骨髓间充质干细胞与乳鼠心肌细胞共移植对心梗后左心室重构和心功能的影响

目的研究骨髓间充质干细胞（BMSC）与乳鼠心肌细胞共移植的细胞替代作用,进而防止左室重构,增强心肌梗死后心功能的恢复。方法制作大鼠心梗模型的大鼠随机分为对照组,心肌细胞组（移植乳鼠心肌细胞）,BMSC移植组和共移植组（移植乳鼠心肌细胞和BMSC）。分别在移植前1d,移植后4周和12周,用超声心动图测量各组大鼠心功能的情况。干细胞移植12周,测量各组大鼠的质量,左室与质量比值和心梗面积并进行比较。结果移植后12周,心肌移植组,BMSC移植组和共移植组的左室缩短分数（FS）和左室射血分数（LVEF）有所增加（P<0.05）,而对照组则出现数值下降（P<0.05）。心功能改善:共移植组>BMSC移植组或心肌细胞移植组>对照组。移植后4周,BMSC移植组和共移植组的FS和LVEF有所增加（P<0.05）,而对照组和心肌移植组则出现数值下降（P<0.05）。心功能改善:共移植组>MSC移植组,对照组和心肌移植组差异不显著。移植12周后,心梗面积,左室质量,室体比值和心脏大小之间比较皆为:对照组>心肌细胞移植组>BMSC移植组>共移植组>正常组。结论与MSC和心肌细胞单独移植相对比,共移植能够促进心功能恢复,减轻左室质量,缩小心梗面积,进一步防止心梗后的心室重构。     

卡马西平联合盐酸洛美利嗪治疗原发性偏头痛的疗效观察

目的:探讨卡马西平联合盐酸洛美利嗪治疗原发性偏头痛的疗效观察。方法:选取2017年9月~2018年1月收治的98例原发性偏头痛患者进行随机对照实验,分为观察组和对照组,各49例。对照组给予盐酸洛美利嗪胶囊治疗,观察组在对照组基础上给予卡马西平治疗。对比两组治疗前后匹兹堡睡眠质量指数量表评分、视觉模拟评分法疼痛评分及血清一氧化氮和内皮素-1水平变化。结果:治疗后两组匹兹堡睡眠质量指数量表评分、视觉模拟评分法疼痛评分均低于治疗前,且观察组显著低于对照组(P<0.05);两组血清一氧化氮和内皮素-1水平均较治疗前显著降低,且观察组低于对照组(P<0.05)。结论:对原发性偏头痛患者行卡马西平联合盐酸洛美利嗪治疗,可显著缓解患者疼痛,改善睡眠质量,调节血清指标。     

病毒性脑炎

病毒性脑炎是由于脑实质感染了病毒的结果,常常伴有脑膜炎,由此合称为脑膜脑炎。常急性起病,由于感染的进一步发展,可能会严重影响脑功能,有时甚至是不可逆的。     

骨髓间充质干细胞体外对H_2O_2损伤大鼠心肌细胞的保护

目的:观察骨髓间充质干细胞(bone mesenchymal stem cells,BMSC)对过氧化氢(H2O2)诱导乳鼠心肌细胞凋亡蛋白Bcl-2家族的影响。方法:培养新生大鼠的心肌细胞,分为3组,即对照组、模型组和BMSC处理组。用Transwell小室建立心肌细胞与BMSC共培养体系,分别于培养12、24和48h,采用MTT比色法检测单孔细胞的存活率;用Western blot法检测凋亡蛋白Bcl-2和Bax的表达。结果:模型组细胞和BMSC处理组细胞在H2O2的诱导下出现细胞凋亡。造模12h后,模型组细胞的存活率明显低于对照组(P0.05);BMSC处理组细胞的存活率与模型组相比无明显差异。造模24h和48h后,BMSC处理组细胞的存活率与模型组差异明显(P0.05)。造模12h后,Bax和Bcl-2蛋白的表达无明显变化。造模24h后,BMSC处理组细胞中Bax蛋白的表达明显低于模型组(P0.05),Bcl-2蛋白的表达虽有变化,但无统计学意义。结论:BMSC可调控心肌细胞线粒体凋亡途径,减轻氧自由基对心肌细胞的损伤,其抑制凋亡的作用可能是通过下调Bax蛋白的表达而实现的。     

