嵌合抗CD20抗体片段F(ab'')2的表达及活性

目的 :为了简化生产步骤 ,提高抗体蛋白的生物活性 ,探索在工程菌体内直接进行抗CD2 0F(ab’) 2 的高效率分泌性表达。方法 :采用单因素考察法优化培养条件 ,使蛋白G柱和S2 0 0 HR分子筛柱分离纯化目的蛋白 ,用MTT法检测抗CD2 0F(ab’) 2 抑制Daudi细胞体外生长的活性。结果 :发现用论文所选定的最适培养条件 ,抗CD2 0F(ab’) 2 的产量有了明显提高 ,从1 9～ 2 .2mg L达到了 3 7～ 4 3mg L ,F(ab’) 2 在表达产物中所占的比例也从 9 7%～ 13 2 %提高到了 38 1%～ 4 6 8% ;使用S2 0 0 HR分子筛柱对蛋白G柱亲和纯化后的产物进一步分离纯化 ,可以使F(ab’) 2 的纯度达到 85 %以上 ;MTT法检测结果证明F(ab’) 2 抑制Daudi细胞生长的IC50 值为 14 6 μg ml,而Fab’为 39 5 μg ml。 结论 :实现了抗CD2 0F(ab’) 2 在工程菌体内的高效率分泌性表达 ,而且所表达的抗CD2 0F(ab’) 2 比抗CD2 0Fab’具有更强的抑制Daudi细胞体外生长的能力     

阿糖胞苷上调白血病细胞CD86分子及细胞因子表达的研究

目的:观察阿糖胞苷(Ara-C)对急性白血病细胞CD86分子表达的影响,并探讨其作用机制.方法:流式细胞术(FCM)检测U937、HL60、NB4细胞经Ara-C处理前后CD86分子表达变化,RT-PCR检测Ara-C对各组细胞CD86mRNA、NF-кB以及细胞因子IFN-γ的表达变化.结果:经Ara-C处理的急性白血病细胞CD86分子表达与对照组相比均明显升高(P<0.05);CD86 mRNA表达水平也明显增强;Ara-C处理后细胞核内NF-кB表达明显上调;并且IFN-γ mRNA在T细胞活化72 h可检测到.结论:Ara-C能使U937、HL60、NB4急性白血病细胞CD86表达增加,有利于NF-кB等转录因子活化,促进CD86转录增强、表达增加并可有效地增强肿瘤细胞的免疫原性,激活T细胞,B7-2在T细胞活化中起着更重要的作用.     

抗Pgp/抗CD3双特异双链抗体的生物学活性研究

目的　研究抗Pgp 抗CD3双特异双链抗体介导的特异性靶向杀伤活性。方法　采用亲和层析法分离纯化本室构建的抗Pgp 抗CD3双特异双链抗体可溶性表达产物 ,并用SDS PAGE、Westernblot及抗活细胞间接免疫荧光法鉴定纯化产物 ;采用51 Cr释放试验测定其介导的体外靶向杀伤活性。结果　纯化的抗Pgp 抗CD3双特异双链抗体具有与Jurkat细胞 (CD3 )和K5 6 2 A0 2 (Pgp )细胞结合的活性 ;抗Pgp 抗CD3双特异双链抗体具有介导激活的T淋巴细胞杀伤Pgp表达阳性的耐药肿瘤细胞的作用 ,杀伤作用的强弱显示出效靶比和剂量依赖关系 ,且可被CD3ScFv或PgpScFv特异性的阻断。结论　抗Pgp 抗CD3微型双功能抗体有望成为治疗耐药肿瘤 ,特别是肿瘤残留灶和微小转移灶的治疗的一种新策略。     

自拟宣痹汤治疗痹证80例疗效观察

自拟“宣痹汤”治疗痹证80例，取得良好效果，总有效率达88．7％．     

B细胞性血液肿瘤的多药耐药逆转

B淋巴细胞的增殖与分化异常与急慢性淋巴细胞性白血病及淋巴瘤等血液系统恶性肿瘤密切相关，目前该类疾病主要治疗措施之一是化疗，但B细胞对化疗药物产生多药耐药(MDR)已成为限制疗效的关键因素。近年研究证实，利用耐药逆转剂、基因治疗及免疫治疗可不同程度逆转MDR。     

樟芝的研究及其应用现状

目的:介绍中国台湾产新菌种樟芝的生物学特性,人工培育方法,化学成分及其生理活性,开发现状及其展望.方法:采用固体栽培法和深层液体培养法进行樟芝的人工培育,提取其有效成分进行抗氧化、免疫增强、护肝、抗肿瘤等试验.结果:樟芝在固体和液体培养基中均得到了良好地生长,深层液体培养缩短了培养周期,有效成分以多糖体、三萜类、固醇类、抗氧化物质为主,其子实体、菌丝体和液体培养的过滤液具有抗氧化、提高免疫力、护肝、抗肝炎、抗肿瘤、抗感染等多项生理活性,具有高效低毒的优点.结论:深层液体培养樟芝弥补了野生樟芝资源的严重不足,是值得推广的樟芝培育方法,樟芝野生和人工培育的子实体、菌丝体以及液体培养的过滤液可以加工制成具有抗肿瘤、抗肝炎、护肝、调节免疫、抗衰老、抗炎作用的保健食品和药品,具有很大的开发价值和应用前景.     

