生存研究样本量设计表及其使用方法

目的 :本文就两样本生存研究所需样本量用广义渐近正态法设计出 15 30个方案 ,制成设计表供临床使用。方法 :利用C语言编制程序 ,按通用格式打印设计表。结果 :常用方案查表可得。这些与两样本生存率检验相匹配 ,具有还原性 ,摆脱了比例危险的假设 ,在常见临床条件下观测功效符合预定功效。结论 :这些设计表适用于两样本癌症临床研究的设计 ,尤其便于临床医师或有关研究人员使用     

旱獭葡萄膜炎病例调查

我所1935年由内蒙海拉尔引进蒙古旱獭(MarmotaSibirica Radde)70只,做为乙型肝炎动物模型。除实验利用及病亡外,现剩41只。1989年1月发现有31只发生眼内葡萄膜炎。一、检查方法及发病率;1989年3月20日至4月13日,对这批旱獭进行系统的眼科检查,包括眼外常规检查、眼底检查及裂隙灯眼前段及玻璃体检查。     

实验大,小鼠中淋巴细胞性脉络丛脑膜炎病毒抗体调查

用酶联免疫吸附试验技术（ＥＬＩＳＡ），分别对河南医科大学实验动物中心开放饲养的昆明小鼠、ＢＡＬＢ／ｃ小鼠、ＮＩＨ小鼠、Ｃ５７ＢＬ小鼠、ＤＢＡ小鼠以及Ｗｉｓｔａｒ大鼠、ＳＤ大鼠共７个品系的实验动物进行了淋巴细胞性脉络脑膜炎病毒（ＬＣＭＶ）抗体的检测。７０只被检动物血清中ＬＣＭＶ抗体均为阴性。结果证实，该中心所饲养的七个品系的实验大、小鼠均未受到ＬＣＭ病毒的感染。     

凋亡相关基因p53，Fas蛋白在早期食管癌及癌前病变中的表达与PDT疗效的关系

目的:探讨凋亡相关基因p53,Fas蛋白在早期食管癌及癌前病变中的表达与PDT疗效的关系。方法:采用免疫组织化学法检测30例PDT治疗前后的早期食管癌及51例癌前病变中凋亡相关p53和Fas蛋白的表达,并分析与PDT疗效的关系。结果:p53蛋白表达与PDT早期食管癌疗效无相关性(P>0·05),p53     

光敏剂PpIX亚细胞分布方式对食管癌细胞光动力学效应的影响

目的: 探讨不同来源的光敏剂PpIX在食管癌细胞中的亚细胞分布与光动力学效应的关系.方法: KYSE-450、KYSE-70和Het-1A细胞分别用ALA和外源性PpIX以及MitoTrackerGreen处理, 相差荧光显微镜观察不同来源的PpIX在细胞内的定位. 利用JC-1-流式细胞方法检测ALA-PDT和PpIX-PDT后细胞线粒体膜电位(ΔΨm)的改变. 利用电镜观察ALAPDT和PpIX-PDT后细胞线粒体的超微结构,观察PpIX的不同细胞分布形式对线粒体损伤的形态学改变. MTS法测定PDT处理后的细胞存活率.结果: 由ALA产生的内源性光敏剂PpIX荧光主要分布在线粒体, 与MitoTracker Green显示的线粒体荧光分布在相同的区域, 而外源性PpIX荧光信号则弥漫性分布于整个细胞质.KYSE-450、KYSE-70和Het-1A细胞经ALAPDT12 h后, 膜电位受损细胞分别达到22%、52%和33%, 而外源性PpIX-PDT别12 h后线粒体受损细胞率仅分别为15%、14%和18%. 电镜观察结果显示, ALA-PDT后仅1 h一些线粒体即已出现受损状态, 可见线粒体内嵴不明显, 出现空泡和膨胀. 但外源性PpIX-PDT后1h细胞内大部分线粒体仍保持完整结构. ALAPDT的细胞杀伤效果明显好于外源性PpIXPDT.结论: 光敏剂的不同亚细胞定位影响了食管癌细胞PDT的功效, PDT造成的线粒体的损伤在肿瘤细胞杀伤过程中起非常重要的作用, 提示以线粒体为靶点的光敏剂是未来光敏剂研制的重点.     

