上海市1999-2006年新登记老年肺结核患者死亡情况及影响因素分析

目的 描述上海市60岁及以上的老年肺结核患者的死亡情况,探讨其可能的影响因素。方法 上海市1999-2006年期间新登记并确诊的痰分枝杆菌培养阳性肺结核病患者共14589例,其中≥60周岁的老年患者共5068例（34.7%）,<60岁的非老年患者共9521例（65.3%）。研究描述了两组患者人口学、临床特征、细菌学、死亡情况等方面的特征,并以logistic回归逐步前进法鉴别老年患者中可能与死亡有关的危险因素。结果 老年患者中男性4167例,占82.2%,非老年患者中男性6699例,占70.4%（χ²=244.8, P<0.01)、老年复发患者1447例,占28.6%;非老年患者1240例,占13.0%（χ²=536.3, P<0.01);老年有合并症患者1472例,占29.0%,非老年患者1172例,占12.3%（χ²=624.2, P<0.01);老年涂阳患者4313例,占85.1%,非老年患者7625例,占80.0%（χ²=31.6, P<0.01)。两者比较差异均有统计学意义。老年患者中肺部影像学检查显示有空洞者(1480例,占29.2%)显著低于非老年患者（3120例,占32.8%）,两者比较有统计学差异（χ²=11.9, P<0.01)。老年患者病死率(668例,13.2%)显著高于非老年患者(139例,1.5%),两者比较差异有统计学意义（χ²=479.7, P<0.01)。在5068例老年组患者中,经多因素logisitic回归逐步前进法分析显示,70～<80岁(OR=1.89, 95%CI＝1.54～3.32,P<0.01)、80岁及以上 (OR=3.71, 95%CI＝2.91～4.74, P<0.01)、男性(OR=1.72, 95%CI＝1.34～2.21,P<0.01)、有合并症(OR=1.53, 95%CI＝1.28～1.83,P<0.01)、涂阳(OR=1.33, 95%CI＝1.02～1.72, P=0.03)、居住地区为郊县(OR=1.49, 95%CI＝1.24～1.79,P<0.01)和耐多药(OR=1.95, 95%CI＝1.10～3.48,P=0.02)与死亡相关。结论 上海市老年肺结核患者病死率远高于非老年患者。高龄、男性、有合并症、涂阳、居住于郊县和耐多药是死亡的危险因素。     

结核分枝杆菌embB基因306位点突变与耐药的相关性研究

embB基因突变，特别是其306位点（embB306）的点突变一直被认为是结核分枝杆菌耐乙胺丁醇的重要原因。但是，Hazbon等对来自世界各地的1020株菌株进行分析后认为，embB306突变不直接引起结核分枝杆菌乙胺丁醇耐药性，而是容易产生对任何药物的耐药性。Plinke等报道，embB306位点突变只发生在乙胺丁醇耐药菌株中，从而说明该位点突变与乙胺丁醇耐药有关。可见embB306位点突变与乙胺丁醇耐药的关系还存在着较大的分歧。     

人结核分枝杆菌和牛结核分枝杆菌差异蛋白质组学的研究

目的 探讨人MTB标准株H37Rv与牛分枝杆菌标准株卡介苗株的亚细胞蛋白质组学差异.方法 应用密度梯度离心法分离H37Rv和卡介苗株的细胞壁、细胞膜和细胞质蛋白,利用二维液相色谱分离技术进一步获得H37Rv和卡介苗株亚细胞蛋白质组,采用酶联免疫吸附试验分别检测H37Rv和卡介苗各组分与结核病患者和健康人各5例血清的免疫学反应.组间比较采用t检验.结果 共获得26个特异性引发免疫反应的H37Rv菌株蛋白组分.细胞膜组分M3Fr18与结核病患者的血清免疫学反应的吸收光度(A450值)为(721±3)×10-3,明显高于健康人[(356±6)×10-3],也明显高于卡介苗株细胞膜相应组分与健康人的血清免疫学反应强度[(414±7)×10-3],差异均有统计学意义(t值分别为1.852和1.037,均P＜0.01).细胞膜组分MI0Fr21与结核病患者的血清免疫学反应的A450值为(954±6)×10-3,明显高于健康人[(415±6)×10-3],也明显高于卡介苗株细胞膜相应组分与健康人的血清免疫学反应强度[(315±4)×10-3],差异均有统计学意义(t值分别为2.113和2.550,均P＜0.01).结论 二维液相色谱和酶联免疫吸附试验联合应用,有助于检测人MTB感染的相关抗原蛋白.M3Fr18和M10Fr21蛋白质组分可引起结核病患者的特异性免疫反应,提示其可能是人MTB感染的特异抗原.

