肺孢子虫（菌）p55抗原嵌合基因的克隆及表达产物分析

目的构建肺孢子虫（菌）p55蛋白嵌合基因的原核表达载体,分析、鉴定及纯化表达产物。方法自NCBI网站的蛋白数据库中获取p55抗原及4个变异体信息,运用生物信息学方法预测可能的抗原表位,设计包含多个可能抗原表位的多肽,根据遗传中心法则及大肠杆菌密码子偏好性进行密码子优化,将氨基酸序列转化为核苷酸序列,将人工合成的嵌合基因（CAG）片段连接到质粒pGEX-6p-1（含GST标签）上,构建原核表达载体pGEX-6p-1/CAG,酶切、测序鉴定。pGEX-6p-1/CAG转化大肠杆菌,异丙基-β-D硫代半乳糖苷（IPTG）诱导表达重组融合蛋白CAG-GST。表达产物用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）及Western-blotting分析鉴定。结果双酶切及测序结果显示重组质粒pGEX-6p-1/CAG构建成功。SDS-PAGE显示重组融合蛋白相对分子量约为69 000。Western-blotting结果显示,表达的融合蛋白为CAG-GST。结论成功构建表达p55蛋白嵌合基因的原核表达载体pGEX-6p-1/CAG,建立表达重组蛋白的原核表达系统。     

尿中红细胞形态分析

在日常的尿液分析工作中，经常会看到尿潜血阳性的患者。这些患者既有健康体检的人员，又有门诊或住院的患者。很多无症状的患者都是在每年的健康体检中发现尿潜血阳性，需要进一步做尿中红细形态分析来鉴别其血尿来源。肾小球源性与非肾小球源性血尿鉴别除常规的病史、免疫学、影像学及肾穿刺活检外，尿红细胞的检测是最简单易行的有效方法［1］。并且，还有人把尿沉渣检查称为“体外肾活检”［2］。     

鸦胆子油乳对宫颈癌Hela细胞的抑制作用及其作用机制

目的:探讨鸦胆子油乳对宫颈癌Hela细胞的抑制作用及其可能的机制.方法:采用倒置显微镜及巴氏染色法,观察药物质量浓度分别为5、10 μg/ml作用下细胞形态的变化;用MTT法检测5个不同药物质量浓度(40、20、10、5、2.5 μg/ml)作用下药物对细胞的抑制率;用流式细胞仪检测药物质量浓度分别为10、20 μg/ml的实验组细胞周期的变化.结果:鸦胆子油乳作用后,颈癌Hela细胞形态上都发生了改变,凋亡小体出现;鸦胆子油乳显著抑制了宫颈癌Hela细胞的增殖,作用48 h后各组中抑制率都已超过60%,72 h后抑制率都超过80%;鸦胆子油乳阻滞S期细胞进入G2～M期,并且有凋亡峰,10、20 μg/ml药物作用后细胞凋亡率分别为59.9%、69.8%.结论:鸦胆子油乳可有效抑制宫颈癌Hela细胞的增殖且呈时间依赖性,其机制可能与诱导细胞凋亡和阻滞细胞于S期有关.     

枸杞多糖对睡眠剥夺大鼠血液中T细胞亚群及相关炎性因子的影响

目的 分析枸杞多糖(Lycium barbarum polysaccharides,LBP)对睡眠剥夺大鼠血液中T细胞亚群型的数量、相关炎性因子以及大鼠行为能力的影响，探讨LBP对睡眠剥夺大鼠的免疫保护机制。方法 将SD大鼠通过“多平台水环境”技术成功制备剥夺睡眠大鼠模型，按照干预方法将其均等分成3组(模型组、LBP干预组及西药干预组)，每组6只，同时把6只健康同种属大鼠作为对照组。在建模成功后4组鼠每天的干预用药不同，LBP干预组：灌服LBP(0.54 mg/kg)，西药干预组：灌服舒乐安定(6 g/kg)，模型组和对照组：灌服等容量三蒸水，持续用药4周。检测血液中T淋巴细胞亚群CD3⁺T细胞、CD4⁺T细胞、CD8⁺T细胞的比例以及CD4⁺T/CD8⁺T的比值；ELISA检测血液中肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、γ-干扰素(interferon-γ,IFN-γ)、白介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、白介素...