整合素β1在自身免疫性心肌炎小鼠心肌的表达

目的:观察整合素β1在自身免疫性心肌炎小鼠心肌的表达变化。方法:猪肌凝蛋白皮下注射免疫Balb/c小鼠,建立慢性自身免疫性心肌炎模型,于初次免疫后14、30和60d对心肌组织进行病理学检查,同时用激光共聚焦技术和间接免疫荧光法检测整合素β1在心肌的表达变化。结果:在初次免疫后14d,小鼠心脏有局部炎症出现,整合素β1在心脏血管周围的表达高于正常组（P<0.05）;在第30天,小鼠心脏炎性浸润更加明显,整合素β1在心肌的表达增强,显著高于正常组（P<0.05）;第60天,小鼠心脏炎症细胞减少,而纤维化则开始出现,整合素β1在心肌的表达最强（P<0.05）,且排列紊乱。结论:整合素β1在自身免疫性心肌炎的发生及发展过程中起着不同重要作用,整合素β可能参与自身免疫反应及心肌的重构。     

TAK1/NF-κB在小鼠心肌肥厚中的变化及意义

目的 研究转化生长因子活化激酶1/核因子-κB(TAK1/NF-κB)与炎性反应在心肌肥厚中的作用,探索心肌肥厚的分子机制并寻找潜在的防治靶点。方法 使用野生型C57BL/6J小鼠,以主动脉缩窄术(AB)建立压力负荷诱导的心肌肥厚模型,假手术(Sham)组作为对照组。AB术后8周超声心动图评估小鼠心室结构与功能,处死小鼠称量心脏质量。HE与PSR进行心肌组织病理学与纤维化。CD68免疫荧光检测单核-吞噬细胞浸润,实时定量RT-PCR检测炎性反应标志物的表达,Western blot法检测TAK1/NF-κB通路蛋白质磷酸化水平。结果 与Sham组比较,AB组小鼠的室壁厚度、室腔大小及心脏质量/体质量明显增加(P<0.05),心功能下降(P<0.05),心肌细胞横截面积与胶原沉积量显著增大(P<0.05)。此外,AB组心肌组织中CD68阳性细胞数明显增多(P<0.05),TNF-α与IL-1β等炎性反应标志物的mRNA表达水平明显升高(P<0.05);AB组TAK1、κB抑制蛋白激酶β与κB抑制蛋白α(IκBα)的磷酸化水平较对照组明显上调,IκBα总蛋白水平降低,NF-κB p65磷酸化水平增加。结论 压力负荷诱导的心肌肥厚伴有TAK1/NF-κB通路激活与心肌组织炎性浸润,提示TAK1/NF-κB参与了心肌肥厚的发生、发展。     

小鼠自身免疫性心肌炎发病过程中4-1BB/4-1BBL和IL-15的表达及意义

目的： 探讨在小鼠自身免疫性心肌炎发病过程中4-1BB/4-1BBL、IL-15的表达和变化,及其免疫学活性对心肌炎的影响。方法：将提纯的猪心肌肌球蛋白和完全弗氏佐剂等体积混合成乳浊液在1 d、8 d及30 d免疫具有遗传易感性的BALB/c小鼠,建立实验性自身免疫性心肌炎（EAM）模型。对照组小鼠仅用完全弗氏佐剂皮下注射。分别于初次免疫后21 d、80 d进行心肌炎症评分及血清肌钙蛋白I(cTnI)测定,免疫组化检测心肌淋巴细胞活化诱导受体配体（4-1BBL）的表达,ELISA法检测血清白细胞介素-15(IL-15)的浓度,RT-PCR技术检测4-1BB/4-1BBL和IL-15 mRNA在小鼠心肌组织中的表达。结果：在急性期21 d,EAM组小鼠心肌组织见不同程度的炎性细胞浸润和心肌细胞变性坏死、血清cTnI水平升高（P<0.05）;80 d EAM组小鼠心肌组织炎症减弱伴有纤维化出现、cTnI较前期降低;心肌4-1BBL和血清IL-15在EAM组中表达明显,在对照组中少量表达（P<0.05）;21 d EAM组小鼠心肌组织中4-1BB/4-1BBL和IL-15基因表达水平均高于对照组(P<0.01),且与心肌炎症呈明显的正相关,80 d时表达仍然升高(P<0.05)。结论：4-1BB/4-1BBL和IL-15在EAM小鼠发病过程中的表达上调,4-1BB/4-1BBL共刺激通路和IL-15可能协同参与了自身免疫性心肌炎的发生发展过程。     

