免疫调节剂对1型糖尿病大鼠Foxp3表达的影响

目的探讨Foxp3在1型糖尿病大鼠模型中的表达和意义及其在来氟米特、百灵胶囊、雷公藤治疗机制中的作用。方法将50只大鼠随机分为5组,每组各10只,Ⅰ-Ⅳ组采用小剂量多次注射链脲佐菌素（STZ）制备大鼠1型糖尿病模型,Ⅴ组为正常对照组。成模后分别给予来氟米特（Ⅰ组）、雷公藤（Ⅱ组）、百灵胶囊（Ⅲ组）灌胃,每天1次,连续2个月,Ⅳ组为非用药糖尿病对照组。荧光定量PCR检测外周血单个核细胞及脾淋巴细胞Foxp3 mRNA的表达,免疫组化检测淋巴结和脾组织Foxp3蛋白的表达。结果成模后及给药后Ⅰ-Ⅳ组血糖水平均明显高于Ⅴ组（F=331.894、359.638,P〈0.01）;给药后,Ⅰ-Ⅲ组胰岛中淋巴细胞浸润程度较Ⅳ组减轻;Foxp3 mRNA、Foxp3蛋白表达水平Ⅰ-Ⅳ组均高于Ⅴ组（F=5.895、11.489,P〈0.05）;与Ⅳ组相比,Ⅱ组血中的Foxp3 mRNA升高不明显,脾中显著升高（P=0.028）。结论Foxp3表达的变化可能参与了STZ诱导的1型糖尿病的发生发展;来氟米特、百灵胶囊、雷公藤对1型糖尿病有一定的治疗作用,上调Foxp3基因的表达有可能为雷公藤治疗机制之一,而来氟米特和百灵胶囊未发现该作用。     

免疫调节剂对1型糖尿病大鼠Foxp3表达的影响

目的 探讨Foxp3在1型糖尿病大鼠模型中的表达和意义及其在来氟米特、百灵胶囊、雷公藤治疗机制中的作用.方法 将50只大鼠随机分为5组,每组各10只,Ⅰ～Ⅳ组采用小剂量多次注射链脲佐菌素(STZ)制备大鼠1型糖尿病模型,Ⅴ组为正常对照组.成模后分别给予来氟米特(Ⅰ组)、雷公藤(Ⅱ组)、百灵胶囊(Ⅲ组)灌胃,每天1次,连续2个月,Ⅳ组为非用药糖尿病对照组.荧光定量PCR检测外周血单个核细胞及脾淋巴细胞Foxp3 mRNA 的表达,免疫组化检测淋巴结和脾组织Foxp3蛋白的表达.结果 成模后及给药后Ⅰ～Ⅳ组血糖水平均明显高于Ⅴ组(F=331.894、359.638,P＜0.01);给药后,Ⅰ～Ⅲ组胰岛中淋巴细胞浸润程度较Ⅳ组减轻;Foxp3 mRNA、Foxp3蛋白表达水平Ⅰ～Ⅳ组均高于Ⅴ组(F=5.895、11.489,P＜0.05);与Ⅳ组相比,Ⅱ组血中的Foxp3 mRNA升高不明显,脾中显著升高(P=0.028).结论 Foxp3表达的变化可能参与了STZ诱导的1型糖尿病的发生发展;来氟米特、百灵胶囊、雷公藤对1型糖尿病有一定的治疗作用,上调Foxp3基因的表达有可能为雷公藤治疗机制之一,而来氟米特和百灵胶囊未发现该作用.     

