CPP-SOM整合cDNA基因芯片平台的建立

目的　在转录组水平全面迅速地了解疾病发生和药物作用的分子机理 ,以及寻找潜在的治疗靶标。方法　通过建立基因芯片平台 ,用全反式维甲酸诱导急性早幼粒细胞白血病来源的 NB4细胞分化作为模型 ,并应用自主开发的自组织图结合成分平面展示 (componentplane presentation integrated self-organizing map,CPP- SOM)的方法对数据进行初步分析。结果　建立的 c DNA芯片共有 12 6 30条克隆 ,其中已知基因 94 36条。应用该芯片进行实验 ,结果重复性好、准确性高。CPP- SOM不仅可以将功能相关的基因进行聚类 ,而且可以动态性地从全基因组水平观察药物作用过程中基因的表达变化。结论　我们建立的芯片平台是稳定、可靠的技术平台 ,CPP- SOM是一种新型有效的芯片数据的处理方法。     

HT29和HCT116结肠癌细胞无血清培养形成肿瘤干细胞球特性的差异性研究

目的比较HT29和HCT116两种结肠癌细胞系中肿瘤干细胞的差异，初步探讨结肠癌干细胞研究模型。方法以无血清培养法培养HT29和HCT116细胞，观察其在不同时间形成肿瘤干细胞球的差异，用限制性稀释法计算两者的成球率；流式细胞术分析HT29和HCT116细胞系中CD44／CD24的表达情况；裸鼠体内成瘤实验鉴定HT29细胞球与HCT116细胞球成瘤能力。结果无血清培养法发现HCT116较HT29更易形成肿瘤干细胞球且所需时间更短，即HT29在无血清培养的第7天开始形成规则的球体，而HCT116则在第5天就已形成规则的球体，HCT116成球率（11．4±1．15）％高于HT29（3．31±0．27）％，且差异有统计学意义（P〈0．05）；HT29和HCT116中CD44±／CD24±各细胞含量有显著差异，结果显示具有干细胞特性的CD44＋／CD24＋结肠癌细胞在HCT116中所占比例（60．33±5．75）％明显高于HT29（9．23±2．15）％，差异有统计学意义（t=13．939，P〈0．05）；体内成瘤实验发现HCT116细胞球在裸鼠体内的成瘤能力明显强于HT29细胞球，HCT116细胞球的成瘤速度及瘤体生长速度都较HT29细胞球快。结论与HT29相比，HCT116结肠癌细胞系更适合作为肿瘤干细胞研究的模型。     

534名中学生心理健康状况和相关风险行为调查

关于中学生心理健康的研究屡见报道 ,但结果不尽相同[1-3 ] 。鉴于目前齐齐哈尔地区青少年精神疾患增多 ,素质教育相对滞后的实际情况 ,齐齐哈尔铁路中心卫生防疫站于2 0 0 1年 6月 ,对齐铁地区中学生心理健康状况与危险行为 ,做了抽样调查 ,现将结果报告如下。对象与方法1 对象　选择齐齐哈尔铁路第六中学 1～3年级初中学生。2 方法　以分层整群抽样的方法 ,确定调查样本。采用自拟问卷 ,由校医利用生理卫生课的时间 ,讲清调查的目的、意义和答卷方法 ,然后逐一发下 30分钟后全部收回。共收回有效问卷 5 34张 ,不合格问卷 7张 ,占1 30 %。…     

无血清悬浮法培养结肠癌HT29细胞系及肿瘤干细胞样亚群筛选

目的:研究无血清培养基悬浮培养人结肠癌细胞系HT29,筛选并鉴定HT29结肠癌细胞系中肿瘤干细胞相关亚群。方法:通过无血清培养基筛选结肠癌细胞系肿瘤干细胞相关亚群。应用克隆形成实验、表面标志检测、双苯酰亚胺(Hoechst)33342染色检测来确定培养细胞中肿瘤干细胞比例及其培养后的肿瘤干细胞含量变化。结果:结肠癌细胞系HT29中约50%的肿瘤细胞在无血清培养基中能够存活、增殖,形成自由飘浮的细胞球。细胞球可连续传代,若重新接种于含血清培养基中可重新贴壁分化,分化后细胞与培养储存的HT29细胞形态无明显差异。流式细胞仪检测表面标志,HT29细胞系中CD44+细胞含量为(44.18±2.18)%,而细胞球中CD44+细胞含量为(83.41±11.21)%;双苯酰亚胺33342染色检测提示HT29中侧群(sidepopulation,SP)细胞含量为(3.82±0.08)%,而细胞球中含量明显增高。结论:结肠癌细胞系HT29可在含生长因子的无血清培养基中悬浮生长,并维持细胞系。该细胞系中含有一定比例的具有增殖和自我更新能力的结肠癌干细胞样细胞亚群。表面标志以及双苯酰亚胺33342检测差异提示细胞球中仅部分细胞具有干细胞的功能。     

