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1.
一种用于基因表达谱分析的基因芯片方法 总被引:2,自引:0,他引:2
目的:通过研究SLE患者外周血基因表达谱的改变,建立一种新型的基因芯片技术用于分子发病机理的研究。方法:提取总RNA,逆转录合成单链cDNA、双链cDNA,体外转录合成生物标记的cRNA与基因芯片进行杂交,通过抗体的检测标记荧光染料Cy3,基因芯片扫描仪进行图像扫描。结果:该方法有较高的重复性和稳定性,SLE患者与正常对照组相比较,鉴定出94个基因存在表达差异。结论:该方法能在较少起始标本量的情况下,有效地进行SLE致病基因的筛选,更好的理解SLE发生的分子机理,并且可在其它疾病研究中推广应用。 相似文献
2.
系统性红斑狼疮患者脱氧核糖核酸酶1基因表达研究 总被引:1,自引:0,他引:1
目的 研究脱氧核糖核酸酶 1(deoxyribonuclease ,DNASE1)基因表达及 m RNA剪接形式与系统性红斑狼疮 (systemic lupus erythematosus,SL E)的关联性。 方法 以实时荧光定量聚合酶链反应 (real- time PCR)方法检测 DNASE1的 m RNA表达水平 ,以毛细管电泳技术分析 m RNA编码区替代剪接体 ,结合单核苷酸多态性 (single nucleotide polymorphisms,SNPs)单倍型了解基因结构对表达的影响。 结果 SL E患者 DNASE1基因表达水平显著高于正常对照 (P<0 .0 0 1) ,未发现 SL E疾病活动性指数积分与基因表达水平存在相关性 ,但性别分析显示女性患者 DNASE1基因表达水平高于男性患者 (P<0 .0 1)。 8名正常人与 18例患者的毛细管电泳结果显示 ,患者与正常人替代剪接谱系不同 ,且 380 bp处存在明显条带 ,具有不同单倍型的 SL E患者替代剪接谱系亦有差异。 结论 SL E患者 DNASE1基因表达异常 ,并存在与正常人不同的 m RNA剪接体。 DNASE1基因与 SL E发病相关 相似文献
3.
PBX1基因剪切体表达与SLE的相关研究 总被引:1,自引:1,他引:1
了解PBX1基因各种剪切体的表达在SLE患者和正常人中是否存在差异 ,探讨PBX1的表达与SLE发病的相关性。通过PCR扩增及毛细管芯片电泳 ,确证剪切体h、k、l存在于人体 ;通过实时荧光定量PCR技术 ,对剪切体h、k、l分别进行SLE患者组和正常组的mRNA表达定量比较。结果发现这 3种剪切体在患者组中的表达较正常人明显降低 ,正常人的表达是SLE的 9~ 12倍。重度患者的k、l剪切体与轻中度的病人相比表达明显降低 ,并发狼疮性肾炎的病人k剪切体的表达较无肾累及的病人显著降低。说明PBX1基因剪切体h、k、l在SLE患者中mRNA表达水平下降 ,并与SLE活动度及肾累及有关。提示机体通过PBX1的表达量的调节可能参与SLE的发病 相似文献
4.
白塞氏病相关抗原的重组表达及抗原性初步分析 总被引:1,自引:0,他引:1
目的:探讨Kinectin的抗原性,为下一步研究Kinectin在白塞氏病中的意义奠定基础。方法:从人Hep2细胞抽提RNA,利用RT—PCR扩增能覆盖Kinectin全长的3个片段,其位置分别相当于氨基酸22—510(kin—5),503-994(kin-M)和920-1346(kin-3)。将扩增的PCR片段克隆到pET42—a( )载体中,诱导表达的融合蛋白用白塞氏病病人血清进行Western blot分析。结果:构建的3个表达Kinectin部分片段载体(pET/kin—5、pET/kin-M和pET/Kin-3)具有正确的阅读框架,DNA测序符合率为99%,能在大肠杆菌中表达相应的肽段。8份阳性血清中,用Western blot分析发现,6份血清与kin-M反应,5份血清与kin-3反应,只有一份血清与kin-5有反应。结论:成功地构建表达覆盖Kinectin全长的3个载体,并初步发现Kinectin的抗原性可能主要位于其中间段和羧基端。 相似文献
5.
