利拉鲁肽对2型糖尿病大鼠肾脏纤维化影响的作用研究

目的 探究利拉鲁肽在糖尿病致肾脏纤维化过程中的影响及作用机制.方法 随机选取大鼠20只,为正常组(NC组);40只经高脂高糖结合链脲佐菌素注射复制糖尿病大鼠模型,再随机分为糖尿病组(DM组)、利拉鲁肽组(LR组);利拉鲁肽皮下注射,0.15 mg·(kg·d)-1,正常组、糖尿病组给予等体积的溶媒.给药8周后检测24 h尿蛋白排泄(24 hUP)、尿素氮(BUN)、血清肌酐(SCr)水平.光镜下观察大鼠肾脏病理.Toll样受体4由免疫组化法检测.酶联免疫吸附测定(ELISA)检测转化生长因子-β1、结缔组织生长因子含量.结果 与正常组比较,利拉鲁肽组24 h尿蛋白排泄、尿素氮、血清肌酐水平升高(P<0.05),Toll样受体4表达增加(P<0.05),肾脏纤维化程度加深;与糖尿病组比较,利拉鲁肽组24 h尿蛋白排泄、尿素氮、血清肌酐水平下降(P<0.05),Toll样受体4表达减少(P<0.05),纤维化程度好转.结论 利拉鲁肽能够改善肾脏纤维化,其机制可能与抑制Toll样受体4通路有关.     

糖代谢紊乱与脑卒中的关系研究进展

<正>脑卒中又可别称为“中风”或“脑血管意外”,具有高发病、高致死、高致残、高复发的“四高”特点,其发病的直接原因是供应脑部血液的血管发生了急性阻塞或破裂致使大脑正常的血供、氧供被迫中断。脑卒中的临床分型为缺血性卒中与出血性卒中,有研究指出,在卒中患者中缺血性卒中更为常见（大约占比60%～70%),     

利拉鲁肽对糖尿病大鼠肾组织炎症因子表达的影响

目的观察利拉鲁肽对糖尿病肾病大鼠肾组织Toll样受体(TLR) 4/髓样细胞分化因子(MyD) 88信号转导通路中炎症因子的影响。方法健康SD雄性大鼠68只,随机分为正常对照组、模型组、利拉鲁肽组、二甲双胍组,每组17只。采用高脂高糖饮食饲养联合腹腔注射少量链脲佐菌素(STZ)法制备大鼠糖尿病肾病模型。利拉鲁肽组按0. 12 mg·kg~(-1)·d~(-1)的剂量皮下注射给药,二甲双胍组按140 mg·kg~(-1)·d~(-1)的剂量灌胃给药,正常对照组及模型组均给予等量溶媒,实验期间各组大鼠均无降糖干预,饲养8 w。检测尿蛋白、尿糖及血生化,苏木素-伊红(HE)染色观察大鼠肾组织形态学改变,免疫组化检测TLR4/MyD88蛋白表达,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测大鼠肾组织核因子(NB)-κB、肿瘤坏死因子(TNF)-α及白细胞介素(IL)-6含量。结果与正常对照组相比,模型组、利拉鲁肽组、二甲双胍组24 h尿蛋白含量、24 h尿糖、血肌酐、尿素氮及血糖水平明显升高,TLR4/MyD88蛋白表达明显增多,NB-κB、TNF-α、IL-6含量明显上升(均P0. 05)。与模型组相比,利拉鲁肽组、二甲双胍组24 h尿蛋白含量、24 h尿糖、血肌酐、尿素氮及血糖明显下降,TLR4/MyD88蛋白表达明显降低(P0. 05),NB-κB、TNF-α、IL-6表达明显下降(P0. 05)。结论利拉鲁肽能对糖尿病大鼠肾脏产生保护,其机制可能与其通过调控TLR4/MyD88信号通路抑制炎症因子NB-κB、TNF-α、IL-6的表达有关。     

正丁醇和松节油混合物对组织脱水不良的补救应用

<正>石蜡包埋是形态学实验的关键一步,其中的组织脱水程序更是关乎能否得到完整、连续的组织切片。为了提高工作效率,大部分科研工作者选用封闭式脱水机进行乙醇逐级脱水,虽然此法简单且迅速,但是具有不能实时监测脱水程度的不足,加之受科研经验的限制,部分实验者不能合理设置各项参数,造成了组织脱水不良的出现。组织脱水不良会使组织内部之间的支撑力在浸蜡的时候下降,出现组织皱缩、蜡块表面凹陷等改变,造成切片卷黏、切片不完整等,     

原肌球调节蛋白1与CDK1在机体水调节中的作用

目的 分析原肌球调节蛋白1(tropomodulin 1,Tmod1)在机体水调节中的作用.方法 采用小鼠肾脏原代内髓集合管细胞进行研究,通过使用腺病毒转染过表达/敲低Tmod1后,利用Western blot,实时荧光定量PCR,检测Tmod1蛋白及RNA水平的变化以验证腺病毒的效率;随后利用Western blot...     

