荧光PCR探针熔解曲线法检测结核分枝杆菌耐药性的价值

搜集全部2017年9月至2019年8月西安市胸科医院确诊的结核病住院患者546例作为研究对象,评价荧光聚合酶链反应(polymerase chain reaction, PCR)探针熔解曲线法(简称“熔解曲线法”)检测结核分枝杆菌(MTB)耐药性的临床应用价值。收集患者痰标本,每份标本量均不少于2ml。经菌种鉴定,最终纳入531例(株)为研究对象。每例患者采用同一标本进行BACTEC MGIT 960液体培养药物敏感性试验(简称“MGIT 960药敏试验”)和熔解曲线法耐药基因检测,对MGIT 960药敏试验和熔解曲线法检测利福平、异烟肼耐药性结果不一致者采用基因芯片法耐药基因检测对熔解曲线法结果进行验证。以MGIT 960药敏试验检测结果为参考标准,熔解曲线法检测肺结核患者痰标本MTB对链霉素耐药性的敏感度、特异度、符合率和Kappa值分别为86.67% (39/45)、99.38% (483/486)、98.31% (522/531)和0.887;检测肺结核患者痰标本MTB对异烟肼耐药性的敏感度、特异度、符合率和Kappa值分别为69.23% (54/78)、98.68% (447/453)、94.35% (501/531)和0.751;检测肺结核患者痰标本MTB对利福平耐药性的敏感度、特异度、符合率和Kappa值分别为87.50% (42/48)、96.89% (468/483)、96.05% (510/531)和0.778;检测肺结核患者痰标本MTB对乙胺丁醇耐药性的敏感度、特异度、符合率和Kappa值分别为50.00% (9/18)、98.83% (507/513)、97.18% (516/531)和0.531。在熔解曲线法检测结果为耐药而MGIT 960药敏试验为敏感的30例患者中,熔解曲线法检测结果显示:对异烟肼耐药的6例均为katG 315位密码子突变;对利福平耐药的15例中,ropB 507-512、ropB 521-528、 ropB 529-533位密码子突变分别为3例、3例、9例;对链霉素耐药的3例均为rrs 513-517位点突变;对乙胺丁醇耐药的6例均为embB 306位密码子突变。基因芯片法耐药基因检测结果显示:对异烟肼耐药的6例中katG 315 (AGC→ACC)突变和katG 315 (AGC→AAC)突变各3例;对利福平耐药的15例中,ropB基因511位CTG→CCG突变、526位CAC→TAC突变和531位TCG→TGG突变各3例、3例、9例,与熔解曲线法检测结果一致。可见,荧光PCR探针熔解曲线法对链霉素、异烟肼、利福平、乙胺丁醇耐药性突变位点检测具有较好的检测效能,可用于临床上对一线抗结核药品耐药情况的快速筛查。     

脑脊液腺苷脱氨酶水平检测在结核性脑膜炎早期诊断中的价值

目的:探讨脑脊液(CSF)中腺苷脱氨酶(ADA)水平检测在结核性脑膜炎(TBM)早期诊断中的价值。方法:收集以头痛、发热、精神状态改变和脑膜刺激征为特征的疑似TBM患者65例为研究对象。根据确诊结果将所有患者分为TBM组(45例)和非TBM组(20例)。所有患者在住院后2周内进行腰椎穿刺术,留取CSF,检测并比较两组患者CSF中ADA水平。采用受试者工作特征(ROC)曲线评估ADA对TBM的早期诊断价值。结果:TBM组CSF中ADA水平在3～26 U/L,中位数(四分位数间距)为8(6,10)U/L。非TBM组CSF中ADA水平在0～5 U/L,中位数(四分位数间距)为1(0,2.75)U/L。TBM组患者CSF中ADA水平高于非TBM组(Z=-6.176,P<0.05)。ROC曲线分析结果显示,当CSF中ADA水平为4.5 U/L时,其诊断TBM的曲线下面积(AUC)为0.98,敏感度为93.33%,特异度为90.00%。结论:TBM患者CSF中ADA水平升高,在TBM早期诊断中具有较高的敏感性和特异性。     

复方夏枯草的化学成分研究

目的：研究复方夏枯草的化学成分.方法：利用各种色谱技术进行分离纯化,根据化合物的理化性质和波谱数据进行结构鉴定.结果：从氯仿部位中分离出4个单体化合物,分别为钩藤碱、莨菪碱、二氢白屈菜红碱、25（29）-亚甲基-26-甲基-26-乙基胆甾醇.结论：其中化合物Ⅲ（二氢白屈菜红碱）和化合物Ⅳ（25（29）-亚甲基-26-甲基-26-乙基胆甾醇为首次在该方中发现的化合物.     

HPLC法测定桔贝合剂中黄芩苷的含量

目的:建立以高效液相色谱法测定桔贝合剂中黄芩苷含量的方法。方法:色谱柱为Spherisorb C18(200mm×4.6mm,5μm),流动相为甲醇-水-磷酸(47:53:0.2),检测波长为280nm,流速为1mL.min-1,柱温为室温。结果:黄芩苷进样量在0.1024～0.9216μg范围内与峰面积积分值呈良好线性关系;平均加样回收率为99.98%,RSD=0.95%(n=6)。结论:本方法精密度高、分离度好,可用于桔贝合剂的质量控制。     

分枝杆菌培养中同步筛检依赖利福平结核分枝杆菌(依R菌)的临床应用价值

目的 分析探讨培养分枝杆菌时同步筛检依赖利福平结核分枝杆菌(依R菌)临床意义及价值. 方法 2011年3月—2015年3月所采集530例临床标本进行培养使用利福平浓度100μg/mL罗氏(L-J)培养基建立依R菌筛查系统,将待分离培养分枝杆菌平行接种于罗氏对照空白培养基(L-J)与L-J R100培养基中分别培养,依照培养基选用种类分别分成L-J R100、L-J、BD960 3组, 并对结果 进行分析统计. 结果 L-J R100培养基检出76例阳性结核分枝杆菌,且皆为依R菌,菌株粗大,生长良好,L-J R100阳性菌株所占比例为14.34%,L-J阳性菌株所占比例23.21%, BD960阳性菌株所占比例为52.83%. 结论 培养分枝杆菌时同步筛查依R菌能得到绝对依赖菌株,可提高分枝杆菌阳性检出率,可最快速度判断阳性菌株耐药性及是否对利福平具依赖性,该方法 可靠易行,具有临床推广价值.     

