p53基因在亚砷酸钠致人胚胎肺成纤维细胞凋亡中的作用

目的 探讨p53、Bax、bcl-2基因在亚砷酸钠(NaAs02)致人胚胎肺成纤维细胞(HELF)凋亡中的作用.方法 分别取转染了p53质粒HELF细胞(p53组)、转染了PC质粒的HELF细胞(PC组)、常规培养的HELF细胞(正常组),在6孔板中培养48 h后,分别加入0、3、9、15 mmoL/L NaAsO2溶液,培养24 h后,用real-time PCR法检测p53、Bax、bcl-2 mRNA基因表达水平,采用免疫组织化学SABC法检测p53、Bax、bcl-2基因蛋白表达水平;用流式细胞仪检测细胞凋亡情况.结果 p53组细胞p53基因mRNA表达水平(0.51±0.29)低于PC组及正常组[(1.32±0.26),(1.00±0.20),P均<0.05],p53组p53基因蛋白表达水平[(4.10±1.20)%]低于PC组和正常组[(8.00±1.63)%、(7.90±1.79)%,P均<0.05];p53组、PC组、正常组在染砷0、3、9、15 mmol/L时,细胞凋亡率[(0.57±0.28)%、(22.91±4.86)%、(40.05±3.93)%、(44.87±3.58)%,(0.65±0.24)%、(14.09±3.49)%、(20.31±3.66)%、(32.42±3.63)%,(0.56±0.25)%、(12.14±3.70)%、(19.61±3.63)%、(30.43±2.83)%]、Bax mRNA表达水平[(12.73±3.96)、(25.12±6.42)、(104.96±26.77)、(154.04±3052),(14.63±3.57)、(36.75±3.67)、(272.26±66.11)、(846.12±243.36),(14.75±5.65)、(37.22±11.27)、(278.51±37.42)、(861.67±369.29)]、Bax蛋白表达水平[(15.07±0.83)%、(23.79±3.99)%、(3851±158)%、(53.86±124)%,(15.43±1.45)%、(36.11±1.37)%、(56.86±1.97)%、(76.09±2.01)%,(15.20±1.03)%、(35.25±1.09)%、(55.56±2.17)%、(74.48±2.85)%]均随着染毒剂量的增加而增高(P均<0.05),而bcl-2 mRNA表达水平[(443.00±244.47)、(156.79±53.18)、(62.13±13.66)、(23.10±6.44),(420.55±110.77)、(48.15±10.02)、(14.91±6.53)、(7.54±2.62),(577.75±123.22)、(49.68±10.11)、(12.41±1.28)、(7.22±1.89)]、bcl-2蛋白表达水平[(47.20±3.77)%、(41.80±2.94)%、(36.00±2.36)%、(29.00±2.91)%,(45.90±4.15)%、(35.70±2.77)%、(29.80±2.78)%、(24.80±2.66)%,(46.70±3.47)%、(36.20±2.90)%、(30.10±3.21)%、(25.10±2.28)%]均随着染毒剂量的增加而降低(P均<0.05);在染砷3、9、15 mmol/L时,p53组的细胞凋亡率、bcl-2 mRNA表达水平、bcl-2蛋白表达水平均高于同一染砷剂量的正常组和PC组(P均<0.05),而Bax mRNA表达水平、Bax基因蛋白表达水平均低于同一染砷剂量的正常组和PC组(P均<0.05).结论 p53基因减少了NaAsO2致HELF的凋亡,可能是通过改变部分凋亡途径实现.     

多药耐药相关蛋白1与人肝细胞耐砷性关系的研究

目的探讨多药耐药相关蛋白1（MRP1）与人肝细胞（L-02）耐砷性之间的关系。方法采用人肝细胞L-02细胞株,噻唑兰法（MTT）进行24h急性NaAsO2毒性试验,选择细胞生存率在90％～95％时的NaAsO2浓度为诱导浓度,同时设1组不加砷诱导的L-02细胞作为同步对照。置于细胞培养箱中37℃,5％CO2常规培养6周,定期换液传代,每周用MTT法计算半数致死浓度（LC50）及细胞的生存率;6周后,将加砷诱导的L-02肝细胞与同步对照细胞在培养基中培养至细胞80％融合,然后进行24h急性砷毒性试验（NaAsO2终浓度为0、2．5、5．0、10μmol／L）;采用real-time PCR检测细胞内MRP1mRNA的表达情况;MTT法检测细胞的存活率;石墨炉原子吸收光谱法检测各组细胞内总砷浓度。结果实验组细胞MRP1mRNA的表达明显高于对照组（P〈0．05）;24h急性砷毒性试验中,实验组不同砷浓度下细胞生存率和LC50明显高于对照组（均P〈0．001）;实验组细胞内总砷浓度明显较同步对照组低（P〈0．001）。结论L-02肝细胞具有可诱导的对砷的耐受性,其耐砷性与MRP1高表达有关。     

锰接触工人神经行为改变与Parkin基因4号外显子多态性的关系

目的 探讨锰接触工人神经行为改变与Parkin基因4号外显子S/N167多态性的相关性.方法 选工龄在半年以上的职业性锰暴露工人200名和劳动强度相似,但工作环境不接触锰工人94名,按累积暴露指数将其分为高、低暴露组和对照组.利用沟槽稳定试验和拼板试验进行神经行为改变检测;利用PCR-RFLP法对Parkin基因4号外...     

