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1.
2.
人载脂蛋白Eε3等位基因的克隆及表达 总被引:2,自引:0,他引:2
目的:克隆人载脂蛋白E(Apolipoprotein E,APOE)ε3等位基因,测定序列,并构建带有人源性APOEε3等位基因的真核表达载体.方法:通过逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)从人胎儿脑组织中克隆得到APOEε3等位基因,与PMD19-T载体连接,再酶切PMDl9-T-APOE ε3,获得APOEε3基因,然后将其与表达载体pEGFP-N1连接,构建pEGFP-N1-APOEε3真核表达载体.重组质粒转染293T细胞后,在荧光显微镜下观察EGFP的表达,并用Western-Blot的方法检测目的蛋白在293T细胞中的表达.结果:经酶切和DNA测序证明APOEε3基冈序列正确,真核表达载体构建成功.将重组质粒转染293T细胞,在转染后的细胞中检测到目的蛋白的表达.结论:成功构建了pEGFP-N1-APOEε3真核表达载体,该表达载体能在真核细胞中正确表达. 相似文献
3.
载脂蛋白E基因型多态性与SAH后血管痉挛的相关研究 总被引:1,自引:0,他引:1
目的:探讨载脂蛋白E基因(Apolipoprotein E,APOE)多态性与自发性蛛网膜下腔出血(Subaraehnoid hemorrhage,SAH)后脑血管痉挛(Cerebral vasospasm,CVS)的相关性.方法:采用聚合酶链反应限制性片段长度多态性(Polymerase chain reactionrestriction fragment length polymorphism,PCR-RFLP)检测185例SAH患者,测定APOE基因型多态性,通过TCD评定SAH患者出血后的CVS情况.分型结果与CVS及相关临床资料等分别进行X~2检验和Logistic回归分析.结果:185例SAH患者中,32例APOE ε4携带者中有21例(占65.7%)发生CVS,153例非ε4携带者中有56例(占36.7%)发生CVS,ε4携带者的CVS发生率明显高于非ε4携带者(P=O.022);单因素和多因素Logistic回归均提示ε4是CVS的危险因素.结论:APOEε4等位基因是SAH患者发生CVS的危险因素. 相似文献
4.
目的 探讨"5.12"汶川地震伤员救治过程中,挤压伤患者获救后快速死亡的原因.方法 回顾性分析我院医疗队在灾后早期救治及转运的患者共417例.所有患者均依据当时具体情况行积极现场抢救,对于病情较重者则安排转运至后方有条件的医院继续诊治.结果 救治伤员中,成人355例,儿童62例,年龄8~63岁,平均(37±9.6)岁.其中挤压伤患者117例(男79例,女38例),死亡13例(11.1%).除5例挤压伤患者因原发创伤严重于救治过程中死亡外,其余8例患者救出前一般情况均较好,神智清醒,对答切题,但于废墟下救出后短时间内(<1 h)即因呼吸心跳骤停而死亡.结论 地震后挤压伤患者快速死亡原因多为挤压综合征所致的高钾血症.积极有效地治疗挤压伤患者可减少地震后死亡人数. 相似文献
5.
目的:比较不同的消化酶对人离体子宫内膜腺上皮细胞和间质细胞分离培养的异同,为研究人体子宫内膜细胞生长、分化及药物作用机制提供一个较理想的实验方法。方法:将人离体子宫内膜细胞随机分为胰酶组、胶原酶组、胰酶组和胶原酶联合消化组进行消化分离和体外培养,用倒置相差显微镜观察细胞的生长状况及形态特点。结果:3组的培养成功率分别为53.33%、73.33%、86.67%。联合消化组较胰酶组培养成功高(氏0.05)。3种不同方法消化分离后的子宫内膜腺上皮细胞及间质细胞贴壁、生长状况无明显差异(B〉0.05)。结论:采用胰酶与胶原酶联合消化法进行子宫内膜细胞消化分离和体外培养,较单用胰酶法细胞培养的成功率高,比单用胶原酶缩短了消化时间.具有降低培养成本的优点。 相似文献
6.
缺氧诱导因子-1的表达与脑膜瘤血管生成的关系 总被引:1,自引:2,他引:1
目的探讨缺氧诱导因子-1(HIF-1)的表达与脑膜瘤血管生成的关系。方法采用免疫组织化学方法检测48例脑膜瘤和10例正常脑膜组织中氧诱导因子-1α(HIF-1α)的表达,并用人原始造血细胞(CD34)抗体标记血管内皮细胞,计数脑膜瘤和正常脑膜组织中的微血管密度(MVD),对所得资料进行统计学分析。结果48例脑膜瘤组织中,HIF-1α阳性表达率为79%,其中弱阳性( ),阳性( ),强阳性( )表达率分别为33%,31%,15%;MVD为6~55,x±s为28±11;正常脑膜中无HIF-1α表达,MVD为4±1,明显低于肿瘤组织,差异有显著性(P<0.01)。HIF-1α阴性(-)表达者,MVD为11±5;呈弱( )、中( )及强阳性( )表达者,MVD分别为23±10、36±13及47±15;HIF-1α阳性表达程度与MVD呈正相关(rs=0.766,P<0.01)。结论HIF-1的表达与脑膜瘤血管生成密切相关,进一步研究HIF-1在脑膜瘤中的表达及调控血管生成的机制,可能为脑膜瘤的治疗开辟新途径。 相似文献
7.
8.
9.
载脂蛋白E基因多态性与轻-中型脑损伤急性期脑电图改变的相关性 总被引:4,自引:2,他引:2
目的 探讨载脂蛋白E基因(APOE)多态性与轻中型脑损伤后脑电图改变的相关性.方法(1)收集81例轻、中型脑损伤患者的临床资料,全部患者抽取静脉血2 ml,采用聚合酶链反应限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)检测APOE基因型;(2)全部患者在伤后1周内监测脑电图2~3次.APOE分型结果与脑电图及临床资料等采用SAS 8.2软件分别进行X2检验和Logistic回归分析. 结果 81例APOE分型分布符合遗传学Hardy-Weinberg定律;在16例APOEε4携带者中有10例(63%)脑电图加重,其比率明显高于非ε4携带者(25%,P=0.009);单因素和多因素logistic回归分析均提示ε4是脑电图加重的危险因素. 结论 APOEε4等位基因是轻、中型脑损伤患者急性期脑电图加莺的危险因素. 相似文献
10.
目的:探讨腹腔镜技术在诊断和治疗急性胰腺炎中的应用价值.方法:回顾总结18例经腹腔镜诊断和治疗急性胰腺炎的临床资料.结果:1例死于霉菌性感染,其余均临床治愈.随访6月~4年,无1例复发.早期手术平均住院时间明显少于延期手术者.3例术后3个月复查CT:胰腺假性囊肿形成,其中2例直径均小于0.6 cm,无特殊不适,未作处理;1例直径10 cm,行B超定位穿刺抽液后消失.结论:适时、有选择地运用腹腔镜技术诊断和治疗急性胰腺炎,不仅是一个补充手段,也是一种实用、有效的方法.具有确诊率高,创伤小,术后恢复快,缩短病程,提高治愈率等优点.在微创外科领域将会有广泛的应用前景. 相似文献