双转基因小鼠模型中microRNA-153对RTN4的表达调控

目的 探讨mir-153在阿尔茨海默病发病机制中的作用.方法 通过microRNA芯片及Real-timePCR检测APPswe/PSAE9双转基因小鼠脑内mir-153的表达;构建高表达mir-153的稳转细胞系,通过western-blot检测稳转细胞系内RTN4的蛋白表达;构建野生型及突变型RTN4的3'UTR荧光素酶报告载体,分别将其与mir-153表达载体或microRNA阴性对照载体共转染入293T细胞内,检测海肾荧光素酶的相对活性以验证mir-153对RTN4 mRNA的作用靶点.结果 microRNA芯片及Real-time PCR检测均证实3月龄APP8we/PS△E9双转基因小鼠脑内mir-153的表达较同龄野生对照显著降低;在高表达mir-153的稳转细胞系内RTN4的蛋白水平明显降低;共转染野生型RTN4的3'UTR/mir-153表达载体可使海肾荧光素酶相对活性较共转染野生型RTN4的3'UTR/miRNA阴性对照质粒组显著降低(P＜0.05),而共转染突变型RTN4的3'UTR/mir-153表达载体组则较之无明显差异.结论 在3月龄APPswe/PS△E9双转基因小鼠脑内存在mir-153的异常表达;mir-153可调控RTN4的蛋白表达;mir-153对RTN4的表达调控是通过结合RTN4 3'UTR 839-845碱基处的作用位点而实现的.     

MicroRNA在阿尔茨海默病发病机制中的作用

microRNA通过转录后水平调控细胞的蛋白质表达,在神经系统的发育、分化及功能行使中发挥着重要作用。阿尔茨海默病是一种以进行性认知功能障碍为特征的神经退行性疾病,患者脑内microRNA的表达发生改变,异常表达的microRNA可从多种途径影响疾病的发生与发展,对microRNA在阿尔茨海默病中作用的研究不仅有利于疾病发病机制的诠释也有利于microRNA调控机制的探讨。     

MicroRNA-153对靶基因下游信号分子GSK-3β表达水平及细胞抗损伤能力的影响

目的 mir-153可负调控阿尔茨海默病(Alzheimer'S disease,AD)主要致病基因APP及APLP2的蛋白表达,降低其胞内降解片段(intracellular domains,ICDs)的生成.因ICDs具有转录活化及促凋亡活性,本研究旨在探讨mir-153对这两个靶基因下游信号分子GSK-3β表达水平及细胞抗损伤能力的影响,以期进一步阐明mir-153在阿尔茨海默病发病机制中的作用.方法 构建mir-153稳转细胞系及mir-153转基因小鼠,Western blot检测该细胞系及小鼠脑内磷酸化GSK-3β、Tau及其总蛋白的表达;Aβ42肽和H2O2分别处理mir-153稳转细胞系,MTS法检测细胞增殖活性的改变,流式细胞术检测细胞凋亡水平的改变.结果 mir-153稳转细胞系中磷酸化GSK-3β及其总蛋白的表达下调,Tau磷酸化水平降低.mir-153转基因小鼠脑内,磷酸化GSK-3β及其总蛋白的表达降低,磷酸化Tau及其总蛋白水平均无明显变化.Aβ42肽和H2O2损伤作用下,mir-153稳转细胞系的增殖活性显著降低,凋亡水平增加.结论 mir-153可负调控靶基因下游信号分子GSK-3β的表达;高表达mir-153可降低细胞抗损伤的能力.     

吡非尼酮对特发性肺纤维化患者肺功能及血清标志物水平的影响

目的分析吡非尼酮对特发性肺纤维化(IPF)患者肺功能及血清标志物水平的影响。方法选择2016年3月至2019年2月我院诊治的60例IPF患者,随机分为对照组和试验组,每组30例。对照组给予常规的止咳、平喘等治疗;试验组在此基础上给予吡非尼酮400 mg,3次/d口服。疗程共6个月。对比两组患者治疗前后肺功能指标、血清KL-6、CCL18、miR-21水平的变化。结果治疗后,对照组FVC%pred、FEV1%pred、DLco%pred均降低(P<0.05);试验组DLco%pred降低(P<0.05),但FVC%pred、FEV1%pred差异无统计学意义(P>0.05)。试验组治疗前后FVC%pred、FEV1%pred差值(治疗前-治疗后)小于对照组(P<0.01),两组DLco%pred差值比较差异无统计学意义(P>0.05)。治疗后,试验组miR-21水平低于对照组(P<0.05),两组KL-6比较差异无统计学意义(P>0.05)。试验组CCL18、miR-21治疗前后差值(治疗后-治疗前)小于对照组(P<0.05),两组KL-6差值比较差异无统计学意义(P>0.05)。对照组治疗前后血清KL-6、CCL18、miR-21差值与FVC%pred、DLco%pred、FEV1%pred差值呈显著负相关(P<0.05)。结论吡非尼酮可延缓IPF患者肺功能的下降,降低患者血清miR-21水平,抑制CCL18升高,检测miR-21、CCL18表达可为吡非尼酮的疗效判定提供依据。     