辛伐他汀对大鼠急性心肌梗死心肌细胞凋亡的实验研究

目的:观察辛伐他汀预处理对大鼠急性心肌梗死后心肌细胞凋亡的影响。方法:30只大鼠随机分为三组。假手术组,心肌梗死组,辛伐他汀组(给予40 mg/kg灌胃),每组10只。所有动物均灌胃7 d,1次/d。第7 d,假手术组只开胸不结扎;心肌梗死组和辛伐他汀组结扎大鼠左冠状动脉前降支建立急性心肌梗死模型。在造模型24 h后,处死动物。用TUNEL法检测心肌组织中凋亡心肌细胞,生化法检测血清肌酸激酶同工酶活性和血脂水平。结果:辛伐他汀组较心肌梗死组凋亡细胞数减少,差异有统计学意义(P<0.05)。辛伐他汀组较心肌梗死组显著降低血清肌酸激酶同工酶活性,差异有统计学意义(P<0.01)。血脂水平差异无统计学意义(P>0.05)。结论:辛伐他汀具有保护心肌,减少急性缺血对心肌的损伤和心肌梗死后心肌细胞凋亡等作用,本研究为拓宽他汀类药物临床应用范围提供了实验依据。     

骨髓间充质干细胞对CD117^＋心脏干细胞分化过程中转化生长因子βⅢ型受体表达的影响

背景：骨髓间充质干细胞能够促进心肌细胞、血管生成。减轻心肌重构、改善心功能。但其旁分泌作用能否能够通过影响转化生长因子βⅢ型受体促进CD117^＋心脏干细胞的分化尚不清楚。目的：观察骨髓间充质干细胞对CD117^＋心脏干细胞分化过程中转化生长因子3型受体表达的影响。设计、时间及地点：细胞学体外对比观察,于2008-02/2009-02在新华医院完成。材料：新生大鼠,体质量5-8g,用于心脏干细胞分离培养：4周龄SD大鼠,体质量200-250g,用于骨髓间充质干细胞培养。方法：分离大鼠心肌组织进行植块培养,体外磁珠分离培养大鼠心脏干细胞,免疫荧光鉴定其表型为CD117^＋。将获得的CD117^＋心脏干细胞吹打制成单细胞悬液,无血清同步化24h,PBS冲洗3次,加入DMEM／F12培养基,接种至破明胶包被的6孔板。实验分为对照组和共培养组,对照组用心肌球培养液诱导分化的心脏干细胞。共培养组用Transwell小室避免细胞融合建立心脏干细胞与骨髓间充质干细胞共培养体系。主要观察指标：①倒置显微镜下观察心脏干细胞生长情况。（2）Westernblot检测CD117^＋心脏干细胞向心肌细胞系分化过程中培养第1,3,5,7天心肌钙蛋白T、缝隙连接蛋白43、转化生长因子βⅢ型受体和smad2及其磷酸化程度的改变。结果：①植块培养和磁珠分离法结合分离出CD117心脏干细胞,传代后心脏干细胞分散生长,细胞略小于普通心肌细胞。②诱导分化后第5,7天,共培养组心肌钙蛋白T和缝隙连接蛋白43的表达高于对照组（P〈0．05）;诱导分化后第1—7天,转化生长因子βⅢ型受体的表达均高于对照组（P〈0．05）：同时,磷酸化smad2／smad2的值也高于对照组（P〈0．05）。结论：骨髓间充质干细胞旁分泌作用能够促进CD117^＋心脏干细胞内心肌钙蛋白T,缝隙连接蛋白43和转化生长因子βⅢ型受体的表达,并提高了smad2蛋白的磷酸化程度。     

