检测小鼠外周血T淋巴细胞亚群及自然杀伤(NK)细胞;采用HE染色进行脑组织病理学观察。结果模型组小鼠造模后第9天陆续发病,第22天达到高峰,发病急性期(造模后第25天)T淋巴细胞亚群CD3+、CD4+明显比正常组增高(P<0.01),CD4/CD8比值也有所升高(P<0.05);发病缓解期(造模后第40天)T淋巴细胞亚群CD8+和NK细胞明显下降(P<0.05);病理检查发现EAE小鼠脑组织神经元细胞核固缩,小静脉周围炎性细胞浸润形成袖套样改变。二黄胶囊治疗后,EAE小鼠神经功能评分比模型组明显降低(P<0.05),脑组织炎性浸润程度减轻,发病急性期外周血T淋巴细胞亚群CD4+/CD8+比值显著降低(P<0.01);恢复期T淋巴细胞亚群(CD3+、CD8+)及NK细胞明显增加(P<0.05)。结论二黄胶囊可在EAE小鼠发病的不同时期通过调节T淋巴细胞亚群(CD3+,CD4+,CD8+,CD4+/CD8+)及NK细胞而起到防治EAE作用。     

中西医结合诊治老年人骨质疏松性骨折的研究进展

本文从理论和中西医结合临床研究方面,对老年人骨质疏松性骨折的病名、病因病机、中药辨证论治、内服外治等疗法进行了总结.中西医结合疗法比单纯西医治疗本病具有治愈率高,临床症状改善快,治疗时间短等优势,在临床中取得了较为满意的疗效.但是还存在一些疗效标准不一致,疗效观察时间不同,分期辨证不明确等问题,有待进一步改进.     

补肾方对实验性自身免疫性脑脊髓炎小鼠T辅助细胞1,17和 调节性T细胞的影响

目的:观察六味地黄丸和金匮肾气丸对实验性自身免疫性脑脊髓炎(experimental autoimmune encephalomyelitis,EAE)小鼠脑组织中肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor,TNF-α)、转化生长因子-β(transforming growth factor,TGF)-β及白细胞介素(interleukin,IL-17)的调节作用。方法:小鼠皮下多点注射髓鞘少突胶质细胞糖蛋白(myelin oligodendrocyteglycoprotein,MOG)35-55与完全弗氏佐剂(complete Freund’s adjuvant,CFA)的混合抗原,辅以ip百日咳毒素(pertussis toxin,PTX),建立EAE模型。免疫后第12,25,40天取小鼠脑组织,采用免疫组织化学染色法观察各组小鼠脑中TNF-α,TGF-β,IL-17的变化。结果:免疫后第25天,模型组小鼠脑中TNF-α蛋白表达明显高于正常组(P<0.01),而六味地黄丸和金匮肾气丸组则明显低于模型组(P<0.01)。模型组小鼠脑中TGF-β蛋白表达在第40天时明显低于正常组(P<0.01),而各治疗组明显高于模型组(P<0.05或P<0.01),其中六味地黄丸和金匮肾气丸组还显著高于激素组(P<0.05或P<0.01)。模型组小鼠脑中IL-17蛋白表达在第25,40天时均高于正常组(P<0.01),而六味地黄丸和金匮肾气丸组明显低于模型组(P<0.01),并优于激素组(P<0.05)。模型组小鼠脑中TNF-α/TGF-β和IL-17/TGF-β比值在第40天时明显高于正常组(P<0.01),而各治疗组均低于模型组(P<0.01)。结论:六味地黄丸和金匮肾气丸能够调节EAE小鼠中紊乱的TNF-α,TGF-β,IL-17细胞因子,推测可能是其改善EAE病情的机制之一。二方在调节细胞因子的作用方面优于醋酸泼尼松。     

肾虚证择时用药的研究进展

近年来,随着时间医学的长足发展,人们也从时间医学角度对中医之“肾”进行了大量研究。本文主要从中医学择时用药的理论根据、肾虚证的时间节律及补肾择时用药的临床和实验研究等三个方面,对肾虚证择时用药的研究进展做一综述。     

六味地黄丸和金匮肾气丸对实验性自身免疫性脑脊髓炎小鼠脑和脊髓中CD4＋、CD8＋的影响

目的 观察六味地黄丸和金匮肾气丸对实验性自身免疫性脑脊髓炎（experimental autoimmune encephalomyelitis,EAE）小鼠脑和脊髓中淋巴细胞亚群CD4＋、CD8＋的影响.方法 皮下注射抗原,建立EAE模型.取脑和脊髓,HE染色后进行病理观察;用免疫组化法检测小鼠脑和脊髓组织中CD4＋、CD8＋;结果 六味地黄丸组和金匮肾气丸组明显减轻病灶区域的炎性细胞浸润,对CD4＋和CD8＋及CD4＋/CD8＋均有一定的调节作用.结论 六味地黄丸和金匮肾气丸均有防治小鼠EAE的作用,其作用机制可能与调节细胞免疫系统有关.     

左归丸与右归丸对EAE大鼠APP及GAP-43表达的影响

目的观察左归丸和右归丸对实验性变态反应性脑脊髓炎（EAE）大鼠淀粉样前体蛋白（APP）及生长相关蛋白（GAP-43）表达的影响,探讨滋阴与温阳补肾法治疗EAE的可能机制。方法应用髓鞘碱性蛋白（MBP）68-86免疫诱导Lewis大鼠建立EAE模型。免疫后第7天、第14天、第28天取大鼠脑白质与脊髓,采用Western-blot和实时荧光定量RT-PCR技术检测APP及GAP-43蛋白及mRNA的表达。结果免疫后第7天,激素和左归丸均能升高EAE大鼠脊髓中APP和脑白质中APP mRNA的过低表达（P〈0.05或P〈0.01）,且在脊髓中二者对APP的调节优于右归丸（P〈0.05）;第14天,左归丸显著调节脑白质中APP mRNA的过高表达、脊髓中APP mRNA的过低表达（P〈0.05或P〈0.01）,作用优于右归丸（P〈0.05）。免疫后第7天,激素与左归丸显著上调EAE大鼠脑白质和脊髓中GAP-43水平（P〈0.05或P〈0.01）,在脊髓中二者作用优于右归丸（P〈0.01）,右归丸显著下调脑白质中GAP-43 mRNA的表达（P〈0.05）;第14天,激素与左归丸显著抑制脑白质中GAP-43的过高表达（P〈0.05）;第28天,激素组与左归丸组脑白质中GAP-43水平低于模型组与右归丸组（P〈0.01）。结论左右归丸对EAE大鼠脑白质和脊髓中APP和GAP-43蛋白与基因的表达均具有一定调节作用,且左归丸的作用明显优于右归丸。