氟桂利嗪与黛力新配伍治疗痛性糖尿病周围神经病变例

目的:探讨氟桂利嗪联合黛力新治疗痛性糖尿病周围神经病变疗效。方法:将90例伴有抑郁症状的2型糖尿病痛性周围神经病变患者随机分为A组(对照组)、B组(药物对照组)、C组(观察组),治疗前后行四肢肌电图检查、神经主觉症状问卷(TSS)评分、简明疼痛评估量表(BPI)评分、汉密尔顿抑郁量表(HAMD)评分、测空腹血糖和药物副作用观察,评价临床疗效。结果:治疗前,三组患者性别、年龄、病程、空腹血糖、糖化血红蛋白、感觉、运动神经传导速度及TSS、BPI、HAMD分值无显著性差异(P>0.05);治疗2周后三组感觉、运动神经传导速度较前改善(P<0.05);A组除疼痛TSS分值外,其余各项TSS分值、总分值均较治疗前减低(P<0.05),BPI分值及HAMD分值较前有减低趋势(P<0.05),B组各项TSS分值、总分值均较治疗前减低(P<0.05),BPI分值及HAMD分值较前有减低趋势(P>0.05);C组TSS、BPI、HAMD分值均较治疗前明显改善(P<0.05),且较同期A组、B组有显著性差异(P<0.05);总有效率C组93.3%明显高于A组60%及B组66.7%(P<0.05)。结论:氟桂利嗪联合黛力新治疗痛性糖尿病周围神经病变疗效显著。     

microRNA在肺纤维化发病机制中的作用

肺间质纤维化是各种不同病因肺间质疾病的共同结局,是呼吸衰竭的重要病因,其发病机制至今仍不明了.microRNA(miRNA)自发现以来即成为生命科学研究的重要热点,已发现miRNA的异常表达与多种人类疾病紧密相关.近年来的研究发现miRNA在肺间质纤维化的发病机制中起着重要作用,预示miRNA有望成为肺间质纤维化治疗的新靶点.     

转录因子2过表达改善人肝癌细胞HepG2的胰岛素抵抗

目的研究转录因子2(TCF2)过表达对HepG2细胞胰岛素抵抗的影响。方法用高浓度胰岛素(1×10-8mol/L)诱导处理人肝癌HepG2细胞24 h建立人肝癌HepG2细胞胰岛素抵抗模型,分为空白组、胰岛素抵抗模型组(IR组)、IR+空载体组和IR+TCF2过表达组;RT-qPCR和Western blot检测TCF2的表达;葡萄糖氧化酶法检测培养液中的葡萄糖浓度;蒽酮法检测糖原合成量;MTT法检测细胞存活率;比色法检测己糖激酶和丙酮酸激酶的活性;Western blot检测人胰岛素受体底物(IRS-1)和葡萄糖转运蛋白4(GLUT4)的表达。结果与空白组比较,IR组细胞葡萄糖消耗量显著降低(P<0.05),表明模型建立成功。IR组细胞TCF2 mRNA和蛋白表达显著降低(P<0.05)。与IR组相比,TCF2过表达可显著增加胰岛素抵抗HepG2细胞的葡萄糖消耗量、肝糖原合成量、己糖激酶活性和丙酮酸激酶活性,增加IRS-1和GLUT4蛋白表达(P<0.05)。结论过表达TCF2可改善人肝癌HepG2细胞的胰岛素抵抗。