无血清培养CD133+Colo205大肠癌细胞可高表达ALDH1

目的通过观察含生长因子的无血清培养基（serum-free medium, SFM）培养的Colo205细胞,研究其对CD133与ALDH1
表达的影响。方法用含生长因子的无血清培养基对Colo205 细胞进行培养,以含血清培养基（serum-supplimented medium,
SSM）组作为对照,流式细胞术检测两组细胞表面标志物CD133表达的阳性率;流式分选SFM组CD133+细胞和CD133-细胞,倒
置显微镜观察CD133+细胞和CD133-细胞在无血清培养基中的生长特性;利用细胞免疫荧光检测CD133+细胞和CD133-细胞
CD133和ALDH1的表达;分别将CD133+细胞和CD133-细胞在NOD/SCID小鼠皮下进行成瘤实验,采用免疫组织化学方法对
肿瘤组织检测ALDH1表达。结果SFM组CD133+细胞比例明显高于SSM组（P<0.05）;CD133+细胞在SFM中可以形成肿瘤干
细胞球,而CD133-则不能形成;CD133+细胞高表达CD133和ALDH1,且两者共表达,而CD133-细胞则是阴性表达;CD133+细胞
和CD133-细胞成瘤后,CD133+细胞组肿瘤组织ALDH1阳性表达,而CD133-细胞组阴性表达。结论含生长因子的无血清培养
基培养CD133+Colo205大肠癌细胞能够形成肿瘤干细胞球及高表达ALDH1,ALDH1可能是大肠癌干细胞候选的标志物之一。
     

1,25(OH)2D3膜相关快速反应类固醇结合蛋白参与的钙磷相关作用

钙磷代谢对于机体起着重要作用,参与多种组织细胞的结构组成和生理功能,从形成和维持骨架,到调节神经功能,甚至于抑制肿瘤细胞的增殖[1].钙磷的稳态对机体至关重要,胃肠道中钙磷的吸收主要发生在小肠的上段[2],维生素D3的活性形式1,25(OH)2D3可通过与nVDR结合(nuclear Vitamin D Receptor)的经典基因途径即慢调节通路促进小肠上皮细胞钙磷吸收已被广泛接受[3].但食物通过十二指肠的时间只有数分钟,考虑到基因途径所需要的时间对于即时调节的需求过于长久,钙磷稳态的重要性使钙磷快速精确的调控成为必要.近年来研究发现1,25(OH)2D3引起的钙吸收还存在一个非基因途径,即通过结合一个膜蛋白受体而促进小肠钙磷快速吸收的途径[3-4],此受体被命名为1,25(OH)2D3膜相关快速反应类固醇结合蛋白[1,25 D3-MARRS 结合蛋白,Membrane Associated Rapid Response Steroid (MARRS) binding proteins][5].除了小肠钙磷吸收外,1,25D3-MARRS结合蛋白还参与了多种与钙磷相关的作用.     

222例神经内分泌肿瘤诊治及随访分析

目的探讨全身神经内分泌肿瘤(NET)的好发部位、临床症状、影像学及预后。方法回顾性分析南方医院2001年1月至2012年4月222例NET患者的病历资料。结果 222例NET患者中,152例(68.5%)NET发生在消化道。突触素(Syn)、嗜铬素A(CgA)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)免疫组织化阳性率分别为85.1%、64.2%、81.9%。首诊淋巴结转移率为23.9%,随访结束时远处转移率为30.6%;淋巴转移和远处器官转移随肿瘤直径增加而升高。193例接受手术治疗(108例内镜下治疗),1年、3年、5年总生存率分别为86.1%、73.0%和70.9%。年龄50岁发生转移者生存时间明显缩短。结论 NET可发生于全身许多器官和组织,以消化道最为多见,肿瘤直径与转移密切相关,患者年龄及肿瘤转移与预后有关。     

无血清培养CD133~+Colo205大肠癌细胞可高表达ALDH1

目的通过观察含生长因子的无血清培养基(serum-free medium,SFM)培养的Colo205细胞,研究其对CD133与ALDH1表达的影响。方法用含生长因子的无血清培养基对Colo205细胞进行培养,以含血清培养基(serum-supplimented medium,SSM)组作为对照,流式细胞术检测两组细胞表面标志物CD133表达的阳性率;流式分选SFM组CD133+细胞和CD133-细胞,倒置显微镜观察CD133+细胞和CD133-细胞在无血清培养基中的生长特性;利用细胞免疫荧光检测CD133+细胞和CD133-细胞CD133和ALDH1的表达;分别将CD133+细胞和CD133-细胞在NOD/SCID小鼠皮下进行成瘤实验,采用免疫组织化学方法对肿瘤组织检测ALDH1表达。结果 SFM组CD133+细胞比例明显高于SSM组(P<0.05);CD133+细胞在SFM中可以形成肿瘤干细胞球,而CD133-则不能形成;CD133+细胞高表达CD133和ALDH1,且两者共表达,而CD133-细胞则是阴性表达;CD133+细胞和CD133-细胞成瘤后,CD133+细胞组肿瘤组织ALDH1阳性表达,而CD133-细胞组阴性表达。结论含生长因子的无血清培养基培养CD133+Colo205大肠癌细胞能够形成肿瘤干细胞球及高表达ALDH1,ALDH1可能是大肠癌干细胞候选的标志物之一。     

胃泌素对大鼠小肠上皮1,25（OH）2D3膜相关快速反应类固醇结合蛋白的影响

目的探讨胃泌素对大鼠小肠上皮1,25(OH)2D3膜相关快速反应类固醇结合蛋白(1,25D3-MARRS结合蛋白)表达的影响。方法应用免疫组织化学、RT-PCR和免疫印迹法,检测胃泌素、奥美拉唑处理后的SD大鼠小肠中1,25D3-MARRS结合蛋白的表达情况与对照组的差异,并测大鼠血清中钙、磷离子的浓度变化。结果大鼠小肠上皮细胞中1,25D3-MARRS结合蛋白分布于胞核、胞浆和胞膜。胃泌素、奥美拉唑均引起大鼠小肠组织1,25D3-MARRS结合蛋白的mRNA和蛋白两个水平表达增高(P<0.05),但其作为一个促小肠钙磷吸收的蛋白,无明显增高血清钙磷浓度的作用(P>0.05)。结论 1,25D3-MARRS结合蛋白作为一个广泛分布的多功能蛋白,受胃泌素的调节,在消化道相关疾病具有很高的研究价值及临床应用前景。