实验性自身免疫性心肌炎BALB／C小鼠模型中Annexin Ⅵ的表达变化

目的探讨实验性自身免疫性心肌炎BALB／C小鼠模型心肌组织中annexin Ⅵ的表达变化及意义。方法1．模型复制合成与心肌肌球蛋白抗原表位具有相同氨基酸序列的多肽，与完全佛氏佐剂混合后于第0、7天在腹股沟和腋下皮下免疫BALB／C小鼠；2．指标检测HE染色光镜下观察模型的炎症情况，间接ELISA法检测小鼠血清中抗肌球蛋白IgG抗体，Western Blot法检测心肌组织中annexin Ⅵ的表达变化。结果光镜下表现与血清学指标均一致提示心肌炎症；annexin Ⅵ检测结果示实验组与对照组相比，第14天、21天、30天组Annexin Ⅵ表达降低，差异具有显著性（P〈0．05）；实验组间相比，第14天、21天、30天组与第60天组间均具有显著性差异（P〈0．05）。结论本实验中的多肽可以诱导出心肌炎；炎症急性期annexin Ⅵ表达下降可对抗心肌收缩力的减弱，在心肌炎早期心功能下降过程中起到代偿作用。     

肌球蛋白诱导大鼠自身免疫性心肌炎不同时期心功能及心肌病理学变化

目的:观察心肌肌球蛋白诱导自身免疫性心肌炎不同时间实验大鼠心功能及心肌组织病理学动态变化。方法:以猪心肌肌球蛋白为致病性抗原,与完全弗氏佐剂等体积混合成乳浊液在实验第1天、8天、30天皮下注射免疫Lewis大鼠作为心肌炎组,以完全弗氏佐剂皮下注射大鼠作为对照组。HE染色和Masson染色观察两组大鼠初次免疫后第21天、30天、90天心肌病理变化,超声心动图检测两组大鼠初次免疫后第21天、30天、90天的射血分数(EF)、左室短轴缩短分数(FS)、左室舒张末内径(LVEDd)、左室收缩末内径(LV-EDs)及左心室后壁厚度(LVPW)等指标。结果:免疫后不同时间超声心动图检测提示心肌炎组大鼠心功能较对照组明显下降(EF:84.25±2.17%vs93.45±4.13%,P<0.05;FS:48.49±4.36%vs63.17±4.49%,P<0.05;LVEDd:3.66±0.35mmvs4.63±0.32mm,P<0.05)。免疫后第21天,HE染色见心肌炎组大鼠心肌细胞肿胀、变性、坏死及不同程度的急性炎性细胞浸润,至第90天心肌组织炎症减弱,间质出现纤维化,胶原容积分数升高,对照组大鼠未出现心肌炎症及纤维化。结论:心肌肌球蛋白可诱导大鼠实验性自身免疫性心肌炎,急性期心功能受损主要由心肌炎症引起,慢性期病理学改变主要表现为心肌纤维化。     

2型糖尿病并发周围神经病变患者应用中药足浴联合足部护理的效果观察

目的探讨2型糖尿病并发周围神经病变患者应用中药足浴联合足部护理的效果。方法选取2型糖尿病并发周围神经病变的患者120例,随机分成对照组及联合组。联合组给予甲钴胺分散片、中药足浴联合足部护理治疗,对照组给予甲钴胺分散片、温热清水足浴治疗,对比2组患者治疗前后腓肠神经及腓总神经传导速度、治疗效果。结果 2组患者治疗后的腓肠神经和腓总神经传导速度快于治疗前(P0.05),联合组患者治疗后的腓肠神经和腓总神经传导速度快于对照组(P结论中药足浴联合足部护理能改善DNP患者的周围神经病变,提高患者的治疗效果。     

TNFSF13B在实验性自身免疫性心肌炎小鼠心肌组织中的表达及意义

目的：探讨肿瘤坏死因子超家簇成员TNFSF13B在实验性自身免疫性心肌炎小鼠心肌组织中的表达及其意义。方法：用包含心肌肌球蛋白致病性抗原表位的人工合成多肽在d1、d8免疫遗传易感BALB／c小鼠，建立实验性自身免疫性心肌炎动物模型。在初次免疫后d14、d21，取实验组小鼠和对照组小鼠的心肌组织作病理学检查，用免疫组化技术检测TNFSF13B在心肌组织中的表达情况，用ELISA法测血清中抗心肌肌球蛋白自身抗体滴度。结果：初次免疫后d14，实验组15只（15／18）小鼠出现心肌炎症，至d21，实验组17只（17／18）小鼠出现心肌炎症，且程度进一步加重，而对照组小鼠未出现心肌炎症；TNFSF13B在炎症小鼠心肌中的表达明显，而在对照组小鼠心肌中未发现TNFSF13B的表达；与对照组小鼠相比，出现心肌炎症的小鼠血清中有较高滴度的抗心肌肌球蛋白自身抗体。结论：TNFSF13B参与了自身免疫性心肌炎的发生发展过程。     

