肺癌肿瘤抑制因子1对膀胱癌裸鼠移植瘤的抑制作用及机制

目的 观察肺癌肿瘤抑制因子1(TSLC1)对膀胱癌裸鼠移植瘤的抑制作用,并探讨其作用机制。方法将TSLC1过表达人膀胱癌T24细胞株(Ad-TSLC1-T24组)、空载体对照T24细胞株(Ad-T24组)及空白对照T24细胞株(T24组)种植于裸鼠皮下,绘制肿瘤生长曲线,种植细胞5周处死全部裸鼠留取肿瘤组织标本,测量肿瘤体积,称量瘤重,计算抑瘤率,光镜观察移植瘤组织病理变化,RT-PCR法检测移植瘤组织中TSLC1、B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶3(Caspase-3)mRNA表达,Western blotting法检测移植瘤组织中TSLC1、Bcl-2、Caspase-3蛋白表达。结果 肿瘤生长曲线显示Ad-TSLC1-T24组移植瘤生长明显慢于Ad-T24组及T24组,种植细胞5周Ad-TSLC1-T24组肿瘤体积及质量低于Ad-T24组及T24组(P均<0.05),抑瘤率高于Ad-T24组(P<0.05)。HE染色结果显示,Ad-TSLC1-T24组移植瘤细胞出现明显的核固缩、核碎裂等凋亡现象。与Ad-T24组、T24组比较,Ad-TSLC1-T24组移植瘤中TSLC1、Caspase-3 mRNA及蛋白相对表达量增加,Bcl-2 mRNA及蛋白相对表达量降低(P均<0.05)。结论 TSLC1过表达可抑制膀胱癌裸鼠移植瘤生长,其机制可能与上调Caspase-3表达和下调Bcl-2表达促进了肿瘤细胞凋亡有关。     

细胞粘附分子-1抑制膀胱癌细胞侵袭转移的机制研究

目的：探讨细胞粘附分子-1(cell adhesion molecule-1,CADM1）过表达和干扰前后对人膀胱癌T24细胞恶性行为的影响及其机制。方法：利用前期构建的Ad-CADM1-T24、Ad-GFP1-T24、Ad-sh1-T24、Ad-GFP2-T24稳转细胞株,以T24细胞作为对照,Western blot检测细胞周期相关蛋白p27、cyclinD1、cyclinE1、CDK2,上皮-间充质转化（epithelial-mesenchymal transi－tion,EMT）相关蛋白E-cadherin、β-catenin、Vimentin,凋亡相关蛋白caspase-3、bcl-2、bax的表达情况;MTT法检测细胞增殖能力;Transwell侵袭实验检测细胞侵袭能力。结果：Western blot结果显示Ad-CADM1-T24细胞与其他细胞相比,凋亡相关蛋白caspase-3、bax表达量升高,bcl-2表达量降低;细胞周期相关蛋白p27表达量明显上调,cyclinD1、CDK2、cyclinE1表达量明显下调;EMT相关蛋白E-cadherin、β-catenin表达量明显上调,Vimentin表达量明显下调;MTT结果显示Ad-CADM1-T24细胞与其他细胞相比,细胞增殖明显受到抑制,差异具有统计学意义（P<0.05）;Transwell侵袭实验结果显示,Ad-CADM1-T24细胞与其他细胞相比,24 h细胞穿膜数量明显降低,差异具有统计学意义（P<0.05）。结论：CADM1过表达可明显抑制膀胱癌细胞的侵袭转移,其机制可能与抑制细胞增殖和EMT及促进细胞凋亡有关。     

中国泌尿外科医师慢性前列腺炎诊治行为十年变化

目的探究中国泌尿外科医师对慢性前列腺炎(chronic prostatitis,CP)诊治行为的变化。方法以问卷形式调查全国29个省、直辖市、自治区1 025名泌尿外科医师。调查内容包括对CP病因的认识、诊断和治疗方法选择等。结果纳入有效问卷1 025份。39.0%(400/1 025)的医师采用传统分类法。认为细菌感染、非细菌感染、膀胱及盆底功能障碍为CP病因的医师较2006年增加。最常应用的检查方法仍为前列腺液常规检查(88.8%,910/1 025),选择其余检查方法的医师比例均高于2006年。大多数医师选择药物治疗(85.6%,877/1 025),选择心理治疗及前列腺按摩的医师比例下降。最常使用的药物是α受体阻滞剂(88.4%,906/1 025),使用抗生素的医师比例下降,两次调查各类抗生素的使用情况均不同。结论中国泌尿外科医师对于CP的诊治行为相较与10年前有所变化,但仍需进一步规范。     