DNA实时荧光恒温扩增法在结核病临床检测中的应用价值

目的分析DNA实时荧光恒温扩增法(简称"恒温扩增法")在结核病临床检测中的应用价值。方法收集2019年1—6月西安市胸科医院收治的疑似肺结核患者2421例,其中共有356例患者留取的痰液标本同时进行了BACTEC MGIT 960液体培养、利福平耐药实时荧光定量核酸检测(GeneXpert MTB/RIF法)、传统DNA实时荧光定量核酸检测(FQ-PCR法)、结核分枝杆菌RNA实时荧光恒温扩增(SAT-RNA法)、恒温扩增法检测。以MGIT 960技术检测结果为金标准,计算其他4种检测技术的敏感度、特异度、阳性预测值、阴性预测值、符合率、Kappa值。对恒温扩增法阳性的121份核酸样本使用熔解曲线法检测利福平ropB基因,研究恒温扩增法提取核酸应用于耐药基因检测的价值。结果以MGIT 960技术检测结果为金标准,恒温扩增法的敏感度(78.83%,108/137)低于GeneXpert MTB/RIF法(95.62%,131/137),高于FQ-PCR法(74.45%,102/137)和SAT-RNA法(59.12%,81/137),差异均有统计学意义(χ²值分别为...     

γ-干扰素释放试验在结核病专科门诊诊断儿童活动性结核病的效能

目的 评价γ-干扰素释放试验(interferon-gamma release assay, IGRA)在结核病专科门诊诊断儿童活动性结核病的效能。方法 回顾性分析2019年1月至2021年12月就诊于西安市胸科医院结核病门诊的268例疑似结核病患儿为研究对象,采用area under the ROC curve (AUC)评估在不同年龄阶段,有无卡痕,有无结核病密切接触史患儿中IGRA诊断活动性结核病的效能。结果 在结核病专科门诊,IGRA诊断儿童活动性结核的敏感度、特异度、阴性预测值、阳性预测值、AUC分别为80.6%、63.6%、48.6%、88.5%、0.74。IGRA诊断儿童结核病AUC(95%CI值),在年龄≤5岁患儿中为0.71(0.62～0.80),低于6～14岁组的0.75(0.70～0.81),两组差异无统计学意义(Z=-0.848,P=0.40);在可见卡痕患儿中为0.72 (0.67～0.78),与未见卡痕组的0.72(0.61～0.83)无统计学差异(Z=0.067,P=0.946);在有密接史组为0.83(0.75～0.91),高于无密接史组的0.72(0....     

一起因进食咸血鱼引起的组胺中毒

一起因进食咸血鱼引起的组胺中毒邓寿才，韦海标，杨翰１９９５年３月２０日，广西贵港市入塘乡潘村水豆腐砖场发生因进食咸血鱼（也称假马鲛鱼），造成７人组肢中毒，现将情况报告如下。１流行病学调查１９９５年３月２０日上午，广西贵港市八塘乡潘村水豆腐砖场业主姚某...     

反应停治疗作用新进展

反应停于50年代以镇静药上市而因致畸作用于60年代初停用，但该药的一些新作用却不断被开发出来，目前主要用于治疗麻风病等炎性疾病和艾滋病相关症状，并向作免疫调节剂和抑制血管生成药物。     

三种实验方法检测胸腔积液对结核性胸膜炎的诊断价值分析

目的 探讨GeneXpert MTB/RIF实验、结核感染T细胞斑点试验(T-SPOT.TB)以及结核分枝杆菌液体培养在结核性胸膜炎诊断中的价值。方法 选取临床已经确诊结核性胸膜炎的患者142例和非结核性胸膜炎患者51例,对其胸腔积液样本分别进行GeneXpert MTB/RIF检测、T-SPOT.TB以及结核分枝杆菌培养,分析比较三种方法并联和串联对结核性胸膜炎的诊断价值。结果 结核性胸膜炎患者T-SPOT.TB的阳性率显著高于其他两种方法。GeneXpert MTB/RIF检测、T-SPOT.TB以及结核分枝杆菌培养的敏感度分别为16.9%,81.0%和24.6%,特异度分别为98.0%,33.3%和86.3%,其中T-SPOT.TB试验的敏感度最高,特异度最小。三种方法串联后形成的四种不同方案的敏感度均低于19%,特异度均高于90%。三种方法并联后形成的四种不同方案的敏感度存在差异,其中GeneXpert MTB/RIF检测与结核培养试验并联方案的敏感度为29.6%,显著低于其他三种方案,其特异度为86.3%,显著高于其他三种方案。结论 在结核性胸膜炎诊断中,T-SPOT.TB试验具有较高的敏感度,而GeneXpert MTB/RIF检测以及结核分枝杆菌培养具有较高的特异度; 三者不同串联方案均具有很高的特异度; 并联方案中,GeneXpert MTB/RIF检测与结核培养试验并联的诊断特异度最高,对通过胸腔积液诊断结核性胸膜炎提供重要参考价值。