靛玉红衍生物PHⅡ-7通过抑制c-fos表达抗乳腺癌耐药株MCF-7/ADR增殖

目的:探讨靛玉红衍生物PHⅡ-7抗乳腺癌耐药株MCF-7/ADR增殖作用的初步机制。方法:MTT法检测PHⅡ-7的体外杀伤活性;RT-PCR法、Western blot法检测基因、蛋白表达水平;构建干扰c-fos的短发夹RNA真核表达载体,转染MCF-7/ADR细胞,并建立稳定转染的细胞系;采用细胞计数法绘制生长曲线探讨c-fos表达下调对乳腺癌细胞增殖的影响。结果:PHⅡ-7剂量依赖性地抑制乳腺癌敏感株MCF-7及耐药株MCF-7/ADR增殖;c-fos在耐药株MCF-7/ADR表达明显高于敏感株MCF-7;PHⅡ-7明显抑制c-fos的表达;shRNA显著抑制了c-fos蛋白表达,细胞增殖也被显著抑制。结论:靛玉红衍生物PHⅡ-7浓度依赖性地抑制乳腺癌耐药株MCF-7/ADR增殖,其作用可能与抑制原癌基因c-fos有关。     

帕金森病多模态磁共振成像和基于图论的复杂网络分析法研究进展

帕金森病是临床常见的进行性神经变性病,主要由黑质致密部多巴胺能神经元变性缺失所致,目前已成为继肿瘤、心脑血管病后中老年人群的“第三杀手”.近年来多模态MRI(包括结构性和功能性MRI、扩散张量成像等)的发展和基于图论的复杂网络分析法的引入,为研究帕金森病患者脑结构和功能连接提供新的有效方法.本文对近年来基于多模态MRI和基于图论的复杂网络分析法所构建的结构性和功能性脑网络在帕金森病中的研究进展进行简要概述,以为该病的早期诊断提供新的影像学标记.     

RNA干扰ERCC1基因表达对卵巢癌顺铂敏感性的影响

目的研究ERCC1基因表达与卵巢癌顺铂耐药的关系。构建携带ERCC1基因小发夹干扰RNA的重组质粒表达载体,观察RNA干扰ERCC1基因表达对卵巢癌顺铂敏感性的影响。方法RT-PCR方法检测COC1、COC1/DDP细胞中ERCC1基因表达,基因重组技术构建携带ERCC1小发夹干扰RNA的重组质粒表达载体,脂质体法转染COC1/DDP细胞,RT-PCR及westernblot方法检测转染后细胞内ERCC1mRNA和蛋白的表达,MTT法检测转染后细胞对顺铂敏感性的改变。结果COC1/DDP细胞中ERCC1基因表达明显高于COC1细胞。重组质粒转染后,COC1/DDP细胞中ERCC1mRNA和蛋白表达显著下调。转染后细胞对顺铂的敏感性显著增加。结论COC1/DDP中ERCC1基因表达增强与卵巢癌顺铂耐药相关。RNA干扰抑制ERCC1基因表达能增加卵巢癌耐药细胞COC1/DDP对顺铂的敏感性。     

一类前包钦格复合体单房室模型的动力学分析

目的:呼吸节律的产生部位和原理一直是神经生物学研究领域中的热门课题。近年来的研究表明,延髓中一个被称为前包钦格复合体(Pre-B觟tzinger complex,PBC)的区域在哺乳动物呼吸节律的产生中起着关键作用。方法:本文通过对一类前包钦格复合体神经元的单房室模型的研究,使用Matlab软件对非线性微分方程进行神经元单房室模型的构建,结合龙格库塔方法,从非线性动力学角度对模型的不同参数的一定范围的变化进行数值分析,考察其蕴含的动力学特性。结果:通过改变单房室模型的不同电生理参数,如离子平衡电位、电容、电导等,得到模型中的全发放、簇发放或者混沌状态,尤其是通过同时调整持续钠电导和依赖钙离子的内质网通道蛋白浓度,可得到明显的加周期和倍周期分岔现象。结论:结合膜电位发放图和峰峰间距图对模型的非线性动力学特性进行分析,并由模型数值分析结果探讨其信号传递和节律编码的规律,为呼吸节律的调控机制提供线索,也为进一步揭示呼吸节律的产生机理提供了重要的参考价值。