恶性疟原虫保护性单克隆抗体的分离和纯化

为制备亲和吸附剂,提取恶性疟原虫保护性抗原,我们用ProteinA亲和吸附柱,自小鼠腹水中提取抗恶性疟原虫保护性单克隆抗体。腹水上柱后,用0.1M PBS洗涤杂蛋白,用0.1M醋酸洗脱吸附的McAb。洗脱液经透折。浓缩后,用SDS—PAGE鉴定纯度,免疫荧光及双扩散试验检测其活性。 四个杂交瘤株(9_4D_1,9_4C_3,9_2D_4,9_3A_3)的腹水共60.3ml,过柱后收获McAb153.9mg,平均每毫升腹水可得2.25mg McAb,SDS—PAGE电泳图谱上显示二条区带,     

用抑制性单克隆抗体对恶性疟原虫裂殖体和裂殖子表面抗原的鉴定

根据体外抑制试验证明,94D_1,94C_3,92D:,9_3A_3,9 B和9_3D_4等6株McAb对恶性疟原虫的增殖有明显的抑制活性,为了分析这些McAb相应的靶抗原以及进一步的提取和纯化。我们首先对上述靶抗原的理化特性作了初步鉴定。用葡萄球菌A蛋白(SPA)免疫吸附柱自小鼠杂交瘤腹水中提取纯化抗恶性疟原虫保护性单克隆抗体。纯化后的单克隆抗体与溴氰活化的琼脂糖珠(Sepharose 4B)制备免疫吸附柱。将~(125)I—标记的恶性疟原虫tritonX—100提取物通过上述亲和层析柱,洗脱物经透析浓缩后,用SDS—PAGE—放射自显影鉴定与保护性McAb对应的靶抗原的分子量。同时用提纯后的McAb与恶性疟原     

疟疾抗原抗体常量交叉免疫电泳分析

本文利用交叉免疫电泳技术对诺氏疟原虫可溶性抗原进行了分析。实验系采用100×100×3mm~3琼脂糖玻璃板和含Ca~(2 )的巴比妥缓冲液、第一向电泳所用电压为8V/cm,电泳1小时,第二向电泳所用电压为2V/cm,电泳6—8/小时。电泳后经压片、洗绦、再压片、干燥、染色、脱色和再干燥步骤后观察结果。实验结果表明,作为标准对照的卵白蛋白抗原和人血清抗原分别与相应的抗血清形成许多沉淀峰,而且其抗原的浓度与沉淀峰高度明显相关。在待测抗原的分析中,诺氏疟原虫可溶性表面抗原能与相应的抗血清形成6条沉淀峰,由于所用抗原预先用同位素进行了标记,因而通过放射自显影提高了敏感性和分辨力。     

绿茶抑制实验小鼠的肿瘤诱发

流行病学调查和实验室研究显示,许多人体癌症是由环境中致癌剂诱发的,其中食物因素在肿瘤病因中至关重要,说明这些癌症是可以预防的。化学预防就是以化学药物     

大肠癌中myc基因扩增的初步分析

从44例福尔马林浸泡的癌、癌旁和正常组织抽提,得到87个DNA样品,以32P标记v-myc探针,进行滤膜斑点杂交。在33例大肠癌中癌基因扩增有6例,在4例胃癌中有1例扩增。而且,myc扩增的病例均有癌浸润和转移等恶性行为。     

用葡萄球菌蛋白A(SPA)菌体试剂免疫沉淀诺氏疟原虫裂殖体(裂殖子)靶抗原(摘要)

本文参考Kessler和Howard等报道的方法,用金黄色葡萄球菌CowanI株(SPA)菌体试剂免疫沉淀诺氏疟原虫裂殖体(裂殖子)表面抗原,获得了较为满意的结果。 用乳过氧化物酶催化的~(125)Ⅰ标记诺氏疟原虫裂殖体(裂殖子)表面抗原,后将用Tri-ton X-100提取出的标记抗原和SPA菌体试剂在室温孵育60分钟;后取100μl~(125)Ⅰ标记的诺氏疟原虫表面抗原加入到100μl的兔抗诺氏疟原虫免疫血清中,在4℃孵育18小时,使其形成免疫复合物。在室温下将100μl预先用TNT缓冲液(0.15M NaCl、10mM Tris,pH7.5,0.25%TritonX-100)洗过3次的10%SPA菌     

恶性疟人群免疫血清靶抗原的分析

本文报告利用乳过氧化物酶(LPO)催化的~(125)I放射性标记法,标记恶性疟原虫裂殖体(裂殖子)表面抗原。将标记的原虫制成TritonX—100提取物,然后分别与采自流行区的11份病人血清和非疟疾流行区正常人血清进行免疫沉淀,通过十二烷基硫酸钠—聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS PAGE)和放射自显影分析恶性疟患者血清的靶抗原。 结果指出,恶性疟裂殖体(裂殖子)的TritonX—100提取物中存在20多种表面膜抗原。分子量为270、240、183、160、137、104、98、74和63KD的多肽系免疫沉淀中的主要靶抗     

人大肠癌细胞DNA含量的细胞光度法研究

进行~3H—TdR放射自显影术和福尔根细胞光度法分析大肠癌的细胞DNA含量。DNA异倍体程度以DJ定值。外周淋巴细胞选为倍体水平的基准。我们结果显示,10例大肠癌的全部细胞(G_0,G_1,S G_2)有非二倍体DNA 6.11-12.61(DI=0.85-1.74)。此外,在7例癌细胞的放射自显影中,标记指数LI=2.2％-12.4％,在上述相同制片中。6例癌的末标记细胞(G_0·G_1)呈现DI=0.98-1.36,其中3例癌为二倍体水平,其余3例癌有超二倍体DNA含量,这与静止淋巴细胞的二倍体值差异显著。认为非整倍体可能是大肠癌重要的预后因子,倍体值测量可能成为大肠癌临床估计的有效辅助资料。     

恶性疟原虫保护性抗原的鉴定和纯化

用~(125)Ⅰ—乳过氧化物酶法标记恶件疟原虫裂殖体(子),TritonX—100提取疟原虫表面标记抗原。抗恶性疟单克隆抗体9_4D_1与上述恶性症原虫膜抗原提取物作免疫沉淀分析,并用单克隆抗体9_4D_1制备免疫吸附剂,通过亲和层析自恶性疟原虫提取物中分离纯化相应的靶抗原。结果表明,免疫沉淀的靶抗原分子量为55kd,48kd和25kd的多肽,与亲和层析纯化出的靶抗原基本一致.     

恶性疟人群免疫血清对靶抗原的分析

用乳过氧化物酶催化的~(125)I放射标记法,标记裂殖体及裂殖子为主的恶性疟原虫表面抗原。将标记原虫制成Triton x-100提取物,与流行区的11份病人血清和非流行区正常人血清进行免疫沉淀.通过SDS-PAGE和放射自显影分析恶性疟患者血清抗体的靶抗原.结果表明,上述恶性疟原虫的提取物中存在20多种表面抗原。分子量270、240、200、183、160、137、104、98、74和63KD的多肽系免疫沉淀中的主要靶抗原,其中137,104、98和63KD的多肽主要出现于三次感染以上的人群免疫血清中,表明上述多肽与诱导宿主产生的免疫力似有一定关系.