中国泌尿外科医师诊治慢性前列腺炎的影响因素

目的探讨医师诊治慢性前列腺炎(CP)的潜在影响因素。方法对来自全国29个省市的泌尿外科医师进行问卷调查,使用单因素和多因素logistic回归分析模型对数据进行统计学分析以确定影响因素。结果共收回问卷1 087份,其中有效问卷1 025份。多因素logistic回归分析显示:是否采用两杯法或四杯法、学历是影响医师使用National Institutes of Health(NIH)分类法与否的关键因素。是否认为细菌感染是CP的病因是影响医师是否常规行细菌培养及是否使用抗生素的关键因素。是否认为心理因素是CP的病因是影响医师行心理评估与否的因素。是否认为心理因素是CP的病因、是否行心理评估、工作年限为影响医师是否使用心理治疗的关键因素。是否认为膀胱和盆底功能障碍是CP的病因为影响医师测定尿流率与否的关键因素。是否认为膀胱和盆底功能障碍是CP的病因、工作年限为影响医师是否使用α-受体阻滞剂的关键因素。结论医师个人对疾病的认知及诊治观念是CP诊断与治疗的重要影响因素。     

T_1期低级别膀胱癌电切术后吉西他滨灌注临床效果分析:67例单中心经验

目的:比较膀胱癌术后行吉西他滨(GEM)或表柔吡星(EPI)灌注的临床结局。方法:选择2014年1月1日~2016年1月1日于我院诊治的膀胱肿瘤患者,入选标准:膀胱灌注GEM或者EPI;病理分期为pT1期低级别的患者;排除标准:膀胱全切;病理分期pT1期高级别以上患者;其他灌注药物或未行灌注患者。结果:共入组264例患者,中位随访16(3~26)个月,其中行GEM灌注67例(GEM组),行EPI灌注197例(EPI组);GEM组发热患者22例(32.8%),EPI组发热患者30例(15.2%),两组比较差异有统计学意义(P0.05);GEM组出现明显膀胱刺激症状15例(22.4%),EPI组23例(11.7%),两组比较差异有统计学意义(P0.05);GEM组中位灌药时间(26.3±16)min,EPI组中位灌药时间(31.2±17)min,两组比较差异有统计学意义(P0.05);GEM组灌药后血尿7例(10.4%),EPI组灌药后血尿21例(10.7%),两组比较差异无统计学意义(P0.05);GEM组患者中位肿瘤无复发生存期为10.9个月,EPI组患者中位肿瘤无复发生存期为9.7个月,两组比较差异有统计学意义(P0.05);GEM组随访期内复发14例(20.9%),EPI组随访期内复发49例(24.9%),两组比较差异无统计学意义(P0.05)。结论:与灌注EPI患者相比,膀胱癌术后行GEM灌注者有较为明显的不良反应,但有更长的肿瘤无复发生存期,可以综合考虑患者的临床基本情况选择合适的灌注药物。     

输尿管结石致尿脓毒血症患者发生严重脓毒症或脓毒性休克的危险因素分析

目的：探讨输尿管结石导致尿脓毒血症患者进展为严重脓毒症或脓毒性休克的相关危险因素,为临床识别高危患者提供参考。方法：回顾性收集我院2016年1月至2017年12月由急诊接诊的输尿管结石伴尿脓毒血症患者的临床资料,根据是否进展为严重脓毒症或脓毒性休克分为病例组和对照组,分别对性别、年龄、体质指数（body mass index,BMI）、糖尿病、既往结石手术史、结石部位、结石大小、肾积水程度、外周血白细胞计数、血小板计数、血清白蛋白水平、肌酐、C-反应蛋白（C-reactive protein,CRP）、降钙素原（procalcitonin,PCT）、尿培养、血培养等影响因素进行单因素分析,并对显著相关性危险因素进行Logistic回归分析。结果：单因素分析结果显示,2组间性别、年龄、合并糖尿病、外周血白细胞计数、血小板计数、血清肌酐值、CRP、PCT,差异有统计学意义（P<0.05）;BMI、既往结石手术史、结石大小、结石部位、肾积水程度、血清白蛋白水平、尿培养、血培养,差异无统计学意义（P＞0.05）。多因素分析显示,与尿脓毒血症进展最相关的因素为年龄、外周血白细胞计数、血小板计数及CRP。结论：输尿管结石致尿脓毒血症患者中,年龄、外周血白细胞计数、血小板计数及CRP是其进展为严重脓毒症或脓毒性休克的危险因素,对于此类患者应积极处理。     

泌尿外科医师对前列腺炎诊治行为的调查

<正>前列腺炎是成年男性的常见疾病,有资料显示约有50%的男性在一生中的某个时期会受到前列腺炎的影响[1]。在中国,15~60岁男性报告前列腺炎症状的比例为8.4%[2]。部分前列腺炎可能严重影响患者的生活质量[3-4],并对公共卫生事业造成巨大的经济负担[5]。由于前列腺炎尤其是慢性前列腺炎(chronic prostatitis,CP)的发病机制、病理生理学改变还不十分清楚,许多医师在临床诊治过程     