靶向survivin基因小干扰RNA设计及鉴定

目的:利用生物信息学技术预测设计特异抑制survivin蛋白表达的siRNA序列,瞬时转染食道癌细胞KYSE-70,并观察对survivin蛋白表达的沉默效果。方法:依据NCBI数据库获得的survivin mRNA序列,利用Whitehouse,Sidirect和Rational SiRNA Design软件预测设计siRNA干扰序列,并利用BLAST分析干扰序列与人类全基因组的同源性;转染食管癌细胞KYSE-70,Western blot法鉴定蛋白表达。结果:初步预测出3条含21个核苷酸的survivin干扰序列,瞬时转染食道癌细胞KYSE-70后survivin蛋白表达明显下降。结论:运用生物信息学技术可快速便捷预测出抑制survivin表达的siRNA序列,为研究survivin在食管癌发生发展中的作用奠定了基础。     

抑制HIF-1α表达的siRNA序列长效shRNA抑制载体的构建

目的:设计特异抑制缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)蛋白诱导表达的小干扰RNA(siRNA)序列,并构建能长效抑制HIF-1α基因表达的HIF-1α的短发夹siRNA(shRNA)表达载体.方法:依据NCBI数据库获得HIF-1α mR-NA序列,利用Whitehouse、SiDirect和Rational siRNA...     

HBsAg转移因子对慢性乙型肝炎患者外周血淋巴细胞增殖反应的影响

应用纯化的乙型肝炎病毒表面抗原（ＨＢｓＡｇ）免疫山羊，取其脾脏及淋巴结经匀浆透析法制备ＨＢｓＡｇ特异性转移因子（ＨＢｓＡｇ－ＳＴＦ）。在体外观察了其对外周血淋巴细胞增殖反应的影响。结果显示：慢性乙型肝炎患者外周血淋巴细胞增殖率明显低于正常人。ＨＢｓＡｇ－ＳＴＦ可明显促进患者外周血淋巴细胞的增殖反应，而正常转移因子（ＮＴＦ）对其作用则不明显。提示：慢性乙型肝炎患者的细胞免疫处于抑制状态。特异性转移因子可解除或缓解这种抑制状态。     

HIF-1α在食管上皮细胞中的诱导表达及对光动力疗法的影响

目的:探讨食管上皮Het1A细胞经诱导表达HIF1α后对光动力学效应的影响。方法:HIF1α的稳定高表达采用氯化钴(CoCl2)化学诱导法,并应用光敏剂5ALA处理细胞,光动力疗法(photodynamictherapy,PDT)光照射采用波长>600nm的红光光源,细胞存活活性以MTS法测定,应用Westernblot测定HIF1α蛋白质水平,RNA干扰采用脂质体转染法,并利用TdT流式细胞法测定细胞凋亡率。结果:Het1A细胞经100μmol/L的CoCl2孵育4h后可诱导HIF1α蛋白的高表达;PDT后高表达HIF1α的细胞具有较高的细胞存活活性,且细胞凋亡率由未诱导时的16%降低至4%;不同浓度CoCl2诱导的HIF1α蛋白质水平与PDT后细胞存活活性相一致;siRNA转染阻断HIF1α的诱导表达,细胞又恢复了对PDT的应答能力。结论:HIF1α在Het1A细胞中的高表达使PDT效果下降;HIF1α部分通过抑制PDT引起的细胞凋亡而抵御PDT效应。提示HIF1α可作为治疗靶基因,降低肿瘤组织HIF1α表达水平可能有助于改善PDT临床疗效。     

食管鳞状细胞癌组织JNK1蛋白和mRNA的表达及意义

采用免疫组化SP法和逆转录—聚合酶链反应法分别检测40例食管鳞状细胞癌组织和癌周正常食管黏膜组织中氨基未端激酶（JNK1）蛋白及其mRNA的表达。结果癌周正常食管黏膜组织JNK1蛋白及JNK1 mR-NA的阳性表达率均低于癌组织（P均〈0.05）。食管鳞状细胞癌组织中JNK1蛋白和mRNA的表达与癌组织的分化程度和浸润深度有关（P〈0.05）,与性别、年龄及淋巴结转移无关（P〉0.05）。提示JNK1可能在食管鳞癌的恶性发展过程中起一定的作用。