载氟尿嘧啶pH敏感树枝状聚合物纳米载体的体外释药及对人肝癌细胞药效学评价

目的 考察pH值对氟尿嘧啶（5-FU）从pH敏感树枝状聚合物纳米载体（mPEG-pDEA-PAMAM,PDP）中释放的影响,以及该载体制剂在不同pH值条件下对人肝癌HepG2细胞的作用。 方法 用HPLC分析方法测定释放介质中5-FU浓度,考察不同pH值条件下5-FU从PDP释放的特征。用不同pH值培养基体外培养人肝癌细胞株HepG2细胞,建立模拟体内肿瘤组织微环境的细胞模型,MTT法研究PDP制剂对HepG2细胞的抑制率及细胞毒性。结果 PDP在弱酸性环境（pH 6.5）中迅速释放5-FU,而在中性环境（pH 7.4）中释放很缓慢。在pH 6.5条件下,5-FU-PDP与5-FU水溶液同样对HepG2细胞生长有明显抑制作用,单用PDP没有明显细胞毒性。结论 5-FU-PDP纳米制剂具有明显pH值敏感释药的特点,能在肿瘤弱酸性环境下快速释药并发挥药效,可能成为理想的抗肿瘤药物靶向载体。     

靶向5-LOX的siRNA诱导胰腺癌细胞的凋亡

目的:采用RNA干扰技术(siRNA)阻断5-LOX基因的表达,观察其抑制人胰腺癌细胞增殖及诱导细胞凋亡的作用.方法:构建靶向5-LOx的siRNA质粒表达载体,采用Lipofectamine-2000转染人胰腺癌细胞株SW1990,采用RT-PCR检测RNA干扰后5-LOX mRNA表达,MTT法检测细胞的增殖抑制率,流式细胞仪检测细胞凋亡率.结果:靶向5-LOX序列特异性的三条siRNA(组1、组2、组3)可以有效地抑制SW1990细胞5-LOX基因表达,其表达抑制率分别为19.6%±1.9%、55.4%±2.6%和55.2%±2.7%.转染靶向5-LOX siRNA的三个质粒表达载体可以显著抑制SW1990细胞的增殖, 细胞接种24 h后,三组增殖抑制率分别为5.37%±1.19%、11.63%±1.25%和13.67%±1.04%:48 h后其增殖抑制率分别为16.13%±1.5%、26.63%±1.22%和25.47%±1.67%, 各siRNA组增殖抑制率高于空白组和阴性对照组(均P<0.05),转染后24 h和48 h三组细胞凋亡率分别为5.56%±1.05%、11.45%±1.44%、12.13%±1.36%和7.37%±1.23%、18.75%±1.5%和22.02%±1.45%,均高于空白对照组和阴性对照组(P<0.05).结论:所构建的靶向5-LOX的siRNA质粒表达载体可以有效阻断SW1990细胞5-LOX基因表达,显著地抑制SW1990细胞增殖,并在一定程度上诱导其凋亡.     

非穿透性小梁手术与小梁切除术治疗青光眼的远期疗效分析

目的对比观察非穿透性小梁手术和小梁手术切除术治疗青光眼的远期疗效。方法选取2008年1月-2010年12月同期治疗的青光眼患者80例,并将它们分为两组。其中经非穿透性小梁手术治疗的患者36例（36只眼）,以此作为I组,小梁切除术治疗患者44例（44只眼）,以此作为11组。并在手术后2个月到1年内对两组患者的眼压、滤过泡及并发症等情况进行对照研究。结果手术后1年f组患者的平均眼压为（18．14-56）mmHg,II组患者的平均眼压为（17．3±51）mmHg,两组患者的眼压无明显差别（P〉0．05）;术后1年I组与II组的并发症发生率分别为19．5％和591％,差异具有统计意义（P〈0．05）。结论非穿透性小梁切除手术和一般小梁切除手术都能有效治疗青光眼,但前者的疗效更好,具有安全性高、术后并发症少的优点。     

O-GlcNAc糖基转移酶表达下调对tau蛋白磷酸化的影响

目的:以人O-GlcNAc糖基转移酶(OGT)基因为靶点,研究小干扰RNA(small interference RNA,siRNA)对HEK293T细胞中OGT基因表达的抑制作用,以及这种抑制作用对tau蛋白磷酸化与糖基化修饰的影响。方法:根据人OGT基因序列特点,设计高效且特异性强的siRNA。用脂质体转染siRNA进入HEK293T细胞,通过实时PCR检测siRNA对OGT基因表达的抑制。用蛋白免疫印迹法检测tau蛋白糖基化与磷酸化修饰的变化。结果:设计的siRNA能够有效抑制OGT基因的表达,与空白组相比,抑制效率可达78.1%左右。OGT基因表达的下调使tau蛋白糖基化水平下降,而磷酸化水平增高。结论:tau蛋白的糖基化负调节其磷酸化,葡萄糖摄入减少或代谢降低可能在阿尔茨海默尔病的发生发展中起关键作用。     

