葛根素对LPS诱导急性脑损伤小鼠的保护作用

目的:研究葛根素(Pur)对脂多糖(LPS)诱导的小鼠急性感染性脑损伤的保护作用及机制。方法:36只清洁级雄性ICR小鼠随机分为正常对照组(NS)、LPS感染组(LPS)和葛根素组(Pur+LPS)。LPS腹腔注射建立急性脑损伤模型,立即腹腔注射给予葛根素注射液治疗,6和24h后旷场。暗场实验检测各组小鼠的自发活动,WesternBlot检测脑组织白细胞分化抗原14(CD14)和环氧化酶2(C0X-2)蛋白表达量,Nisl染色观察神经元存活情况。结果:与NS组相比,LPS组6和24 h旷场实验自主活动距离和穿格次数显著减少,海马神经元的存活数目显著减少,脑组织CD14和C0X-2蛋白表达量显著升高(P<0.05);与LPS组比较,Pur+LPS组6和24 h时海马神经元的存活率明显提高,且CD14和C0X-2蛋白表达量明显下降(P<0.05)。结论:葛根素注射液对LPS所致小鼠急性感染性脑损伤具有一定保护作用,其作用机制可能与抑制脑组织CD14和C0X-2表达有关。     

皮下注射与口服地塞米松诱发Balb／c小鼠卡氏肺孢子虫肺炎比较研究

目的：比较皮下注射和口服地塞米松建立Balb/c小鼠卡氏肺孢子虫肺炎（ PCP）模型的差异,探索2种方法的优劣。方法将雌性Balb/c小鼠随机分为地塞米松皮下注射组（注射组）、地塞米松口服组（口服组）和对照组。注射组采用每3天皮下注射地塞米松1次（0．5 mg/次,共16次）的方法诱发PCP;口服组经口灌服1 mg/L的地塞米松溶液1 ml,持续6周;对照1组注射等体积生理盐水;对照2组不给任何药物。结果注射组无死亡小鼠,51天后卡氏肺孢子虫（PC）总感染率为90％（27/30）;口服组2只小鼠死亡,63天后PC总感染率为67％（20/30）;2组比较差异有统计学意义（P＜0．05）。对照组未检出PC包囊。结论皮下注射和口服地塞米松方法均可成功建立Balb/c小鼠PCP动物模型。皮下注射方法与口服方法比较,具有感染率高、死亡率低、诱导时间短的优点。     

氯吡格雷联合氟伐他汀在脑梗死治疗中的临床效果观察

目的观察分析使用氯吡格雷与氟伐他汀联合治疗脑梗死患者的临床效果及意义。方法从我院2009年5月至2013年3月收治入院的脑梗死患者中抽取60例,随机分为观察组与对照组,对照组患者实施常规治疗,观察组患者在此基础上使用氯吡格雷联合氟伐他汀治疗,对比观察两组患者的临床疗效。结果观察组患者治疗总有效率明显高于对照组,各项血脂指标水平明显优于对照组,日常生活能力量表(ADL)及脑卒中量表(ESS)评分明显高于对照组,P<0.05,差异有统计学意义。结论对脑梗死患者使用氯吡格雷与氟伐他汀联合治疗,能够有效改善患者临床症状及日常生活能力,降低血脂,具有更为理想的临床效果。     

GSNO对人肺腺癌A549细胞的作用

目的：观察S-亚硝基谷胱甘肽(GSNO)对人肺腺癌A549细胞的作用,为GSNO作为药物来治疗肺癌提供依据。方法培养的A549细胞分别给予0.5、1.0、1.5、2.0、2.5 mmol/L GSNO 5个剂量,并分别培养24、48、72 h,应用CCK8试剂检测IC50;应用CCK8试剂检测二硫苏糖醇(DTT)逆转GSNO作用的给药时间点;应用原位凋亡荧光检测试剂盒检测GSNO给药组和GSNO联合DTT给药组中A549细胞的凋亡情况。结果 GSNO分别处理24、48、72 h后检测,结果IC50分别为18.174、2.020、1.836 mmol/L;在GSNO给予20、40 min后给予DTT,结果OD值显著提高(P<0.05),因而确定DTT给药时间点为GSNO给药后20 min;GSNO给药组显示凋亡细胞大量增加,GSNO联合DTT给药组则逆转了A549细胞的大量凋亡。结论 A549细胞凋亡可能是GSNO抑制细胞生长的一个重要机制,GSNO诱导的A549细胞凋亡可能与巯基-亚硝基化修饰作用有关。GSNO能促使A549细胞凋亡,该过程对于人肺腺癌的治疗具有明显的指导意义。     

田鼠巴贝西虫感染致宿主血小板活化初步研究

目的探讨BALB/c小鼠感染田鼠巴贝西虫后外周血中血小板活化情况及其与红细胞染虫率的关系。方法利用田鼠巴贝西虫红细胞染虫率为30%的种鼠抗凝血经腹腔注射感染BALB/c小鼠,感染后第1天开始采集BALB/c小鼠外周抗凝血,利用流式细胞术分别以白细胞分化抗原CD61(整合蛋白β3)和CD62P(P选择素)抗体标记,检测血小板和活化血小板数量;同时利用吉姆萨染色检测红细胞染虫率。采用Pearson相关性检验分析血小板活化率与红细胞染虫率的相关性。结果 BALB/c小鼠感染田鼠巴贝西虫后第2天其外周血中血小板的活化率开始升高,第3天最高,达(15.50±0.17)%,第4天开始下降,但无明显规律性;BALB/c小鼠在感染田鼠巴贝西虫后外周血中红细胞染虫率逐渐升高,第8天最高,达(63.10±3.43)%,之后逐渐下降。血小板活化率与红细胞染虫率比较差异无统计学意义(P=0.768)。结论田鼠巴贝西虫感染可引起宿主外周血中血小板的活化率升高,但与红细胞染虫率无显著相关性。     