表皮生长因子及其受体对结肠癌干细胞的增殖调控

背景：肿瘤干细胞是肿瘤组织中一小部分具有自我更新、多向分化以及高度增殖能力的肿瘤细胞。研究发现表皮生长因子（EGF）可促进肿瘤干细胞增殖。目的：探讨EGF及其受体（EGFR）在结肠癌干细胞增殖调控中的作用。方法：结肠癌细胞株HT29、HCTll6培养于无血清培养基中,以EGF、碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）、胰岛素样生长因子（IGF）分别干预细胞。MTT11法检测EGFR抑制剂吉非替尼对结肠癌细胞球细胞的增殖抑制作用,体外实验检测EGFR抑制剂吉非替尼、PDl53035对细胞球形成的抑制作用,流式细胞术检测细胞凋亡。体内实验检测结肠癌细胞球和细胞株的成瘤能力,real、timePCR检测两者干细胞标记LGR5、Musashi-1和分化标记CK20表达。结果：EGF组HCT116细胞形成的细胞球数量显著高于空白对照、bFGF、IGF组（P〈0．05）。吉非替尼能抑制HCT116细胞球细胞增殖和细胞球形成,并诱导细胞凋亡,作用呈浓度依赖性。HCT116细胞球成瘤时间较细胞株显著缩短,移植瘤体积显著增大（P〈0．05）。LGR5、Musashi-1在细胞球中的表达显著高于细胞株,而CK20在细胞株中的表达显著高于细胞球（P〈0．05）。结论：EGF对结肠癌细胞株HCTll6、HT29形成细胞球具有促进作用。EGFR抑制剂可抑制结肠痛细胞球增殖并诱导细胞凋亡,相关作用可能与调控LGR5、Musashi-1和CK20表i大有关。     

生物钟对卵巢排卵功能调控机制的研究进展

生物钟是指周期性波动的生理节律,其分子模型的核心是转录翻译反馈环路,参与调控女性下丘脑-垂体-卵巢轴(HPO)基因的表达节律。哺乳动物的生物钟在排卵等生殖过程中发挥重要作用。卵巢颗粒细胞、卵泡膜细胞中均存在着节律基因,参与调控排卵相关基因的节律性表达。此外,正常的排卵过程依赖于HPO轴生物钟信号的同步化,这与下丘脑视交叉上核(SCN)自主神经信号、褪黑素等有关。中枢SCN与卵巢等外周组织生物钟的不同步,可影响其正常功能,导致排卵障碍等。其具体机制尚未完全阐明,本文就近年来该领域的研究进展做一综述,旨在为认识排卵及相关疾病的病因提供新的视角。此外,在辅助生殖技术和体外受精方案中使用调节生物钟的小分子药物或许能有效改善生育力,这可能是极具发展潜力的新兴领域。     

益精提神法治疗多发性梗塞性痴呆的实验研究

目的：探讨益精提神法治疗多发性梗塞性痴呆的作用机理。方法：采用同种大鼠无菌自然干燥血凝块颈总动脉注射及跳台反射第１次跳下潜伏期为筛选指标，成功地建立了ＭＩＤ大鼠模型。在此基础上，观察益精提神法对其学习记忆能力，血清及脑组织丙二醛含量及超氧化物歧化酶活力，脑组织学单胺递质水平以及多发性脑梗塞大鼠脑组织形态结构的影响。     

降脂保肝方对高脂血症大鼠血脂、一氧化氮及血栓素B_2的影响

降脂保肝方对高脂血症大鼠血脂、一氧化氮及血栓素Ｂ２的影响（研究简报）张文高１李瑞峰２陈雨振３管昌益１胡维诚２刘玉梅２阎晓梅２杜艳芝２姬广臣１叶向荣１江巍１马学盛１１山东中医药大学２５００１４２山东医科大学２５００１２３山东中医药大学附属医院２５００１...     

利用免疫组化技术定量分析内皮损伤的方法学研究

动脉粥样硬化（Ａｓ）发生的始动环节是内皮损伤，因此，常规的组织切片和细胞培养难以对内皮细胞的损伤进行定量分析，我们将免疫组化技术用于制备内皮细胞铺片，显示了ＩｇＧ阳性细胞，并成功地进行了定量分析，报告如下。１方法１．１动物分组雄性Ｗｉｓｔａｒ大鼠２０...     

Fenretinide诱导白血病细胞凋亡的机理研究

Fenretinide（4-HPR）是人工合成的全反式维甲酸衍生物,能够通过诱导凋亡抑制多种肿瘤细胞生长和增殖,但是其机理尚不很清楚.本研究考察4-HPR对几种白血病细胞的影响,并用U937为对象研究其作用机制.在研究中进行了细胞生长和增殖实验,以膜联蛋白检测细胞凋亡,测定活性氧（ROS）和线粒体跨膜电位（△ψm）及用Western blot检测蛋白表达.研究结果表明,4-HPR能够剂量依赖性地抑制多种白血病细胞株的增殖,进一步发现4-HPR能够诱导U937细胞发生凋亡,并且此凋亡可以被维生素C所抑制.此凋亡过程伴有活性氧的升高,线粒体跨膜电位的下降,以及酶原型胱冬酶-8（caspase-8）,-3的蛋白水平表达下降.结论：4-HPR可能通过升高细胞内ROS的水平,造成线粒体膜损伤,引发由caspase家族成员介导的凋亡,提示4-HPR可能是一种线粒体靶向的药物.