胰岛素治疗对糖尿病大鼠阴茎组织中miR-126、VEGF、eNOS表达的影响

目的:研究胰岛素治疗对糖尿病大鼠阴茎组织中miR-126、VEGF、eNOS表达的影响。方法:8周龄雄性Sprague-Dawley（SD）大鼠30只,采用随机数字表将其分为正常对照组（NC组）、糖尿病组 （DM组）和胰岛素治疗组（Insulin组）。腹腔内注射链脲佐菌素（STZ）建立糖尿病（DM）大鼠模型,Insulin组于成模后开始注射胰岛素,连续8周。治疗结束后,检测各组大鼠的体重、血糖、阴茎海 绵体内压（ICP）、平均颈动脉内压（MAP）及ICP与MAP比值（ICP/MAP）,阴茎海绵体中内皮型一氧化氮合酶（eNOS）、血管内皮生长因子（VEGF）及miR-126的表达量。结果:胰岛素治疗后,Insulin组 的体重较DM组明显增加（t=-10.481,P<0.001）,血糖较DM组显著降低（t=4.356,P<0.001）;Insulin组的ICP/MAP较DM组明显增加（t=-14.349,P<0.001）;Western印迹结果显示,Insulin组阴茎海 绵体中eNOS及VEGF蛋白表达量均较DM组显著增加（t=-6.786,-21.177,均P<0.001）。RT-PCR结果显示,Insulin组阴茎海绵体中eNOS、VEGF和miR-126的表达量均较DM组显著增加（t=-6.994、- 8.238、-10.665,均P<0.001）。但上述指标均未达到NC组水平。结论:胰岛素治疗可增加阴茎组织中miR-126、VEGF及eNOS的表达水平。     

衰老微环境对非肌层浸润性膀胱癌预后的影响及机制初步探讨

目的:探讨衰老微环境对非肌层浸润性膀胱癌(NMIBC)预后的影响并初步探讨相关机制。方法:选取单县中心医院初诊的NMIBC患者81例,按照患者年龄分为低龄组(65岁)和高龄组(≥65岁)两组,比较分析两组患者无复发生存期及无进展生存期,采用Cox回归模型分析影响NMIBC患者预后的危险因素。并留取同期癌旁正常膀胱黏膜组织30例作为对照,采用免疫组化法检测分析正常膀胱黏膜、低龄组及高龄组NMIBC中分泌型Frizzled相关蛋白2(secreted frizzled-related proteins 2,sFRP2)及β-catenin的表达水平。结果:低龄组患者的无复发生存率和无进展生存率均高于高龄组患者(P0.05),多因素分析发现年龄是NMIBC患者复发和进展的独立危险因素。sFRP2在低龄组及高龄组NMIBC组织中,表达的阳性率均低于正常膀胱黏膜(P0.05);高龄组sFRP2的表达阳性率明显高于低龄组(P0.05)。β-catenin低龄组及高龄组NMIBC组织中表达的阳性率均高于正常膀胱黏膜组织(P0.05);高龄组β-catenin的表达阳性率明显低于低龄组(P0.05)。结论:衰老微环境可能在膀胱癌的发生发展中发挥了一定作用。sFRP2及β-catenin可能参与了衰老微环境对膀胱癌发生发展过程的调控。     

过表达及沉默细胞黏附分子1基因膀胱癌细胞株的构建

目的构建过表达及沉默细胞黏附分子1(CADM1)基因的膀胱癌细胞株。方法培养并收集膀胱癌细胞株T24。1过表达CADM1基因T24细胞构建:将T24细胞分为1、2、3组,real-time PCR扩增CADM1基因全长,与慢病毒载体p HBLV-IRES-Zs Green-PGK-puro进行连接(1组),并设载体对照组(2组)和空白对照(3组);经酶切及测序鉴定正确后在293T细胞中包装病毒,病毒浓缩后感染T24细胞。2沉默CADM1基因T24细胞构建:将T24细胞分为A、B、C、D、E组,设计3条针对CADM1基因的干扰序列(siRNA1/2/3)分别与载体p HBLV-U6-shRNA-ZsGreen-Puro进行连接(A、B、C组),D组与p HBLV-U6-Zs Green-Puro进行连接,E组为空白对照;经双酶切、PCR及测序鉴定连接载体,在293T细胞中包装病毒,病毒浓缩后感染T24细胞。采用real-time PCR检测T24细胞中的CADM1 mRNA,Western blotting法检测CADM1蛋白。结果过表达和沉默CADM1基因的慢病毒载体及细胞株均正确构建。1、2、3组CADM1 mRNA相对表达量分别为4.84±0.02、1.12±0.03、1.00±0.00,CADM1蛋白相对表达量分别为4.53±0.03、1.05±0.04、1.00±0.01,1组CADM1 mRNA及蛋白相对表达量高于2、3组(P均<0.05)。A、B、C、D、E组CADM1 mRNA相对表达量分别为0.28±0.05、0.98±0.02、0.74±0.01、0.99±0.01、1.00±0.00,CADM1蛋白相对表达量分别为0.33±0.04、0.86±0.12、0.67±0.07、1.00±0.04、1.00±0.03,A组CADM1 mRNA及蛋白相对表达量低于B、C、D、E组(P均<0.05)。结论成功构建了过表达及沉默CADM1基因的膀胱癌细胞株T24。