Abstract：

Objective To compare the proteome of Mycobacterium tuberculosis (MTB) H37 Rv strain with Bovine mycobacterium (Bacillus Calmette-Guerin, BCG) strain at the sub-cellular level. Methods Proteins of the cell wall, membrane and cytolymph of H37 Rv and BCG were extracted by density gradient centrifugation. Sub-cellular proteome of H37 Rv and BCG were analyzed using 2-dimensional liquid chromatography. The immunity reactions of H37 Rv fractions with sera from patients ( n = 5 ) and healthy controls ( n = 5 ), as well as BCG fractions with sera from healthy controls ( n = 5 ) were analyzed by ELISA.Data was analyzed by t test. Results Twenty-six fractions of H37 Rv were found to elicit specific antibody response. Fraction M3Fr18 of H37 Rv reacted with sera from patients. The A450 [ (721 ± 3 ) × 10-3] was higher than that with sera from healthy controls [ ( 356 ± 6) × 10 - 3 ] , as well as the A450 of the corresponding fractions of BCG with sera from healthy controls [ (414 ± 7) × 10-3 ]. The differences between the patient group and the 2 healthy control groups were significant ( t = 1. 852 and 1. 037, all P ＜ 0. 01 ). Moreover,fraction M10Fr21 of H37Rv reacted with sera from the patients. The A450[ (954 ±6) × 10 -3 ] was higher than that with sera from the healthy controls [ (415 ± 6 ) × 10-3 ], as well as the A450 of the corresponding fractions of BCG with sera from the healthy controls [ ( 315 ± 4 ) × 10-3 ]. The differences between the patient group and the 2 healthy control groups were significant ( t = 2. 113 and 2. 550, all P ＜ 0. 01 ).Conclusions The combination of 2-dimensional liquid chromatography and immunology technology is useful in finding antigens associated with MTB infection. Fractions M3Fr18 and M10Fr21 can elicit specific immune reaction among MTB patients, suggesting that they may be specific antigens of MTB infection.     

耐药对肺结核病治疗效果的影响

目的评价耐药对地区肺结核病治疗效果的影响。方法对上海地区2004年2月—9月新登记敏感及耐药肺结核病人1年治疗转归进行分析和比较。结果在全市各区(县)结核病定点医院新登记1597例肺结核病病人中,805例培养阳性,其中731例经菌型鉴定为结核分枝杆菌的病人纳入分析。731例病人的总耐药率为18.7%,耐多药率为6.7%。敏感组治疗成功率达到93.0%,非MDR的耐药病人治疗成功率达到85%以上,MDR组治疗成功率为71.4%。经χ²检验,差别有统计学意义(χ²=83.9968,P<0.01)。在68例治疗不成功的病人中,耐药病人占38.2%;而在30例治疗失败的病人中,耐药病人占60%。复治敏感病人的治疗成功率(92.0%)与初治敏感病人(93.1%)相当,但是复治耐药病人的治疗成功率远低于初治耐药病人。结论(1)上海地区肺结核病病人治疗管理效果良好;(2)耐药是肺结核病治疗失败的重要因素,应加强和改进对耐药结核病的治疗措施;(3)耐药和敏感病人治疗效果存在较大差异,应分别评价。     

利用结核分枝杆菌基因型分型技术研究外源性再感染在结核病复发中的作用

目的 研究外源性再感染在结核病复发中的作用。方法以上海地区1999年1月至2004年3月复发肺结核患者为对象，通过比较复发肺结核患者前后两次发病时结核分枝杆菌散在分布重复单位（mycobacterial interspersed repetitive units，MIRU）基因型的差异，判断结核病复发的原因。结果在37例符合要求的结核病复发患者中，25例患者两次发病时MIRU基因型发生了变化，提示68％的结核病患者复发是由于外源性再感染而引起的。随着年龄的增加，结核病复发患者中由外源性再感染所致的可能性逐步降低，≤30岁、31～60岁、≥61岁患者中外源性再感染的比例分别为3／3、73％（11／15）、58％（11／19）。随着复发间隔时间的延长，结核病复发患者中由外源性再感染所致的可能性逐步增加，6个月内复发的患者中58％（7／12）是由外源性再感染引起的，而1年以后这个比例达到79％（11／14）。结论外源性再感染是上海地区结核病复发的重要原因；MIRU分型方法是研究结核病复发原因的可行方法。     