溴氰菊酯对成年大鼠睾丸组织的毒性作用

目的为研究溴氰菊酯(deltamethrin,DM)对成年大鼠睾丸组织的毒性作用。方法将60只成年大鼠随机分为5组,即对照(玉米油)组和2.1、4.375、8.75、17.5 mg/kg DM染毒组,每组12只,连续灌胃染毒15 d。测定大鼠每日生精量和雄激素受体(AR)磷酸化蛋白水平,观察睾丸形态的变化。结果与对照组比较,8.75、17.5 mg/kg溴氰菊酯染毒组大鼠睾丸每日生精量均下降;各剂量溴氰菊酯染毒组大鼠睾丸组织中磷酸化AR蛋白表达水平和萎缩生精小管数均较高,生精小管数均减少,生精小管周长均缩短,差异有统计学意义(P0.05)。且随着溴氰菊酯染毒剂量的升高,大鼠睾丸每日生精量、生精小管数和生精小管周长呈逐渐下降的趋势,睾丸组织中磷酸化AR蛋白表达水平和萎缩生精小管数均呈上升趋势。结论 DM可通过提高AR磷酸化水平来抑制AR的活性,导致大鼠睾丸组织损伤及生精能力下降。     

感染广州管圆线虫小鼠脑组织的病理变化观察

目的 观察小鼠感染广州管圆线虫后脑组织的病理学改变。 方法 以广州管圆线虫Ⅲ期幼虫人工感染BALB/c小鼠48只，每鼠经口感染40条幼虫，在感染后第7、10、13、16、19、22、25和28天分别解剖6只小鼠。取脑组织，切片后HE染色，观察脑组织病理改变，计数脑组织内虫体。各组均设平行对照健康小鼠1只。 结果 小鼠感染广州管圆线虫Ⅲ期幼虫后，第10 天肉眼下可从小鼠脑组织中检获虫体，但数量较少，平均为（7±1.73）条;感染后第16天，检获虫体最多，平均为（23.66±4.93）条；随后随感染时间的延长而逐渐减少。小鼠感染第15天时出现明显的神经系统症状，多数小鼠在感染后第22天死亡。病理切片观察可见脑组织有机械性损伤，脑实质中可见空洞及炎症反应。脑膜及蛛网膜下腔可见虫体，第13天即可见脑膜炎症反应，并随感染时间延长而加重。 结论 小鼠感染广州管圆线虫Ⅲ期幼虫可引起脑组织病理改变，并随感染时间延长逐步加重。     

广州管圆线虫半胱氨酸蛋白酶抑制剂基因的克隆表达及免疫保护作用研究

目的对广州管圆线虫半胱氨酸蛋白酶抑制剂(cystatin)基因进行克隆、原核表达,并对表达产物的免疫保护作用作出初步鉴定。方法将广州管圆线虫cystatin基因克隆入载体pGEX-4T-1中,转化大肠杆菌BL21进行诱导表达。用纯化融合蛋白隔周免疫小鼠1次,共3次,设GST免疫及未免疫对照组,末次免疫后1w用广州管圆线虫Ⅲ期幼虫攻击感染,3w后剖杀小鼠,计算减虫率及保护率,并测定小鼠特异性IgG抗体水平变化。结果成功构建了pGEX-4T-1/cystatin重组表达质粒,并在大肠杆菌中得以高效可溶性表达,融合蛋白免疫小鼠后诱导产生了58.1%的减虫率及20%的保护率,与对照组相比减虫效果显著(P<0.01)。结论广州管圆线虫cystatin基因能在大肠杆菌中高效表达并可诱导小鼠产生一定水平的保护性免疫力。     

广州管圆线虫ASP基因的克隆及原核表达

目的对广州管圆线虫ASP基因的完整开放读码框进行克隆、表达及重组蛋白的免疫性分析。方法以广州管圆线虫幼虫cDNA文库中含有ASP基因的质粒为模板,扩增目的基因,进一步将其克隆到原核表达质粒pET-30a(+)中,重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3),经异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导表达,Ni-IDA亲和层析纯化表达产物。免疫印迹(Western blotting)分析重组蛋白的免疫性。结果广州管圆线虫ASP基因的编码区含有366个碱基,编码121个氨基酸,相对分子量(Mt)为13398.26Da。重组质粒pET-30a(+)-ASP构建成功,IPTG诱导获得可溶性表达的重组蛋白,经亲和层析获得的纯化蛋白可被广州管圆线虫病人血清识别。结论广州管圆线虫ASP基因可在原核表达系统中获得具有免疫性的高效表达。     

阿苯达唑和地塞米松对广州管圆线虫病疗效的动物试验

目的观察阿苯达唑和地塞米松治疗广州管圆线虫病的效果,探讨药物的作用机制。方法:以Balb/c小鼠为动物模型,在感染后不同时间,用不同剂量的阿苯达唑治疗,并设立地塞米松进行联合治疗对照组。小鼠于感染后第22d解剖,计数脑组织中存活虫体,以减虫数统计药物疗效;同时观察脑组织切片病理变化;应用透射电镜观察阿苯达唑对虫体超微结构的影响,对药物的作用机制进行探讨。结果阿苯达唑为治疗广州管圆线虫病的有效药物,感染早期用药效果显著。杀虫药和地塞米松的合用可有效减轻脑部炎症反应。阿苯达唑主要通过虫体体壁及肠道吸收而发挥作用。结论阿苯达唑和地塞米松的联合应用可以有效治疗广州管圆线虫病。