经冠状动脉内自体骨髓干细胞移植对不同基础心功能影响及其机制探讨

目的：通过建立小型猪心肌梗死模型，引起不同程度心功能变化，进行冠状动脉内自体骨髓细胞移植，探讨骨髓干细胞移植除与血管新生相关外，是否与动物基础心功能水平和侧枝循环变化相关。方法：结扎小型猪不同部位左前降支血管，造成不同程度心功能变化，2周后经冠状动脉内移植骨髓单个核细胞或盐水。冠脉造影评估侧枝循环情况；左室造影检测左室射血分数（LVEF）变化；组织学检测新生血管数量。结果：移植后4周，注射PBS组动物LVEF呈进行性下降，各降低15．5％和14．2％（P〈0．01）；低EF＋BMT组较移植前增加14．4％（P〈0.01），而高EF＋BMT组较移植前仅增加5．6％（P〉0．05）。冠脉造影显示，骨髓干移植组侧枝循环数量较移植前增加，但无显著差异（P〉0．05），注射PBS组也无显著变化（P〉0．5）。碱性磷酸酶法显示，骨髓干移植组新生血管密度较注射PBS组增加（P〈0．01），而低EF组移植骨髓干细胞引起的新生血管密度较高EF组增加63％（P〈0．01）。相关分析显示，骨髓干细胞移植引起低EF组的心功能增加幅度与新生血管和基础心功能呈良好正相关（P〈0．05），与侧枝循环级别增加无明显相关性（P〉0．05）。结论：经冠状动脉内自体骨髓细胞移植更有利于低基础水平心脏功能恢复，其作用机制与血管新生和基础心功能水平密切相关。     

纯化人源骨髓单克隆间充质细胞移植更利于梗死心脏功能恢复

目的通过制备大鼠心肌梗死模型,分别移植经纯化了的人源骨髓单克隆间充质干细胞(SCMSCs)、未纯化的间充质细胞和单个核细胞及外周血单个核细胞,旨在比较SCMSCs移植是否更有利于心脏功能改善。方法应用磁珠分选和极限稀释细胞培养方法获取SCMSCs,利用贴壁培养方法得到未纯化的骨髓间充质细胞,利用梯度密度离心法得到骨髓单个核细胞和外周血单个核细胞。流式细胞仪分析所得细胞特性后,将其移植到梗死心脏。术后1个月,应用血流动力学技术检测大鼠心脏功能,随后取材,以免疫荧光检测移植细胞的分化情况,用碱性磷酸法计算血管密度。结果流式分析结果显示,SCMSCs99%以上表达间充质干细胞标记蛋白,阴性表达造血细胞标记蛋白。功能检测显示,移植SCMSCs心脏收缩功能(LVdP/dtmax)较明显高于其他各组。血管计数显示,SCMSC组血管密度明显高于其他各组。免疫荧光结果显示,移植的SCMSCs向心肌细胞和血管内皮细胞转化效率明显高于其他骨髓细胞,外周血细胞并不发现分化。结论经纯化均一的SCMSCs移植较目前常用的未纯化、不均一的干细胞移植更利于梗死心脏收缩功能恢复。     

梗死心肌血管微环境对经冠状动脉内移植骨髓干细胞疗效的影响

目的观察梗死区侧支循环对冠状动脉(冠脉)内骨髓干细胞移植术心肌修复疗效的影响。方法结扎猪左前降支建立心肌梗死模型,2周后行冠状动脉造影进行梗死区侧支循环Rentrop评分,取分值为0(R0)或1(R1)的动物各10头,经冠脉内注射骨髓单个核细胞(BMMNCs)或等体积磷酸盐缓冲液(PBS,对照组),随机分为R0 BMT,R0 PBS,R1 单个核细胞移植(BMT)和R1 PBS4组(n=5)。结果梗死后6周,R1 BMT组Rentrop积分显著升高;R0 BMT与R1 BMT两组心功能均明显提高,以R1 BMT组最显著;血管新生和移植细胞数量在R1 BMT组最明显。结论冠脉内移植BMMNCs对梗死心肌有修复作用,而梗死区侧支循环的存在放大其疗效。