PBX1基因对系统性红斑狼疮易感基因IFI16表达的影响 总被引:1,自引:1,他引:1
探讨PBX1基因转染人单核细胞系THP1后,对IFI16基因表达的影响。以携带人PBX1基因表达序列的复制缺陷型5型腺病毒载体(pDC315-PBX1-EGFP)转染THP1细胞后,采用实时定量PCR(RT-PCR)和Western blot技术分别在mRNA水平和蛋白水平检测PBX1和IFI16表达的变化。结果,pDC315-PBX1-EGFP转染THP1细胞后,PBX1基因的表达水平都增高,同时发现IFI16基因的表达水平降低。PBX1作为一种转录因子,能调节干扰素诱导蛋白IFI16的表达。 相似文献
6.
抗68KD核糖核蛋白抗体的临床意义探讨 总被引:1,自引:0,他引:1
<正> 近年来在抗核抗体谱的研究中,应用免疫印迹技术(IBT)证实细胞核中分子量为68KD的核糖核蛋白具有RNP抗原性。Pette-rsson等认为抗68KD多肽抗体可能是混合性结缔组织病(MCTD)的血清标记抗体。为了明确抗68K多肽抗体在MCTD诊断上的意义,本文应用IBT法分别对MCTD与系统性红斑狼疮(SLE)患者进行抗68K多肽抗体的研究,并探讨其临床意义。 相似文献
7.
Ⅰ型干扰素在系统性红斑狼疮发病机制中的作用 总被引:4,自引:2,他引:4
系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus,SLE)是自身免疫病的原型,发病与遗传、性激素、感染、理化因素有关。其免疫学异常表型复杂多样,包括组织相容性抗原Ⅱ、Ⅲ,细胞因子及其受体,免疫球蛋白、T细胞抗原受体、抗原递呈细胞,自身反应性T、B淋巴细胞功能的紊乱。因病因与发病机制未明,目前临床治疗只能干预自身免疫反应形成的中期与后期阶段,对导致发病的起始因素无法干预,因而难有根治性治疗措施。本文就干扰素(IFN)与SLE发病机制研究的背景。Ⅰ型干扰素系统的组成、功能,与SLE发病机制的关系.及干预Ⅰ型干扰素系统给SLE治疗带来的希望与风险进行了初步综述。 相似文献
8.
目的 明确FCGR2A基因H131/R131多态性在中国人群中的分布,探讨该位点是否与系统性红斑狼疮(SLE)的发病有关。方法 应用Taqman MGB方法对340例SLE病人,300例患者父母和183名正常人的H131/R131多态性位点进行大规模等位基因分型,病例对照研究应用χ^2检验,家系为基础的传递不平衡检验应用ETDT22软件。结果 病例对照研究提示SLE组和正常组之间的等位基因频率无明显差异(P=0.413),传递不平衡检验证实该位点在中国人群SLE家系中无优势传递(P=0.6049)。结论 在中国汉族人群中FCGR2A H131/R131多态性位点与SLE的发病不存在相关性。 相似文献
9.
风湿病药物基因组学研究进展 总被引:2,自引:0,他引:2
药物基因组学 (parmarcogenomics)是近年来飞速发展的一门学科 ,它研究药物疗效 /毒性和用药者基因多态性之间的关系 ,是后人类基因组计划的一大重要研究领域。药物基因组学的多项研究成果目前已可在临床上应用。本文就风湿病治疗中的常用药物甲氨蝶呤 (MTX)、硫唑嘌呤 (AZA)、环磷酰胺 (CTX)和新药Infliximab的药物基因组学研究作一简要回顾。1 药物基因组学及进展不同个体对同一种药物具有不同的反应 ,这不仅是临床上一个较为普遍的现象 ,而且一直是临床治疗中亟待解决的重要问题。众所周知 ,个体的性状主要取决于基因 ,而人类基因存… 相似文献
10.
目的 探讨白细胞介素(IL)-10启动子区近端三个单核苷酸多态性(SNPs)(-1082/-819/-529)与少儿系统性红斑狼疮(SLE)发病的相关性。方法 80例少儿SLE及家系中应用SNAP-SHOT技术进行基因分型,经Genehunter2.0软件统计分析三个SNPs基因型单倍型(ATA,ACC,GCC)与少儿SLE发病的相关性。同时分析单倍型(ATA,ACC,GCC)与患儿某些临床表现之间的联系。结果 各基因型和单倍型与少儿SLE发病以及各单倍型与患儿的临床表现均无显著相关性。比较各单倍型分布频率发现,患儿GCC分布频率明显高于SLE成人期发病群体,而ATA分布频率则明显低于SLE成人期发病群体,ACC的分布频率在各群体中较为一致。此外,患儿和父母各单倍型分布频率差异未见有显著性。结论 单倍型GCC可能对少儿SLE发病存在某种影响。 相似文献