对心脏原位干细胞的初步认识

最近的研究提出并证明了心脏原位干细胞的存在。本文对其提出的背景、存在的确认,及其的发展方向进行了预测。     

骨髓间充质干细胞对CD117+心脏干细胞分化过程中转化生长因子βⅢ型受体表达的影响

背景:骨髓间充质干细胞能够促进心肌细胞、血管生成,减轻心肌重构、改善心功能.但其旁分泌作用能否能够通过影响转化生长因子βⅢ型受体促进CD117+心脏干细胞的分化尚不清楚.目的:观察骨髓间充质干细胞对CD117+心脏干细胞分化过程中转化生长因子βⅢ型受体表达的影响.设计、时间及地点:细胞学体外对比观察,于2008-02/2009-02在新华医院完成.材料:新生大鼠,体质量5～8 g,用于心脏干细胞分离培养;4周龄SD大鼠,体质量200-250 g,用于骨髓间充质干细胞培养.方法:分离大鼠心肌组织进行植块培养,体外磁珠分离培养大鼠心脏干细胞,免疫荧光鉴定其表型为CD117+.将获得的CD117+心脏干细胞吹打制成单细胞悬液,无血清同步化24 h,PBS冲洗3次,加入DMEM/F12培养基,接种至被咀胶包被的6孔板.实验分为对照组和共培养组,对照组用心肌球培养液诱导分化的心脏干细胞,共培养组用Transwell小室避免细胞融合建立心脏干细胞与骨髓间充质干细胞共培养体系.主要观察指标:①倒置显微镜下观察心脏干细胞生长情况.②western blot检测CD117+心脏干细胞向心肌细胞系分化过程中培养第1,3,5,7天心肌钙蛋白T、缝隙连接蛋白43、转化生长因子βⅢ型受体和smad2及其磷酸化程度的改变.结果:①植块培养和磁珠分离法结合分离出CD117+心脏干细胞,传代后心脏干细胞分散生长,细胞略小于普通心肌细胞.②诱导分化后第5,7天,共培养组心肌钙蛋自T和缝隙连接蛋白43的表达高于对照组(P<0.05);诱导分化后第1～7天,转化生长因子βⅢ型受体的表达均高于对照组(P<0.05);同时,磷酸化smad2/smad2的值也高于对照组(P<0.05).结论:骨髓间充质干细胞旁分泌作用能够促进CD117+心脏干细胞内心肌钙蛋白T,缝隙连接蛋白43和转化生长因子βⅢ型受体的表达,并提高了smad2蛋白的磷酸化程度.     

生物标志物在缺血性脑卒中应用的研究进展

随着社会的老龄化,脑卒中的发病率急剧增高。国际间比较研究显示,我国人群的脑卒中发病率高于国际平均水平,其中缺血性卒中占60%～80%。由于目前对于脑卒中的发病机制尚未明确,且无有效的治疗方法,其病死率和致残率居高不下,已成为严重影响国计民生的重要公共卫生问题。临床医师都在积极寻找脑卒中病因,特别是寻找支持脑卒中诊断的生物标志物,这对指导脑卒中的治疗并改善患者预后具有重要的临床价值[1]。     

骨髓间充质干细胞对CD117+心脏干细胞分化过程中转化生长因子βⅢ型受体表达的影响

背景：骨髓间充质干细胞能够促进心肌细胞、血管生成,减轻心肌重构、改善心功能。但其旁分泌作用能否能够通过影响转化生长因子βⅢ型受体促进CD117+心脏干细胞的分化尚不清楚。 目的：观察骨髓间充质干细胞对CD117+心脏干细胞分化过程中转化生长因子βⅢ型受体表达的影响。 设计、时间及地点：细胞学体外对比观察,于2008-02/2009-02在新华医院完成。 材料：新生大鼠,体质量5~8 g,用于心脏干细胞分离培养;4周龄SD大鼠,体质量200~250 g,用于骨髓间充质干细胞培养。 方法：分离大鼠心肌组织进行植块培养,体外磁珠分离培养大鼠心脏干细胞,免疫荧光鉴定其表型为CD117+。将获得的CD117+心脏干细胞吹打制成单细胞悬液,无血清同步化24 h,PBS冲洗3次,加入DMEM/F12培养基,接种至被明胶包被的6孔板。实验分为对照组和共培养组,对照组用心肌球培养液诱导分化的心脏干细胞,共培养组用Transwell小室避免细胞融合建立心脏干细胞与骨髓间充质干细胞共培养体系。 主要观察指标：①倒置显微镜下观察心脏干细胞生长情况。②Western blot检测CD117+心脏干细胞向心肌细胞系分化过程中培养第1,3,5,7天心肌钙蛋白T、缝隙连接蛋白43、转化生长因子βⅢ型受体和smad2及其磷酸化程度的改变。 结果：①植块培养和磁珠分离法结合分离出CD117+心脏干细胞,传代后心脏干细胞分散生长,细胞略小于普通心肌细胞。②诱导分化后第5,7天,共培养组心肌钙蛋白T和缝隙连接蛋白43的表达高于对照组(P < 0.05);诱导分化后第1~7天,转化生长因子βⅢ型受体的表达均高于对照组(P < 0.05);同时,磷酸化smad2/smad2的值也高于对照组(P < 0.05)。 结论：骨髓间充质干细胞旁分泌作用能够促进CD117+心脏干细胞内心肌钙蛋白T,缝隙连接蛋白43和转化生长因子βⅢ型受体的表达,并提高了smad2蛋白的磷酸化程度。