Ⅱ型糖尿病大鼠心肌梗死后交感神经重构与神经生长因子(NGF)的表达改变

目的:探讨糖尿病并发心肌梗死(MI)对大鼠心肌中神经生长因子(NGF)的表达及交感神经再生重构的影响。方法:将实验大鼠分为正常对照组、糖尿病对照组、MI对照组及糖尿病MI组,从各组大鼠的左心室梗死周边、室间隔和右心室取材,通过免疫组化染色并结合计算机图像处理技术,对心肌中NGF蛋白表达及交感神经支配进行对比分析。结果:与正常对照组及糖尿病心梗组比较,MI对照组的NGF表达均增加(均P0.05),交感神经支配密度也均明显增加(均P0.01),并且二者在梗死周边、室间隔及右心室3个部位的表达存在相关性(均P0.05),糖尿病对照组的NGF表达均降低(P0.05,P0.01),交感神经支配密度分别为无明显差异及明显降低(P0.01)。结论:糖尿病可抑制心肌细胞表达NGF,但却可促进MI后交感神经的过度再生与重构。推测糖尿病条件下,NGF并非交感神经再生重构的决定因素,尚存在其他途径对交感神经再生及重构进行调节。     

Ⅱ型糖尿病大鼠心梗后非梗死区心室重构的研究

目的:对比观察糖尿病(DM)大鼠心肌梗死(MI)后非梗死区域心肌肥大、增殖分化和细胞凋亡的改变,探讨DM对MI后心室重构的影响。方法:将实验大鼠分为正常对照组、糖尿病对照组、MI对照组及糖尿病MI组,从各组大鼠的左心室梗死周边取材,采用免疫组化染色法检测转化生长因子-β1(TGF-β1)、增殖细胞核抗原(PCNA),用末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP末端缺口标记法(TUNEL)检测凋亡细胞,并进行对比分析。结果:DM大鼠MI后非梗死区域存在着明显的心肌肥大、增殖分化和细胞凋亡。试验表明,糖尿病MI组大鼠梗死区周边凋亡细胞及PCNA、TGF-β1的阳性率均明显高于DM对照组及MI对照组(P0.01)。DM对照组大鼠梗死区周边凋亡细胞的比例明显高于MI对照组(P0.01)。结论:DM可增强TGF-β1和PCNA的表达及增加细胞凋亡,三者可能为DM大鼠MI后高心律失常及高死亡率的病理生理基础。     

金丝桃苷对H9C2细胞缺血再灌注损伤的作用机制

目的探讨金丝桃苷对H9C2细胞缺血再灌注损伤的作用及可能机制。方法采用H9C2细胞模拟缺血再灌注模型,缺血液培养45min,再恢复正常达尔伯克改良伊格尔培养液培养4h。将H9C2细胞随机分为对照组,金丝桃苷组,缺血再灌注组,金丝桃苷处理+缺血再灌注组(联合组)。光镜观察细胞形态变化,CCK-8法检测细胞活力,Western blot检测磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)和磷酸化哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)蛋白水平,自噬相关蛋白LC3Ⅱ、Beclin1和P62以及凋亡相关蛋白裂解的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(caspase-3)活性水平,TUNEL染色观察凋亡变化。结果金丝桃苷组与对照组各项指标比较,差异无统计学意义(P0.05)。与对照组比较,缺血再灌注组凋亡指数、caspase-3活性、LC3Ⅱ和Beclin1明显增高,细胞活力、磷酸化AMPK、磷酸化mTOR和P62蛋白明显降低,差异有统计学意义(P0.05)。与缺血再灌注组比较,联合组细胞活力、磷酸化AMPK、磷酸化mTOR和P62蛋白明显增高,凋亡指数、caspase-3活性、LC3Ⅱ和Beclin1明显降低[(11.7±2.8)%vs(27.6±4.5)%,1.4±0.1 vs 2.1±0.3,1.35±0.04 vs 2.17±0.07,1.30±0.18 vs 2.20±0.20,P0.05]。结论金丝桃苷通过激活AMPK/mTOR信号降低自噬减轻H9C2细胞缺血再灌注损伤。     

经血栓抽吸导管注射替罗非班治疗急性ST段抬高型心肌梗死的效果

目的探讨急性ST段抬高型心肌梗死(ST-segment elevation acute myocardial infarction,STEMI)患者应用血栓抽吸导管注射盐酸替罗非班治疗的效果。方法 STEMI患者274例,根据替罗非班给药途径分为观察组和对照组各137例。血栓抽吸术后,观察组经血栓抽吸导管、对照组经指引导管注射替罗非班,比较2组术后即刻心肌梗死溶栓治疗血流分级(thrombolysis in myocardial infarction,TIMI)3级比率、心肌显影密度(myocardial blush grade,MBG)3级比率以及术后7d左室射血分数(left ventricular ejection fraction,LVEF)。结果观察组术后即刻TIMI 3级比率(75.2%)、MBG 3级比率(94.9%)及术后7dLVEF[(51.7±4.7)%]均高于对照组[62.0%、73.7%、(50.3±4.6)%](P0.05)。结论 STEMI患者行血栓抽吸术后经血栓抽吸导管注射替罗非班可明显增加心肌微循环灌注,改善心功能。     

催产素联合乳鼠心肌细胞条件培养液诱导胚胎干细胞分化的作用

目的:探讨安全高效体外诱导胚胎干细胞(ESCs)向心肌细胞(CMs)分化的途径。方法:ESCs经三步法形成拟胚体(embryoid bodies,EBs)后,按培养基的不同分为4组:乳鼠CMs条件培养液诱导组;催产素(oxytocin,OT)诱导组;混合添加诱导组(乳鼠CMs条件培养液加催产素);对照组(无任何添加)。利用免疫组化染色法检测心肌特异蛋白、RT-PCR检测细胞特殊因子的表达、变时性反应观察细胞对心脏药物的反应及观察细胞的超微结构,对比各组分化后细胞的结构及功能。结果:对照组未观察到细胞跳动。混合添加诱导组、OT诱导组和乳鼠CMs条件培养液诱导组早期分别有(90.30±3.43)%、(21.53±2.69)%和(22.37±6.31)%EBs搏动;中期分别有(92.34±2.65)%、(22.36±2.52)%和(24.15±5.12)%EBs搏动;晚期分别有(83.65±6.27)%、(11.35±2.14)%和(10±4.25)%EBs搏动。免疫组化染色法检测、RT-PCR、变时性反应及电镜观察等的结果提示,混合添加诱导组诱导ESCs分化的效率远高于其余各组。结论:OT、乳鼠CMs条件培养液、OT加乳鼠CMs的条件培养液均具有诱导ESCs分化为CMs的作用,且后者的诱导更具有高效性。