3种念珠菌对氟康唑耐药的易感性及耐药机制比较

目的研究比较3种念珠菌对氟康唑耐药的易感性及其体外诱导耐药株的耐药机制。方法选取同一患者中同时分离的对氟康唑敏感的白念珠菌、光滑念珠菌和热带念珠菌各1株,在体外氟康唑的作用下诱导其成为耐药株。采用罗丹明6G试验比较敏感株与耐药株的外排泵作用,RT-PCR检测外排相关基因CDR1、CDR2以及靶酶编码基因ERG11的表达,并对ERG11基因进行PCR扩增和测序,同时通过罗丹明123试验对3种念珠菌的线粒体膜电位(ΔΨm)进行检测。结果光滑念珠菌最易被氟康唑诱导为耐药株,其CDR1的过度表达引起外排泵作用增强。白念珠菌和热带念珠菌的诱导耐药株以ERG11表达增加为主,其中白念珠菌的ERG11存在V437I、A430V、S263L和T128K突变位点。此外,白念珠菌和光滑念珠菌的诱导耐药株表现为呼吸缺陷。结论不同念珠菌对氟康唑耐药的易感性不同,耐药机制也存在差异。     

重复序列PCR与多位点分型技术在热带假丝酵母菌基因分型中的比较

目的分析比较重复序列聚合酶链反应(REP-PCR)与多位点分型技术(MLST)在热带假丝酵母菌基因分型中的应用。方法收集来自5个地区6家医院的147株热带假丝酵母菌,分别以Ca-21、Ca-22、Com-21两两组合为引物,选用最合适的引物对进行REP-PCR后通过电泳获得REP-PCR型。在不同型别中各挑选3株采用MLST法扩增热带假丝酵母菌的6个管家基因,扩增片段测序后与数据库比对得到相应的序列型(sequencetype,ST)。结果 REP-PCR以Com21-Com21为引物对分型效果最好,REP-PCR与MLST分型结果一致。147株热带假丝酵母菌产生A～H共8种REP-PCR型,分别对应MLST的ST146、新型1、ST136、ST127、ST177、ST169、新型2和ST117。结论 REP-PCR与MLST在热带假丝酵母菌的基因分型中分辨率相同,而REP-PCR更为方便迅速,可作为实验室大量菌株分型的首选方法。     

艰难梭菌感染的流行状况及耐药机制研究进展

近年来艰难梭菌感染（CDI）的流行状况发生了巨大变化,随着其感染率的增加及病情的加剧,CDI已成为一个全球性的健康问题。CDI曾在北美和欧洲数次暴发流行,同样艰难梭菌也已成为亚洲地区重要的院内感染病原体,但目前国内对CDI的认识和临床感染监控还不够。了解CDI的流行状况和艰难梭菌耐药情况,可以为临床预防及治疗CDI提供依据。本文将就CDI的流行状况及耐药机制的研究进展进行综述。     

血清IgG4检测在肾脏疾病中的意义

目的:分析常见肾脏疾病血清IgG4含量,探究血清IgG4与肾小管间质病变及其他实验室指标之间的关系。方法:收集485例不同肾脏疾病患者临床、实验室及病理(光学显微镜、免疫荧光、电子显微镜)资料,血清IgG4检测采用免疫散射比浊法。结果:485例不同肾脏疾病患者中30例患者血清IgG4>2 g/L,间质性肾炎和抗中性粒细胞胞质抗体(ANCA)相关性小血管炎患者血清IgG4升高比例较高,分别为24.0%和22.4%,明显高于其他肾脏疾病。间质性肾炎患者血清IgG4与血清Ig A及24 h尿α1微球蛋白(α1-MG)、24 h尿白蛋白(Alb)和24 h尿Ig G呈正相关关系(r=0.64,r=0.43,r=0.46,r=0.46;均P<0.05)。在254例肾脏穿刺患者中肾间质重度炎性细胞浸润组血清IgG4明显高于无或轻度肾间质炎性细胞浸润组(P     

上海地区某三甲医院艰难梭菌感染临床分析及微生物学特征研究

背景：近年来,艰难梭菌作为医院感染的重要病原菌逐渐受到国内外研究者的重视,然而国内相关报道较少。本研究拟对上海地区某三甲医院艰难梭菌感染情况进行临床分析和微生物学特征研究。 方法：本研究收集2010年12月至2013年3月艰难梭菌感染的住院病人,对临床数据进行回顾性分析;同时分离病原体艰难梭菌,采用微生物学和分子生物学方法对其进行药物敏感试验、毒素检测、芽孢及生物膜形成、动力试验和多位点序列分型等研究。 结果：本研究共入选94例艰难梭菌感染患者,其中12例为严重感染。对临床信息进行分析表明,所有患者均接收过质子泵抑制剂和（或）抗生素治疗,且分布在不同的科室,其中消化科较多,占29.79%（28/94）。通过比较感染严重病例组和感染轻微病例组,感染的病原体之间在微生物学特征上未发现有统计学意义的差异。94株艰难梭菌中,31株为A毒素阴性B毒素阳性（A-B ）且为序列型ST37,为流行克隆株。与其他克隆来源的菌株相比,流行克隆株产较少的毒素和芽孢,生物膜形成和动力也相似,但都对头孢菌素类、喹诺酮类、大环内酯类-林可酰胺类链霉素类和四环素类具有较高的耐药性。 结论：在艰难梭菌感染严重病例中,没有发现特异的临床症状和微生物学特征。高耐药性可能是艰难梭菌感染流行和传播的主要潜在原因之一。     