非结核分支杆菌肺病96例临床分析

目的了解非结核分支杆菌（ＮＴＭ）肺病的临床特点。方法对１９８１～１９９６年间痰抗酸杆菌培养阳性５５９２例中，经菌型鉴定证明为ＮＴＭ肺病者１７３例中资料较完整的９６例进行回顾性分析。结果按Ｒｕｎｙｏｎ分类法，９６例中感染Ｉ型堪萨斯分支杆菌１４例、海分支杆菌１例，感染Ⅱ型瘰疬分支杆菌４例，感染Ⅲ型鸟胞内分支杆菌２３例，感染Ⅳ型龟分支杆菌２４例、偶发分支杆菌３０例。病程在１０年以上者占３１％。主要症状依次为咳嗽（７８％）、咳痰（７１％）、咯血（５８％）和发热（２６％）。Ｘ线胸片示两侧受累占５７％，单侧占４２％，右侧占２７％，左侧占１５％，无病灶者占１％。除１例未获耐药资料外，余９５例ＮＴＭ总耐药率９６％，其中Ｉ型９３％，Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ型分别为５０％、１００％、１００％。１５例Ｉ型ＮＴＭ肺病化疗后１４例痰菌阴转，２３例Ⅲ型、５４例Ⅳ型ＮＴＭ肺病化疗后痰菌阴转分别为６（２６％）、１４（２６％）例，４例Ⅱ型瘰疬分支杆菌肺病临床资料欠完整。结论ＮＴＭ肺病患者病程长，症状不特异，耐药率高，抗结核治疗疗效差。     

MGIT液体培养基检测分枝杆菌效果的评价

目的 应用荧光判读仪手工判读方法对MGIT液体培养基进行快速检测分枝杆菌的效果评价.方法 收集2008年10月至2009年1月上海市各区结核病定点医院初诊患者首次痰标本200份,其中痰涂片法抗酸染色阳性标本67份,阴性标本133份.分别对L-J培养基、BacT/Alert 3D 系统和MGIT液体培养基分枝杆菌分离培养效果比对.结果 200份痰标本中,共分离培养出105株分枝杆菌菌株,检出率为52.5%;MGIT液体培养基检出率为49.5%(99/200),BacT/Alert 3D系统检出率为48.0%(96/200),L-J培养基检出率为45.0%(90/200).MGIT液体培养基分离培养检出率高于L-J培养方法,差异有统计学意义(x2=5.40,P=0.020 1).在133份抗酸染色阴性标本中,用MGIT液体培养基、BacT/Alert 3D系统和L-J培养基分离培养检出率分别为24.8%(33/133)、23.3%(31/133)、18.8%(25/133).MGIT液体培养基和L-J培养基分离培养检出率差异有统计学意义(x2=5.33,P=0.020 9).MGIT液体培养基分离培养阳性报告时间中位数为11 d;BacT/Alert 3D系统分离培养阳性报告时间中位数为15 d;L-J培养基分离培养阳性报告时间中位数为22 d.MGIT液体培养基阳性报告时间短于BacT/Alert 3D系统,差异有统计学意义(Z=3.414,P＜0.01);MGIT液体培养基阳性报告时间短于L-J培养基培养,差异有统计学意义(Z=7.083,P＜0.01).结论 MGIT液体培养基能快速检测分枝杆菌,检出率高,阳性报告时间短,且不需要昂贵仪器,成本低,适合基层实验室推广应用.

