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目的 观察稳定转染HMGA1基因的小分子干扰RNA(siRNA)对卵巢上皮性癌(卵巢癌)细胞生物学特性的影响.方法 实验分为3组,反义序列载体(卵巢癌细胞系OVCAR细胞转染载有HMGA1基因siRNA序列的pSilence4.1-CMV-Hs质粒)、无关序列载体(OVCAR细胞转染载有HGMA1基因无关序列的pSilence4.1-CMV-Hn质粒)和空白对照组(OVCAR细胞仅转染脂质体),3组均经抗性筛选获得稳定转染的细胞系.采用RT-PCR技术、蛋白印迹法检测3组细胞中HMGA1mRNA和蛋白的表达;四甲基偶氮唑蓝比色法观察细胞增殖情况,绘制细胞生长曲线;体外侵袭实验观察3组细胞转染前后侵袭能力的变化;裸鼠接种3组细胞后观察其成瘤能力的变化.结果 (1)反义序列载体组转染前、后OVCAR细胞中HMGA1 mRNA表达水平分别为(86.3±2.7)%和(35.8±3.1)%,HMGA1蛋白表达水平分别为(68.6±2.8)%和(22.3±4.2)%,分别比较,差异均有统计学意义(P<0.05);无关序列载体组和空白对照组转染前、后HMGA1 mRNA和蛋白表达水平分别比较,差异均无统计学意义(P>0.05).(2)反义序列载体组OVCAR细胞增殖速度明显慢于无关序列载体组和空白对照组(P<0.05).(3)转染前、后的穿膜细胞数,反义序列载体组分别为(53±6)和(21±6)个,两者比较,差异有统计学意义(P<0.05);无关序列载体组和空白对照组转染前、后的穿膜细胞数分别比较,差异均无统计学意义(P>0.05).(4)接种转染后的OVCAR细胞后,反义序列载体组裸鼠的成瘤时间为(6.0±0.9)d,明显短于无关序列载体组的(12.3±3.9)d和空白对照组的(13.0±2.3)d(P<0.05).接种5周后,反义序列载体组裸鼠的肿瘤重量和体积分别为(0.8±0.3)g和(205±34)mm~3,分别与无关序列载体组[分别为(2.1±0.4)g和(987±82)mm~3]和空白对照组[分别为(2.3±0.3)g和(956±79)mm~3]比较,差异均有统计学意义(P<0.05).结论 HMGA1 siRNA可显著降低卵巢癌细胞中HMGA1基因的表达,并对卵巢癌细胞的生长有抑制作用. 相似文献
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目的探讨超声评分系统结合血清附睾分泌蛋白4(human epididymal secretory protein 4,HE4)、CA125检测结果,对卵巢肿瘤的诊断意义。方法选取卵巢癌78例(卵巢癌组),卵巢良性肿瘤102例(卵巢良性肿瘤组),检测两组血清HE4及CA125水平,以80例健康人为对照组,制作受试者工作特征(ROC)曲线,以曲线下面积(AUC)反映诊断的准确性。对两组患者进行超声评分,分别计算超声评分系统与肿瘤标志物联合对卵巢癌诊断的敏感性、特异性。结果卵巢癌组血清HE4及CA125水平明显高于卵巢良性肿瘤组和对照组,差异均有统计学意义(P〈0.05);卵巢良性肿瘤组与对照组间比较,HE4差异无统计学意义(P〉0.05),CA125差异有统计学意义(P〈0.05)。HE4诊断卵巢癌的敏感性、特异性分别为94.3%,96.1%;CA125诊断卵巢癌的敏感性、特异性分别为87.4%,94.2%。HE4联合超声评分系统敏感度为为91.4%;CA125联合超声评分系统为85.7%;HE4、CA125、超声评分系统三项联合检测为96.1%。结论血清HE4、CA125联合超声评分系统诊断卵巢肿瘤的敏感性最高。 相似文献
3.
子宫肌瘤是生殖期妇女最常见的良性肿瘤 ,其发生有明显的种族差异和家族遗传倾向 ,该文综述了子宫肌瘤的细胞遗传学改变与基因表达的异常 ,阐明其在子宫肌瘤病因学中的作用。 相似文献
4.
