白细胞介素Ⅰ受体拮抗剂基因多态性与习惯性流产的关系

目的 探讨白细胞介素Ⅰ受体拮抗剂基因(interleukin-1 receptor antagonist gene,IL1RA)多态性与原因不明习惯性流产的相关性.方法 应用聚合酶链反应技术,检测了97例习惯性流产患者(患者组)和99名正常孕妇(对照组)的白介素Ⅰ受体拮抗剂基因进行扩增,并用琼脂糖凝胶电泳观察结果.*1为%,IL1RA 3/3 91.8%,等位基因分布:IL1RA结果习惯性流产患者基因型分布:IL1RA 1/3 8.2*3为95.9%;正常孕妇基因型分布:IL1RA 1/3为8.1%,IL1RA 3/3为90.9%,IL1RA 3/4%,IL1RA4.1*1为4.0%,IL1RA*3为95.5%,IL-1RA*4为0.5%,两组间差异无统%,等位基因分布:IL1RA为1.0计学意义(P>0.05).结论 原因不明习惯性流产患者IL1RA基因多态性的分布与正常孕妇无明显相关性.     

人类白细胞抗原-G突变体cDNA克隆及在K562细胞上的表达

目的：克隆人类白细胞抗原-G(Human leukocyte antligen-G，HLA-G)突变体cDNA，并使其在HLA-I类阴性的K562细胞上获得稳定表达，为研究配-受体之间的识别机制奠定基础。方法：用RT-PCR方法从人子宫蜕膜组织扩增出HLA-GcDNA，得到全长HLA-GPCR产物后，用桥式PCR方法进行定点点突变，将突变的目的基因亚克隆于逆转录，将突变的目的基因亚克隆于逆转录mG-pLNCX表达载体，采用感染的方法将重组质粒转入K562细胞，最后经G418筛选及有限稀释，利用单克隆抗体W6/32进行FACS及mRNA检测，观察HLA-G突变体在靶细胞表面的表达。结果：HLA-G突变体分子在经mG-pLNCX转染的靶细胞表面获得稳定高表达。结论：成功构建了mG-pLNCX表达载体，并使HLA-G突变体分子在HLA-I类阴性的靶细胞K562细胞上获得稳定表达。     

人KIR2DL1-Ig融合蛋白在COS-7细胞的表达

目的：获得人KIR2DL1分子(killer lg—like receptor 2DL1)胞外区与人IgG Fc段的融合蛋白。方法：从人外周血单个核细胞中提取总RNA，通过RT—PCR扩增编码KIR2DL1胞外段cDNA，经Nhe Ⅰ和BamH Ⅰ双酶切后，定向插入真核细胞表达载体CD51negl中。构建的重组真核表达载体CD51negl—KIR2DL1。经酶切分析和测序鉴定后，通过DEAE—dextran／ehloroquine法转染COS—7细胞：瞬时表达后，取培养上清液经亲和层析、ELISA、SDS—PAGE及Western印迹，鉴定融合蛋白的表达及其免疫学活性。结果：序列测定证实，该重组表达载体含有正确的KIR2DL1胞外区基因序列。重组真核表达载体CD5lnegl—KIR2DL1转染COS—7细胞后，ELISA法检测细胞培养上清中有融合蛋白的表达。SDS—PAGE结果显示，该融合蛋白的相对分子质量(Mc)约为73000。Western印迹结果证实，该蛋白能被特异性单克隆抗体(mAb)EB6所识别。结论：KIR2DL1—Ig融合蛋白表达载体成功构建并在COS—7细胞中获得功能性表达，为KIR2DL1的功能及其配体MHC的研究奠定了基础。     

不同方法学检测急性髓系白血病 MPO阳性率的比较及意义

目的 比较免疫组化、细胞化学及流式细胞学3种方法检测急性髓系白血病(AML)胞内MPO阳性率的差异及临床意义。 方法 对90例AML患者同时进行骨髓活检组织免疫组织化学染色,细胞涂片细胞化学染色及骨髓流式细胞学分析,检测MPO表达情况。结果 3种方法联合检测,AML患者MPO总阳性率为95.5%,其中免疫组织化学、细胞化学及流式细胞学方法检测MPO阳性率分别为66.7%、93.3%及87.8%,以免疫组化方法检测MPO敏感度最低,明显低于细胞化学和流式细胞学检测方法(P均＜0.05),而细胞化学与流式细胞学法比较,MPO表达率差异无统计学意义(P＞0.05);AML患者中,除M7外,以M5患者MPO阳性率最低(88.9%),其中免疫组织化学法MPO的检出率最低(37.0%),明显低于细胞化学法(88.9％,P＜0.05),但与流式细胞学方法比较,差异无统计学意义(P＞0.05)。结论 细胞化学及流式细胞术检测AML患者MPO表达的阳性率优于活检组织的免疫组化法,三者结合比单独一种更有利于AML与急性淋巴细胞白血病的鉴别诊断。     