Abstract：

Objective To evaluate the effectiveness of MGIT liquid medium fluorescence instrument manual interpretation method for rapid detection of Mycobacterium. Methods Two hundred sputa with newly diagnosed tuberculosis patients were collected from October 2008 to January 2009 in the district hospitals in Shanghai. Of these 200 sputa, 67 sputa were positive AFB, 133 were negative. All the sputa were isolated by L-J, BacT / Alert 3D system and MGIT liquid medium methods. Results Of the 200 sputa specimens,105(52. 5% ) were isolated as Mycobacterium strains. The positive culture rate of the MGIT, BacT/Alert 3D and L-J method was 49. 5% ( 99/200 ), 48. 0% (96/200) and 45.0% ( 90/200), respectively. The MGIT culture positive rate was significantly higher than that of L-J method (x2 = 5.40, P = 0. 020 1 ). Of the 133 sputa with negative AFB, the positive culture rate was 24. 8% ( 33/133 ), 23. 3% ( 31/133 ) and 18. 8% (25/133) with MGIT, BacT/Alert 3D and L-J method, respectively. The MGIT culture positive rate with the AFB negative sputum was significantly higher than that of L-J method (x2 = 5. 33, P = 0. 020 9 ).The median time of detection with MGIT, BacT/Alert 3D system and L-J method was 11 days, 15 days and 22 days, respectively. Comparing the median time of detection of MGIT with BacT/Alert 3D, the difference was statistically significant ( Z = 3.414 ,P ＜ 0. 01 ). Comparing the median time of detection of MGIT with L-J method, the difference was statistically significant (Z =7.083,P＜0. 01).Conclusions MGIT liquid medium manual method is a rapid detection method of Mycobacterium with a high positive detection rate, and do not need expensive equipment This method may suitable to resource limited medical institutions due to its low cost and short round time.     

原发性耐药是耐药结核病产生的重要原因

目的 研究原发性耐药在产生耐药结核病中的作用。方法对上海市疾病预防控制中心收集保存的1996年至2004年结核分枝杆菌临床菌株进行分析统计，计算原发性耐药和获得性耐药的比例；并对16例复发耐药患者前后发病菌株进行结核分枝杆菌散在分布重复单位（mycobacterial interspersed repetitive units，MIRU）基因型比较分析。结果在保存的初治患者的8120株结核分枝杆菌中，耐药菌株707株，耐药率为8．7％；复治患者的菌株610株，耐药菌株150株，耐药率为24．6％。初治和复治患者中耐药率均有上升趋势。以初治患者耐药代表原发性耐药，复治患者耐药代表获得性耐药，其原发性耐药占总耐药菌株的82．5％。在16例复发耐药患者中，13例患者在两次发病时分离的菌株基因型不一致，可能是由于重新感染了耐药菌株所致，属于原发性耐药。结论原发性耐药是目前耐药结核病产生的重要原因，该结果提示有效控制结核病的传染源是减少耐药结核病产生的关键。     

结核分枝杆菌散在分布重复单位基因型分型法的应用研究

目的 建立结核分枝杆菌散在分布重复单位(mycobacterial interspersed repetitive units，MIRU)基因型分型法，评估该方法在我国应用的可行性。方法 采用简单数字表法随机抽取上海地区2000年至2002年保存的菌株，对其进行MIRU分型，并与间隔区寡核苷酸分型法(Spoligotyping)的结果进行比较。结果 用Spoligotyping方法对随机抽样的91株临床菌株进行基因型分型，得到20种基因型，其中81株(89％)属于北京基因型菌株，而用MIRU分型方法可将这些菌株分为46种基因型。81株北京基因型菌株可以分为39种不同的MIRU基因型。12个MIRU位点的多态性分析表明各位点有较大的区别，其中位点26显示了较高的多态性，位点16、31、40显示了中等程度的多态性。结论 MIRU分型方法简单快速，其数字化结果清晰可靠，是一种有效的结核分枝杆菌基因型分型方法。     

结核病痰液检查两种室间质量控制模式效果评价

[目的]了解上海市结核病痰涂片镜检室间质量评估体系(AFB-EQA)的实施情况,评价两种不同质量控制模式对痰涂片镜检工作的指导意义。[方法]采用2001—2003年(旧模式)和2005—2007年(新模式)两种不同EQA模式进行比较。[结果]旧模式痰涂片镜检阳性数复检符合率为100.0%(27 41/2 741),阴性数复检符合率为99.1%(3 388/3 420)。新模式痰涂片镜检阳性数复检符合率为99.5%(656/659),阴性数复检符合率为99.3%(4575/4605)。[结论]新旧两种EQA模式下镜检符合率虽然无统计学差异,但新模式更能真实地反映痰涂片镜检质量,有利于实验室之间互相交流、学习,对规范结核病痰涂片镜检工作有推动作用。