目的:探讨ING4基因在表达上调的卵巢上皮性癌(卵巢癌)细胞系OVCAR细胞中对顺铂耐药性的影响。方法:脂质体介导的ING4-Ad及相应阴性对照片段转染人卵巢癌细胞OVCAR,实验分为3组:转染组、阴性对照组、空白对照组。实时荧光定量PCR技术检测3组细胞中ING4基因的表达;采用四甲基偶氮唑蓝( MTT)法测定各组细胞增殖抑制率和绘制细胞生长曲线,集落形成实验测定细胞生长能力,检测3组细胞对顺铂的敏感性,及不同浓度顺铂和作用不同时间后3组细胞生长的抑制率和凋亡率及细胞周期变化。结果:转染组、阴性对照组及空白对照组OVCAR细胞中ING4的表达量分别为66.76±11.40、1.28±0.09、1.22 相似文献
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目的:运用基因芯片技术研究宫颈息肉组织炎症相关基因的表达谱,并探讨相关基因在宫颈息肉发病机制中的作用。方法:将按微距阵排列的509条炎症相关全长基因制成表达谱芯片。分别抽提8例宫颈息肉组织和宫颈黏膜组织的总RNA,逆转录成互补DNA(complementary DNA,cDNA)一链,并用cy5和cy3标记制备成杂交探针,混合后在3张炎症相关基因芯片上进行杂交,扫描仪扫描芯片荧光信号图像,对扫描图像进行数字化处理和分析。结果:宫颈息肉组织炎症基因表达谱中差异表达的基因共65条,其中上调基因35条,下调基因30条。3张芯片共存的差异基因16条,其中上调基因6条,下调基因10条。在差异表达的基因中,主要包括细胞因子及其受体、趋化因子及其受体、黏附分子、白细胞分化抗原、炎症信号传导分子,还包括一些补体分子及其受体。结论:宫颈息肉炎症相关基因表达谱中差异表达基因为研究宫颈息肉发病机理提供了线索,炎症反应和免疫应答可能是宫颈息肉形成和发展的重要机制。 相似文献
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目的:探讨高迁移率蛋白家族A1(high mobility group A1,HMGA1)基因小分子干扰RNA对卵巢癌转移抑制的机理.方法:RT-PCR一步法检测3种不同的卵巢癌细胞株中HMGA1、E钙黏蛋白mRNA的表达水平;设计并合成HMGA1 siRNA,转染HO8910PM细胞:半定量RT-PCR分析法观察HMGA1 siRNA转染对E钙黏蛋白mRNA表达的逆转作用,及对卵巢癌细胞株体外侵袭、运动的抑制作用.结果:RT-PCR半定量分析结果显示:OVCAR-3细胞中HMGA1 mRNA表达量相对较低(0.64±0.13),而E-钙黏蛋白mRNA仅在OVCAR-3细胞中有表达;HO8910PM细胞稳定转染HMGA1 siRNA后,转染组、对照组HMGA1 mRNA表达水平分别为0.16±0.08、0.47±0.11(P<0.01),E 钙黏蛋白mRNA表达水平分别 为0.38±0.07、0.09±0.05(P<0.01);体外运动实验显示,跨膜细胞数转染组明显低于对照组(P<0.05);重组细胞基底膜侵袭实验显示,穿透基底膜细胞数转染组明显低于对照组(P<0.01).结论:HMGA1基因与卵巢癌转移密切相关,HMGA1 基因siRNA 可上调卵巢癌细胞中E钙黏蛋白的表达,抑制卵巢癌细胞的运动和侵袭,为卵巢癌转移的基因治疗提供新的靶点. 相似文献
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HMGA1蛋白是高迁移率族蛋白(high mobility group,HMG)家族成员,HMG是细胞核内非组蛋白中的一组比较丰富而不均一的富含电荷的蛋白,在正常成人组织中无或仅有微量表达.由于HMGA1基因位于许多肿瘤细胞染色体断裂点的簇集区,它的异常表达与肿瘤的关系已日益引起关注. 相似文献
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三氧化二砷诱导小细胞肺癌细胞凋亡及p53、bcl-2基因表达的研究 总被引:21,自引:1,他引:21
目的:研究三氧化二砷(As2O3)诱导小细胞肺癌细胞凋亡及其机制。方法:采用末端脱氧核苷酰转移(TUNEL)法检测细胞凋亡,免疫组织化学(SABC)法分析As2O3对小细胞肺癌细胞(NeI-H细胞)p53、bcl-2基因蛋白表达的影响。结果:As2O30.5μmol/L、1.0μmol/L、2.0μmol/L作用72h,NeI-H细胞均可呈现凋亡所特有的亚G1峰,凋亡比率随药物作用浓度增加和作用时间延长而增高。实验组p53基因蛋白表达较对照组明显增多,药物浓度越高表达越多(P=0.001);bcl-2基因蛋白表达较对照组明显减少,药物作用浓度越高表达越少(P=0.001)。结论:As2O3抗肿瘤作用主要是通过诱导细胞凋亡实现的,其机制与上调p53基因表达及下调bcl-2基因表达有密切关系。 相似文献
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本科遇 1例下鼻甲良性梭形细胞肌上皮瘤侵及上颌窦 ,因肿瘤较大且罕见 ,外院误诊为恶性肿瘤 ,报道如下。患者男 ,6 8岁 ,因右鼻塞 3年 ,加重伴流黄水及头疼 1年于 1998年 3月 3日收入院。患者自 1995年始无明显诱因出现右鼻塞 ,渐进性加重 ,经抗生素及滴鼻药物治疗无明显好转 ,鼻塞严重时感心慌、气短、脾气暴躁、易怒。近 1年又出现左侧鼻塞 ,伴右鼻流黄水样分泌物及头疼。曾因心慌、心悸以非典型性心肌梗塞收入心血管内科治疗 ,无明显好转 ,CT扫描见右鼻腔肿物收入我科。既往有糖尿病史 8年。全身检查 :表现为焦虑易怒 ,卧床或坐位 ,不… 相似文献