纤维连接蛋白及其受体在免疫性心肌炎小鼠心肌的表达

目的观察纤维连接蛋白（FN）及其受体CD29在实验性自身免疫性心肌炎（EAM）中的表达情况。方法人工合成心肌肌球蛋白致病性抗原表位多肽,与弗氏完全佐剂（CFA）混合,在1d和8d免疫实验组小鼠（多肽剂量:100μg/只）,诱发EAM;对照组则给予PBS与CFA混合液。分别于21d及75d,检测心肌炎症评分、胶原容积分数（CVF）、Ⅲ型胶原（COLⅢ）mRNA的表达、FN及CD29的表达。结果21d时,实验组小鼠心肌炎性浸润明显,间质出现少量胶原沉积,COLⅢmRNA、FN及CD29的表达均显著高于对照组（均P<0.01）。至75d时,实验组小鼠心肌炎性浸润显著减少,间质胶原沉积更加明显,COLⅢmRNA的表达进一步上调（P<0.05）,FN的表达有所下降,CD29的表达则显著降低（P<0.01）,但仍显著高于对照组（P<0.01）。结论在EAM时,FN及其受体在心肌的表达上调,可能参与了自身免疫性炎症损伤、组织修复及纤维化改变过程,从而促进心肌炎向心肌病的转化。     

APRIL在实验性自身免疫性心肌炎大鼠心肌组织中的表达及意义

目的:建立Lewis大鼠自身免疫性心肌炎实验模型,探讨增殖诱导配体(APRIL)在实验性自身免疫性心肌炎大鼠心肌组织中的表达及其意义。方法:将提纯的猪心肌肌球蛋白和完全弗氏佐剂等体积混合成乳浊液在1 d8、d免疫具有遗传易感性的Lewis大鼠,而对照组仅用完全弗氏佐剂皮下注射。在免疫后的21 d9、0 d超声心动图测定实验组和对照组大鼠心功能的各项指标(EF%、FS%、LVEDd、LVEDs),取大鼠的心肌组织作病理学检查,采用RT-PCR技术检测APRIL在大鼠心肌组织中的表达情况。结果:HE染色显示初次免疫第21天,大鼠出现心肌炎症,炎症细胞主要分布在血管周围。免疫第90天,大鼠心肌细胞内炎症细胞明显减少,心肌细胞出现纤维化,而对照组大鼠心肌均未见到明显炎性改变。超声心动图显示实验组大鼠心功能状况较对照组明显下降(P<0.05),两实验组大鼠心功能无明显差异(P>0.05)。APRIL在炎症大鼠心肌组织中的表达明显,而在对照组大鼠心肌中APRIL的表达较少(P<0.05)。结论:APRIL在实验性自身免疫性心肌炎大鼠心肌中的表达是上调的,A-PRIL可能参与了自身免疫性心肌炎的发生发展过程。     

多肽诱导BALB/c小鼠自身免疫性心肌炎模型及鉴定

目的:以包含心肌球蛋白致病性抗原表位的人工合成多肽免疫BALB/c小鼠,建立实验性自身免疫性心肌炎动物模型。方法:FMOC法人工合成含心肌肌球蛋白抗原表位长度为14个氨基酸残基的多肽,经HPLC法纯化至纯度达95%以上并以质谱分析法鉴定。纯化多肽皮下免疫遗传易感BALB/c系小鼠,建立自身免疫性心肌炎模型。结果:88.9%(32/36)的实验组小鼠第14天出现心肌损伤,至第21天心肌损伤达高峰。心肌病理切片可见心肌层充血,间质单核细胞浸润明显并伴心肌细胞肿胀、坏死。血清抗心肌肌球蛋白自身抗体阳性,并伴肌钙蛋白I水平升高。结论:应用本方法可成功诱导BALB/c系小鼠发病,建立实验性自身免疫性心肌炎动物模型。