HLA-G与NK细胞

自然杀伤细胞(natural killer,NK)是天然免疫系统的主要效应细胞,是机体抵抗肿瘤和病毒感染的第一道防线。人类白细胞抗原-G(human leukocyte antigen-G,HLA-G)属于非经典的HLAⅠ类分子,是机体内一个重要的免疫耐受分子。HLA-G抗原对NK细胞的免疫调节功能一方面是依赖于一系列杀伤细胞免疫球蛋白样受体,另一方面是通过调节NK细胞多种趋化因子受体表达。本文就HLA-G对NK细胞调节功能的研究进展作一综述。     

HLA-G多态性研究进展

HL A- G是非经典的 HL A- I类分子 ,限制性地表达在母胎界面的组织细胞上 ,对它在妊娠过程中所发挥的作用已引起广泛的兴趣 ,在肿瘤细胞的免疫逃逸方面的功能也日益受到重视 ,虽有各种假说 ,但具体的作用机制仍不清楚。 HL A- G多态性研究是探讨其作用机制的一条重要途径 ,近年来许多学者在这方面做了大量的工作 ,力求通过 HL A- G基因水平的研究进一步阐明 HL A - G的功能及作用机理。本文就 HL A - G基因结构、基因多态性及其与疾病相关性等方面作简要阐述     

临床肿瘤治疗药物相关基因的研究进展

肿瘤化学药物治疗已经在临床上得以广泛应用，但患者对各类治疗药物的敏感性和不良反应存在明显个体差异，药物相关基因指导下的临床肿瘤药物的个体化治疗是肿瘤治疗最重要的发展方向之一。本文主要介绍了5个与临床抗肿瘤药物疗效及毒性相关的基因：二氢嘧啶脱氢酶(DPD)基因突变与5-氟尿嘧啶(5-Fu)的毒性反应；表皮生长因子受体(EGFR)突变与非小细胞肺癌(NSCLC)中吉非替尼、特罗凯的疗效；核苷酸切除修复酶1(ERCC1)基因多态性与铂类化合物疗效；UDP葡萄糖醛酸转移酶1A1(UGT1A1)的遗传变异与羟基喜树碱的毒性反应；胸腺酸合成酶(TS)基因多态性与5-Fu的敏感性，探讨如何预测肿瘤治疗药物的敏感性及不良反应，以指导临床个体化用药。     

杭州地区人体隐孢子虫病26例报告

隐孢子虫是一种肠道原虫 ,近年来发现它是引起腹泻的重要病原体。我们于 1 999年 4～ 7月 ,对肠道门诊患者进行粪便改良抗酸染色法和免疫荧光法检查隐孢子虫 ,现将结果报告如下。一、材料和方法　 (1 )对象　浙江大学医学院附属儿童医院肠道门诊杭州地区腹泻儿童。(2 )方法　采用改良抗酸染色法[1] 和间接免疫荧光法 ,试剂由美国 Merifluor公司提供。二、结果　在 30 0例腹泻儿童患者中 ,检出隐孢子虫 2 6例 ,男 1 4例 ,女 1 2例。年龄从不足周岁到1 2岁。患儿多数表现为急性胃肠炎 ,伴有体温升高 ,37.5℃～ 39℃。患儿的粪便常规检查中有 …     

HLA-G与移植免疫

非经典HLA Ⅰ类分子(HLA-Ⅰb)HLA-G参与抗原递呈,通过相应受体调节NK细胞及T淋巴细胞功能,是一个 重要的免疫调节分子。HLA-G分子的免疫调节作用已从母胎免疫耐受扩展到肿瘤免疫、抗感染免疫和器官移植免疫等领域, 近年来在移植免疫方面取得了重要进展。     

细菌脂多糖促进克氏锥虫抗原诱导的自身免疫性心肌炎

目的观察细菌脂多糖（LPS）对克氏锥虫抗原诱导自身免疫性心肌炎的影响。方法克氏锥虫抗原辅以完全弗氏佐剂免疫A／J小鼠，LPS经腹腔接种方式给药，其后加强免疫2次，28d后，测定心肌肌球蛋白特异的迟发型超敏反应（DTH）及自身抗体，并取鼠心脏观察心肌炎症情况。结果LPS提高锥虫抗原诱导的心肌肌球蛋白特异性DTH及自身抗体。并且25μg LPS与锥虫抗原免疫的小鼠可见明显的心肌炎。结论LPS能够促进心肌肌球蛋白特异的自身免疫反应及锥虫抗原诱导的自身免疫性心肌炎。