正丁醇联合松节油替代二甲苯用于石蜡包埋

目的 寻找一种能够替代二甲苯透明剂的组织石蜡包埋方法。 方法 使用正丁醇和松节油的混合物替代常规石蜡包埋过程中无水乙醇、二甲苯的作用,收取卷茎蓼干预的多发性脑梗模型大鼠的脑、肾、胃、肝、十二指肠组织进行石蜡包埋,最终根据石蜡切片的效果、HE染色以及免疫组织化学结果对这种新型脱水程序做出评价。 结果 正丁醇和松节油的混合物可以替代常规石蜡包埋程序中无水乙醇的脱水、二甲苯的透明作用。经正丁醇、松节油混合物处理后的组织切片流畅,组织无变脆、变硬;HE染色后,新型脱水处理组织的细胞核、细胞质分明,组织的着色度、色泽、透明度与常规脱水程序无差异;通过大鼠不同组织做免疫组织化学染色,经对比结果与常规包埋组织免疫组织化学染色无差异。 结论 正丁醇联合松节油用于组织脱水既能够避免二甲苯对人的毒性作用,还可以减少无水酒精过度脱水对组织的破坏。     

巨噬细胞中与原肌球蛋白调节蛋白1相互作用的迁移相关蛋白质分析

目的 利用质谱联合Gene Cards数据库挖掘分析Raw264.7小鼠单核巨噬细胞系中与原肌球蛋白调节蛋白1(TMOD1)相互作用且与迁移相关的蛋白质。方法 使用TMOD1-DDK质粒在Raw264.7细胞中过表达TMOD1,免疫共沉淀联合质谱寻找巨噬细胞中与TMOD1存在相互作用的蛋白质,Gene Cards数据库检索巨噬细胞迁移已知蛋白质,Bioinformatics&Systems Biology在线工具对已知蛋白质与质谱蛋白质进行关联分析找到共同差异蛋白(CO-DEPs),Wo LF PSORT预测CO-DEPs亚细胞定位,Egg NOG数据库对CO-DEPs进行真核生物同源类群(KOG)注释,DAVID数据库对CO-DEPs进行基因本体(GO)注释与京都基因组学和基因组学百科全书(KEGG)通路注释,String数据库对CODEPs进行蛋白互作网络分析、Cyto Scape软件绘图。结果质谱与Gene Cards数据库分析共获得CO-DEPs 41个,CODEPs亚细胞定位主要分布于细胞骨架、细胞质、细胞核,KOG注释主要为O:翻译后修饰、Z:细胞骨架、J:翻译,G...     

2型糖尿病大鼠肾组织NF-κB水平的变化

目的探讨核因子(NF)-κB在2型糖尿病大鼠肾组织的表达。方法运用随机数表法将100只健康SD大鼠分为2组,正常组与糖尿病组,糖尿病组复制2型糖尿病大鼠模型。模型构建成功后,于第2、4、8周处死大鼠,采集尿液、血液、肾脏标本。常规生化检测大鼠24 h尿蛋白定量(24 h UP)、空腹血糖(FBG)、血尿素氮(BUN)、血肌酐(SCr)、血清白蛋白(ALB)水平。HE染色观察大鼠肾脏病理变化。免疫组化染色检测NF-κBp50表达。结果糖尿病组各时期24 h UP、FBG、BUN、SCr水平均显著高于正常组(P0.05),血清ALB水平显著低于正常组(P0.05);与正常组各时期比较,糖尿病组各时期NF-κBp50表达均显著高于正常组(P0.05),且随病程的增长表达增多;NF-κB表达水平24 h UP呈正相关(r=0.852,P0.05),与BUN呈正相关(r=0.715,P0.05),与血清ALB呈负相关(r=-0.689,P0.05)。结论 NF-κB极有可能参与了2型糖尿病肾病的形成,肾组织中NF-κB的表达水平能够反映肾损伤程度。