不同群体血液标本乙肝检测结果分析

目的分析2017—2018年六安市无偿献血者乙肝感染情况,确定低危献血人群,提高血液质量,确保输血安全。方法对2017—2018年六安市52 620名无偿献血者乙肝检测结果进行回顾性分析,并对其性别、婚姻状况、职业及教育程度等资料进行分析。结果六安市52 620人份血液标本共检出270份乙肝阳性,阳性率0.51%。已婚与未婚、不同职业、不同受教育程度的乙肝阳性率均有显著性差异(P<0.05)。结论 2017—2018年六安市无偿献血者乙肝阳性率呈下降趋势,已婚高于未婚,学生阳性率最低,农民工阳性率最高,教育程度越高阳性率越低。     

院内感染艰难梭菌的毒素检测及核糖体分型研究

目的 了解艰难梭菌临床分离株的毒力情况,并运用核糖体分型技术进行流行病学研究.方法 采集住院腹泻患者的未成形粪便标本,无水乙醇处理后接种CDMN选择培养基行艰难梭菌分离培养,并通过革兰染色、耐氧试验和凝集试验行菌落鉴定;提取菌株DNA,选择特异性引物用PCR法扩增毒素基因tcdA和tcdB;核糖体分型针对细菌基因组16S～23S rDNA间区序列进行扩增,并根据电泳带型的多态性实现分型.结果 共计分离得44株艰难梭菌,3种毒素型分别为A+B+型、A-B+型和A-B-型,分别占 57％ 、34％和9％;18种核糖体型中以R8 型和R4 型为主,分别占 20％和18％.结论 本研究临床分离的艰难梭菌菌株中,毒素型以A+B+型为主,核糖体分型存在相对优势的型别;无证据提示存在院内艰难梭菌感染的暴发流行.     

体内外光滑假丝酵母菌氟康唑耐药机制的比较研究

目的 研究比较临床分离和体外诱导的耐氟康唑光滑假丝酵母菌的耐药机制.方法 选取临床分离的4对氟康唑敏感-耐药配对的光滑假丝酵母菌,其中4株敏感株在体外氟康唑的作用下均被诱导为耐药株.利用罗丹明6G试验比较敏感株与两种耐药株的外排泵作用,实时荧光定量RT-PCR检测外排相关基因CDR1、CDR2、SNQ2和ERG11的表达.同时,对PDR1基因进行PCR扩增和测序,对比分析临床耐药株和体外诱导耐药株的突变位点.结果 临床耐药株和体外诱导耐药株外排泵的功能均明显强于敏感株；两者CDR1表达均显著升高,而CDR2和SNQ2则无明显变化；ERG11在敏感与耐药菌株之间的表达水平也无显著差别；两种耐药株的PDR1均发现错义突变位点,其中P927S、L543P及S947L突变尚未被报道过.结论 光滑假丝酵母菌在体内外氟康唑作用下PDR1均产生突变,引起外排相关基因,尤其是CDR1的表达增加从而增强了外排泵的作用导致耐药.     

比较重复序列PCR与多位点序列分型技术用于光滑假丝酵母菌的基因分型检测

目的 评价REP-PCR基因分型技术在临床光滑假丝酵母菌株分型中的应用价值。方法收集2009-2010年上海瑞金医院、上海仁济医院、上海华山医院、安徽医科大学附属医院、深圳人民医院38株光滑假丝酵母菌。采用MLST法扩增光滑假丝酵母菌的6个管家基因内片段,扩增片段测序后与数据库数据比对得出等位基因谱,从而得到相应的序列型（sequence type,ST）。采用REP-PCR法设计Ca21、Ca22、Com21引物扩增38株光滑假丝酵母菌重复序列,通过电泳比较分析,获得REP-PCR型。比较两种分型方法的结果和效率。结果 以Ca22-Com21为引物的REP-PCR分型效果最好。REP-PCR和MLST分型结果相同,38株光滑假丝酵母菌共产生5种REP-PCR型,分别为A、B、C、D、E型,对应于MLST的ST7、ST3、ST19、ST45和新型。REP-PCR比MLST耗时短。结论REP-PCR方法简单快速,且分辨率与MLST技术相同,可作为实验室大量菌株分型的首选方法。