细胞内siRNA传递：应用修饰的细胞穿透肽从内涵体逃逸

RNA干扰介导的基因沉默是一种有前景的基因疗法,其中使RNA安全有效地进入胞浆很重要。细胞膜是RNA传递的首要障碍,也最难跨越,带负电性的细胞膜强烈排斥RNA。各种阳离子聚合物已被作为RNA载体,与RNA相互作用,掩盖其负电荷,形成细胞穿透性复合物。阳离子型细胞穿透肽（cell-penetrating piptide,CPP）能携RNA一起穿过细胞膜进入细胞内部,在以CPP为基础的RNA传递中,大多数RNA被细胞内吞后包埋在内涵体中。本文综述基于CPP的RNA递送方法及RNA从内涵体逃逸的策略。     

5例急性巨核细胞白血病患者免疫表型结果分析

目的通过对急性巨核细胞白血病患者白血病细胞免疫表型进行检测来分析各种血细胞表面分化抗原(CD)在急性巨核细胞白血病诊断及鉴别诊断当中的作用。方法应用BD公司流式细胞仪及其配套检测试剂盒检测5例急性巨核细胞白血病患者血细胞CD。结果所有患者均表达CD41和CD42,阳性率100%;淋系抗原均为阴性;CD13阳性者有4例,阳性率80%;CD33阳性者3例,阳性率60%;表达CD14和CD15者各1例,阳性率各占20%。结论检测结果显示CD41和CD42在急性巨核细胞白血病诊断及鉴别诊断中具有重要的价值,同时也再次验证了急性巨核细胞白血病患者血细胞存在有"系列非专一性"的特点。     

细胞内siRNA传递：应用修饰的细胞穿透肽从内涵体逃逸

RNA干扰介导的基因沉默是一种有前景的基因疗法，其中使RNA安全有效地进入胞浆很重要。细胞膜是RNA传递的首要障碍，也最难跨越，带负电性的细胞膜强烈排斥RNA。各种阳离子聚合物已被作为RNA载体，与RNA相互作用，掩盖其负电荷，形成细胞穿透性复合物。阳离子型细胞穿透肽（cell-penetrating piptide，CPP）能携RNA一起穿过细胞膜进入细胞内部，在以CPP为基础的RNA传递中，大多数RNA被细胞内吞后包埋在内涵体中。本文综述基于CPP的RNA递送方法及RNA从内涵体逃逸的策略。     

超声乳化联合小梁切除术治疗青光眼合并白内障临床疗效

目的:探讨超声乳化联合小梁切除术治疗青光眼合并白内障的临床治疗效果,进一步分析该方法的安全性与有效性。方法:选取2012年2月-2014年1月于我院就诊的青光眼合并白内障患者共45例,采用超声乳化联合小梁切除术的治疗方案对所有患者进行治疗,通过分析比对手术前后患者视力、眼压、前房数据的变化,分析该种手术方案的安全性与临床治疗效果。结果:参与研究的45例青光眼合并白内障患者在接受超声乳化联合小梁切除术后,视力水平均较术前有显著提升、术后眼压较术前下降明显,统计差异具有统计学意义,P0.05;其中角膜水肿2例,眼压过低、前房渗出各1例,无出现角膜萎缩、视网膜脱落或后囊破裂等并发症的患者,且上述病征在治疗后均已基本消失。结论:超声乳化联合小梁切除术治疗青光眼合并白内障的临床治疗效果确切,能有效改善患者术后视力水平、稳定眼压、降低患者患严重并发症的几率,对进一步提高患者预后质量具有积极意义,值得临床推广。     

超声乳化联合小梁切除术治疗青光眼合并白内障临床疗效

目的：探讨超声乳化联合小梁切除术治疗青光眼合并白内障的临床治疗效果，进一步分析该方法的安全性与有效性。方法：选取2012年2月-2014年1月于我院就诊的青光眼合并白内障患者共45例，采用超声乳化联合小梁切除术的治疗方案对所有患者进行治疗，通过分析比对手术前后患者视力、眼压、前房数据的变化，分析该种手术方案的安全性与临床治疗效果。结果：参与研究的45例青光眼合并白内障患者在接受超声乳化联合小梁切除术后，视力水平均较术前有显著提升、术后眼压较术前下降明显，统计差异具有统计学意义，P＜0．05；其中角膜水肿2例，眼压过低、前房渗出各1例，无出现角膜萎缩、视网膜脱落或后囊破裂等并发症的患者，且上述病征在治疗后均已基本消失。结论：超声乳化联合小梁切除术治疗青光眼合并白内障的临床治疗效果确切，能有效改善患者术后视力水平、稳定眼压、降低患者患严重并发症的几率，对进一步提高患者预后质量具有积极意义，值得临床推广。     

临床生物化学检验实验教学改革研究

目的改革传统的临床生物化学检验实验课教学方法,增强实验课的教学效果,提高学生的基本操作技能与创新思维能力。方法加强学生实验室基本操作技能,同时对实验考核方法进行改革;开设以病案分析为基础的设计性实验;多安排学生到医院见习;开展PCR实验课。结果学生的基本操作技能及对生物化学项目检测结果的综合性判断能力得到提高,实验课的教学效果得到增强。结论对生物化学检验实验课进行教学改革,能提高学生的基本操作能力、动手能力与思维能力,为学生更好地进入临床实践打下良好的基础。