FISH法对肺腺癌穿刺标本EML4-ALK融合基因的检测

目的 探讨采用肺腺癌穿刺活检标本检测棘皮动物微管相关类蛋白4(EML4)与间变性淋巴瘤激酶(ALK)融合基因(EML4-ALK)的可行性.方法 对20例肺腺癌经皮肺穿刺标本应用荧光原位杂交(FISH)法检测EML4-ALK融合基因.结果 20例标本中,19例通过FISH检测成功,检测成功率为95.00％.其中阳性2例,阳性率为10.00％.结论 肺腺癌穿刺活检标本可用作检测EML4-ALK融合基因,为靶向治疗提供参考依据.     

乳腺浸润性导管癌中EGFR蛋白的表达及分析

目的探讨乳腺浸润性导管癌中EGFR蛋白表达及其与临床病理的关系。方法应用免疫组化MaxVinsonTM法检测乳腺浸润性导管癌和癌旁正常组织中EGFR蛋白的表达。结果乳腺浸润性癌中EGFR的阳性表达率为65.0%,癌旁正常组织中的阳性表达率为20.0%,组间比较差异具有显著性(P<0.05),阳性表达率与淋巴结转移有关(P<0.01)。结论EGFR可能与乳腺浸润性导管癌的发生、分化和预后有关,可以为靶向治疗提供参考依据。     

亚砷酸钠对人肝细胞增殖的影响

目的探讨亚砷酸钠（NaAsO2）对人肝细胞（L-02）增殖作用的影响。方法以体外培养的L—02细胞株为对象,采用噻唑兰法（MTT）测定不同浓度的NaAsO2处理后L-02细胞的增殖情况。结果与对照组比较,2．5mmol／L剂量组细胞存活率显著增高,而5mmol／L、10mmol／L剂量组组细胞存活率降低（均P〈0．01）。结论NaAsO2对L-02肝细胞增殖的影响呈双向调节的促增殖作用,即低浓度NaAsO2可促进L-02细胞的增殖,高浓度可抑制L—02细胞的增殖活力,表现出毒物兴奋效应。     

NSCLC患者血清中PTBP1、CDCP1的表达及临床预后意义

目的 探讨非小细胞肺癌(NSCLC)患者血清中多聚嘧啶束结合蛋白1(PTBP1)、含CUB结构域的蛋白质1(CDCP1)的表达及临床预后意义。方法 选取于贵州航天医院就诊的90例NSCLC患者为NSCLC组,以同期诊治的40例肺部良性疾病患者为良性疾病组,40例体检健康者为对照组。采用酶联免疫吸附试验检测各组血清PTBP1、CDCP1水平,并比较各组血清PTBP1、CDCP1水平差异,比较不同临床病理特征患者血清PTBP1、CDCP1水平差异。采用Pearson相关分析NSCLC组血清PTBP1与CDCP1水平的相关性,采用Kaplan-Meier生存曲线分析血清PTBP1、CDCP1水平对NSCLC患者生存预后的影响,采用单因素及多因素Cox回归分析影响NSCLC患者生存预后的因素。结果 NSCLC组血清PTBP1、CDCP1水平明显高于良性疾病组和对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。NSCLC组患者血清PTBP1与CDCP1水平呈正相关(r=0.721,P<0.001)。不同肿瘤分期、淋巴结转移患者血清PTBP1、CDCP1水平差异有统计学意义(P<0.0...     

免的临疫床组意化义法评估宫颈癌及宫颈上皮内瘤变组织中Survivin和mmp-9表达

目的 探索免疫组化法评估宫颈癌及宫颈上皮内瘤变组织中Survivin和mmp-9表达的临床意义。方法 回顾性分析的49例CIN患者(对照组)、31例宫颈癌患者(观察组)均在2016年3月至2021年3月期间收集,均采用免疫组化法评估mmp-9、Survivin阳性率和染色积分,比较各组mmp-9、Survivin阳性率及染色积分,经相关性分析不同病变类型与Survivin、mmp-9染色积分相关性以及两项指标之间相关性。结果 观察组Survivin阳性率64.52%、mmp-9阳性率77.42%、mmp-9染色积分(5.62±0.37)、Survivin染色积分(4.57±0.42)高于对照组患者(P<0.05)。CIN分级中,CINⅢ级mmp-9阳性率55.56%、Survivin阳性率44.44%、mmp-9染色积分(3.31±0.18)、Survivin染色积分(3.28±0.33)高于CINⅠ级(P<0.05)。不同临床分期、病理分级、淋巴结转移情况宫颈癌患者比较,Survivin、mmp-9阳性率存在差异性(P<0.05)。同时经Pearson法分析,Sur...     

锰铁合金男性冶炼工人接触生物标志物的探索

目的探寻职业性锰接触工人早期较敏感的接触生物检测指标。方法选择锰铁合金生产企业163名男职工作为暴露组(其中高浓度接触组85人,低浓度接触组78人);选择体力劳动强度相近的生铁冶炼厂男职工80人作为对照组。采用石墨炉原子吸收分光光度法测定研究人群生物样本中锰的含量,用火焰原子吸收分光光度法测定空气中锰。结果高剂量接触组唾液锰为32.32μg/L、血浆锰为29.96μg/L、血细胞中锰为15.12ng/g,明显高于低剂量接触组和对照组(P<0.01),而不同接触剂量组之间尿锰和发锰含量的差异没有统计学意义;在工龄<5a的接触人群中唾液和血细胞中锰的含量与环境锰浓度有很好的一致性,在工龄≥5a的接触人群中,虽然高剂量接触组的唾液、血浆和血细胞中的锰含量高于低剂量接触组,但增加的趋势低于工龄<5a的接触人群。结论由于唾液采集无创伤,唾液锰可作为锰接触工人早期生物标志物。